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塞来昔布对SKBR3细胞增殖、凋亡及Nucleostemin表达的影响

作 者: 张樱子
导 师: 王小丽
学 校: 华中科技大学
专 业: 人体解剖学和组织胚胎学
关键词: 塞来昔布 SKBr3细胞 增殖 凋亡 Nucleostemin MTT 免疫印迹 流式细胞术
分类号: R737.9
类 型: 硕士论文
年 份: 2011年
下 载: 3次
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内容摘要


近年来乳腺癌的发病率在世界范围内,尤其是在中国,一直呈增高的趋势。20%~30%的乳腺癌患者中Her-2/neu原癌基因存在高表达。有研究表明,过度表达COX-2的乳腺上皮细胞发生癌变概率明显提高。随着乳腺癌同COX-2的关系日益受到重视,COX-2抑制剂联合辅助治疗乳腺癌已经成为当前研究的热点。Nucleostemin(NS)基因是2002年发现的一种新的p53结合蛋白,在干细胞和肿瘤细胞中都有高表达,而在终末分化细胞中不表达,是一个参与细胞增殖过程的重要蛋白。关于NS基因在维持肿瘤细胞增殖方面的具体机制一直不甚清楚,国内外学者仍在研究当中。本研究选取塞来昔布作为选择性COX-2抑制剂的代表药物,体外培养人乳腺癌SKBr3细胞株(高表达Her-2/neu),应用MTT(四甲基偶氮唑盐)、细胞形态学观察、免疫印迹、Caspase3酶活性测定、流式细胞术等方法,观察塞来昔布对SKBr3细胞增殖与凋亡的影响,并检测NS基因在肿瘤细胞中的定位与表达变化情况。结果表明:MTT代谢率测定结果显示塞来昔布能显著抑制SKBr3细胞的增殖,并且呈浓度依赖性,即随着塞来昔布作用浓度的增加而抑制作用增强。与对照组相比,细胞形态学观察到塞来昔布加药组SKBr3细胞出现典型的凋亡细胞特征。免疫荧光与免疫印迹结果显示NS蛋白的表达水平随着塞来昔布浓度的增加而逐渐增加,免疫印迹结果还显示P53蛋白的表达水平随着塞来昔布浓度的增加也逐渐增加,而COX-2蛋白和CyclinD1蛋白则相反。流式细胞仪检测结果显示塞来昔布使SKBr3细胞周期阻滞在G0/G1期,这些结果充分说明了塞来昔布以浓度依赖的方式抑制SKBr3细胞增殖并诱导其凋亡,其机制可能与NS表达上调有关。

全文目录


中文摘要  5-7
英文摘要  7-9
前言  9-11
材料与方法  11-16
结果  16-26
讨论  26-32
参考文献  32-34
综述  34-51
  参考文献  46-51
致谢  51

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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 泌尿生殖器肿瘤 > 乳腺肿瘤
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