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Ras蛋白表达、基因突变在皮肤病理性瘢痕和瘢痕癌中的意义

作　者: 胡成久
导　师: 郭瑞珍
学　校: 遵义医学院
专　业: 病理学与病理生理学
关键词: Ras基因皮肤瘢痕瘢痕癌癌变免疫组织化学 PCR
分类号: R739.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

目的：探讨Ras基因家族(H-ras/N-ras/K-ras)蛋白表达、基因突变在皮肤病理性瘢痕和瘢痕癌中的意义。方法：以16例皮肤病理性瘢痕、20例皮肤瘢痕癌组织为研究对象,以10例正常皮肤组织为对照。采用免疫组织化学(SP)法分别检测H-ras、N-ras、K-ras蛋白的表达,结合图像分析,分别观测三组被检组织中所检各项指标的表达(平均光密度和阳性面积)。另外对所选病例的石蜡包埋组织(包括14例瘢痕,14例瘢痕癌)提取DNA,进一步做PCR扩增及测序,分析H-ras、N-ras、K-ras基因的第12、13位密码子点突变情况。所有数据运用SPSS16.0软件包进行统计学分析。结果：(1) H-ras、N-ras、K-ras蛋白在正常皮肤表皮和皮肤病理性瘢痕上皮中呈阴性或弱阳性表达,正常皮肤组与瘢痕组比较,差异均无统计学意义(P>0.05),但瘢痕上皮中阳性表达细胞数量较正常皮肤表皮增多。(2) H-ras、N-ras、K-ras蛋白在瘢痕癌组织中呈强阳性表达,瘢痕癌组的表达(平均光密度和阳性面积)与正常皮肤组及皮肤瘢痕组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。(3)在瘢痕癌中,不管是组织学类型还是细胞的分化,均显示分化越高Ras蛋白表达越强,分化越低Ras蛋白表达越弱,高分化组与低分化组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。(4)K-ras阳性信号在正常皮肤组主要定位于细胞核,在瘢痕组主要定位于细胞核和细胞质,在瘢痕癌组为细胞质的表达,出现自胞核向胞质逐渐移位的现象。(5)Ras基因家族点突变分析：从石蜡包埋组织(28例样本)中提取DNA,并经PCR反应后,均成功扩增出目的片段。经测序后,未发现H-ras、N-ras、K-ras基因第12、13位密码子的点突变。结论：(1)在皮肤病理性瘢痕上皮中H-ras、N-ras、K-ras蛋白限制性的低表达,可能与皮肤瘢痕上皮增生具有一定的相关性。(2)瘢痕癌与正常皮肤和皮肤病理性瘢痕相比较,H-ras、N-ras、K-ras蛋白的高表达,可能与皮肤瘢痕癌的发生有关。(3)H-ras、N-ras、K-ras蛋白与肿瘤细胞的分化有相关性,可能在瘢痕癌演进过程中逐渐丢失。(4)K-ras蛋白的移位现象,可能与瘢痕癌的发生有相关性。(5)瘢痕癌中尚未发现Ras基因家族12、13位密码子的突变,其突变位点有待进一步探讨。

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英文缩略词 4-6中文摘要 6-7Abstract 7-9前言 9-10材料 10-13方法 13-20结果 20-30讨论 30-34结论 34-35参考文献 35-39附图 39-43Ras基因及其信号转导通路与皮肤肿瘤(综述) 43-51 参考文献 48-51致谢 51-52作者简介 52

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