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哮喘小鼠胸腺基质淋巴细胞生成素及其受体的表达以及布地奈德、卡介苗干预的影响

作　者: 王淑丽
导　师: 张建华
学　校: 苏州大学
专　业: 儿科学
关键词: 哮喘 胸腺基质淋巴细胞生成素 胸腺基质淋巴细胞生成素受体 布地奈德 减毒活菌卡介苗 小鼠
分类号: R725.6
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
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内容摘要


目的:观察哮喘小鼠胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)及其受体(TSLPR)的表达以及布地奈德混悬液(BUD)、卡介苗(BCG)干预对其表达的影响,探讨TSLP、TSLPR与哮喘的关系,为哮喘的防治提供新的思路。方法:1.40只雌性昆明小鼠随机分成4组:哮喘组、BUD干预组、BCG干预组、正常对照组,每组10只。2.哮喘组:昆明小鼠于第1、7、14天分别腹腔内注射0.01%OVA和10%氢氧化铝混悬液0.2ml进行致敏,第21天起,雾化吸入2%OVA生理盐水溶液5ml进行激发,每天1次,每次30分钟,连续7天。3.BUD干预组:致敏和激发方法同哮喘组,在雾化吸入OVA前1h予以BUD生理盐水溶液5ml(含BUDlmg)雾化吸入20～30min。4.BCG干预组:致敏和激发方法同哮喘组,于OVA致敏前5d、3d、1d分别以BCG0.025mg皮内注射干预。5.正常对照组:昆明小鼠以生理盐水代替OVA致敏、激发。6.末次激发24h后收集肺泡灌洗液(BALF)、外周血、肺组织及脾组织。肺组织切片行HE染色观察病理改变,并用免疫组织化学方法判断肺组织TSLP、TSLPR的表达。酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定BALF中IL-4、肺组织和脾组织中TSLP和TSLPR以及血清TSLP的表达。实时荧光定量PCR法检测肺组织中TSLP mRNA和TSLPR mRNA的表达。结果:1.哮喘组、BUD干预组、BCG干预组及正常对照组小鼠肺组织TSLP阳性细胞的平均光密度分别为(0.277±0.009)、(0.064±0.015)、(0.160±0.009)、(0.004±0.001)。四组间存在显著差异(P＜0.01)。哮喘组明显高于正常对照组(P＜0.01);BUD干预组和BCG干预组明显低于哮喘组(P＜0.01):BUD干预组和BCG干预组明显高于正常组(P＜0.01);BUD干预组明显低于BCG干预组(P＜0.01)。2.哮喘组、BUD干预组、BCG干预组及正常对照组小鼠肺组织TSLPR阳性细胞的的平均光密度分别为(0.413±0.030)、(0.040±0.004)、(0.168±0.008)、(0.006±0.001)。结果与肺组织TSLP阳性细胞的平均光密度比较结果相似。3.哮喘组、BUD干预组、BCG干预组及正常对照组小鼠BALF中IL-4的表达水平分别为(244.200±4.601)pg/ml、(220.600±3.034)pg/ml、(224.900±2.930)pg/ml、(219.200±2.480)pg/ml。四组间存在显著差异(P＜0.01)。哮喘组明显高于正常对照组(P＜0.01);BUD干预组和BCG干预组明显低于哮喘组(P＜0.01);BUD干预组和BCG干预组虽高于正常对照组,但差别无统计学意义(P＞0.05);BUD干预组与BCG干预组比较,差别无统计学意义(P＞0.05)。4.哮喘组、BUD干预组、BCG干预组及正常对照组小鼠肺组织TSLP的表达水平分别为(4.221±0.115)ng/ml、(3.899±0.071)ng/ml、(3.8980±0.046)ng/ml、(3.621±0.129)ng/ml。结果与BALF中IL-4比较结果相似。5.哮喘组、BUD干预组、BCG干预组及正常对照组小鼠肺组织TSLPR的表达水平分别为(17.160±0.157)ng/ml、(16.460±0.209)ng/ml、(15.740±0.273)ng/ml、(15.860±0.285)ng/ml。结果与BALF中IL-4比较结果相似。6.哮喘组、BUD干预组、BCG干预组及正常对照组小鼠脾组织TSLP的表达水平分别为(5.467±0.074)ng/ml、(5.096±0.077)ng/ml、(5.101±0.161)g/ml、(4.975±0.073)ng/ml。结果与BALF中IL-4比较结果相似。7.哮喘组、BUD干预组、BCG干预组及正常对照组小鼠脾组织TSLPR的表达水平分别为(20.901±0.421)ng/ml、(18.280±0.159)ng/ml、(18.840±0.273)ng/ml、(17.930±0.156)ng/ml。四组间存在显著差异(P＜0.01)。BCG干预组明显高于正常对照组(P＜0.05)。其余结果与BALF中IL-4比较结果相似。8.哮喘组、BUD干预组、BCG干预组及正常对照组小鼠血清TSLP的表达水平分别为(1.611±0.204)ng/ml、(0.484±0.061)ng/ml、(0.166±0.045)ng/ml、(0.336±0.076)ng/ml。四组间存在显著差异(P＜0.01)。哮喘组明显高于正常对照组(P＜0.01);BUD干预组和BCG干预组明显低于哮喘组(P＜0.01);BUD干预组和BCG干预组与正常对照组比较,差别无统计学意义(P＞0.05);BUD干预组明显高于BCG干预组(P＜0.01)。9.哮喘组、BUD干预组、BCG干预组及正常对照组小鼠肺组织TSLP mRNA的相对表达水平分别为(8.510±1.657)%、(1.756±0.518)%、(3.950±1.031)%、(0.999±0.204)%。结果与BALF中IL-4比较结果相似。10.哮喘组、BUD干预组、BCG干预组及正常对照组小鼠肺组织TSLPR mRNA的相对表达水平分别为(8.601±1.847)%、(0.972±0.295)%、(3.236±0.538)%、(1.848±0.394)%。四组间存在显著差异(P＜0.01)。BUD干预组明显低于BCG干预组(P＜0.01)。其余结果与BALF中IL-4比较结果相似。结论:1.哮喘小鼠血清TSLP、肺组织和脾组织TSLP、TSLPR及肺组织TSLP mRNA、TSLPR mRNA的表达均增高。TSLP、TSLPR在哮喘的发病机制中起重要作用。2.BUD、BCG可明显抑制哮喘小鼠TSLP和TSLPR的表达,为BUD、BCG防治哮喘提供了新的理论依据。3.TSLP、TSLPR在哮喘的发生发展中起重要作用,可能成为治疗哮喘的潜在靶点。

全文目录


中文摘要  3-6
Abstract  6-11
前言  11-14
材料与方法  14-25
  一、实验材料  14-15
  二、实验方法  15-25
结果  25-38
  一、各组小鼠一般情况及症状观察  25
  二、各组小鼠肺组织病理变化  25-26
  三、各组小鼠BALF中IL-4的表达  26-27
  四、各组小鼠肺组织免疫组织化学染色TSLP、TSLPR阳性细胞的表达  27-30
  五、各组小鼠肺组织TSLP、TSLPR的表达  30-32
  六、各组小鼠脾组织TSLP、TSLPR的表达  32-33
  七、各组小鼠血清TSLP、TSLPR的表达  33-34
  八、各组小鼠肺组织TSLP、TSLPR mRNA的表达  34-38
讨论  38-45
参考文献  45-49
结论  49-50
综述  50-56
缩略词表  56-57
攻读学位期间公开发表的论文  57-58
致谢  58

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中图分类: > 医药、卫生 > 儿科学 > 小儿内科学 > 小儿呼吸系及胸部疾病
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