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胸腺基质淋巴细胞生成素在A549细胞中的表达及药物对其的影响
作 者: 陈真
导 师: 殷凯生
学 校: 南京医科大学
专 业: 呼吸内科
关键词: 胸腺基质淋巴细胞生成素 A549 核因子-κB 布地奈德 黄芪甲苷 NF-κB
分类号: R96
类 型: 硕士论文
年 份: 2009年
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内容摘要
第一部分胸腺基质淋巴细胞生成素在A549细胞中的表达目的观察气道上皮细胞A549细胞中胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)的表达及与核因子-κB(NF-κB)的关系。方法A549细胞与细胞因子白介素1β(IL-1β)、IL-4或NF-κB抑制剂PDTC共同孵育,采用RT-PCR、细胞免疫荧光方法测定TSLP mRNA及蛋白的表达情况。结果A549细胞胞浆里表达TSLP蛋白,用IL-1β联合IL-4刺激4 h ,TSLP mRNA的表达量相对于β-actin为0.93,达到峰值。随着时间的推移,18 h时,TSLP mRNA的表达量相对于β-actin为0.31,基本降至0 h时水平。PDTC可明显降低TSLP mRNA的峰值水平。结论正常气道上皮细胞A549表达TSLP mRNA及蛋白,细胞因子促进气道上皮细胞诱导性表达TSLP,并受NF-κB信号通路调控。第二部分药物对A549细胞胸腺基质淋巴细胞生成素表达的影响目的探讨布迪奈德和黄芪甲苷对A549细胞TSLP表达和NF-κB的影响。方法A549细胞与细胞因子IL-1β、IL-4或药物(布迪奈德、黄芪甲苷)共同孵育,以不加任何细胞因子或药物培养的A549细胞为对照组,采用RT-PCR方法测定TSLP mRNA表达,细胞免疫荧光方法观察NF-κB(p65)的表达情况,westernblot方法检测胞浆IκBα的表达。结果布地奈德能够显著抑制TSLP mRNA表达,黄芪甲苷抑制作用不明显(P>0.05);黄芪甲苷及布地奈德均能够显著抑制A549细胞NF-κB ( p65)的核转位;黄芪甲苷可明显升高A549细胞胞浆IκBα的蛋白水平。结论抑制TSLP表达和NF-κB信号通路激活可能是布地奈德治疗哮喘的重要机制;黄芪甲苷能够明显抑制NF-κB信号通路,但对TSLP的基因表达没有抑制作用。
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全文目录
主要英文缩略语词表 4-5 中文摘要 5-7 Abstract 7-9 引言 9-12 第一部分 胸腺基质淋巴细胞生成素在A549 细胞中的表达 12-21 材料和方法 12-16 结果 16-18 讨论 18-21 第二部分 药物对气道上皮细胞A549 细胞胸腺基质淋巴细胞生成素表达的影响.. 21-36 材料和方法 21-28 结果 28-34 讨论 34-36 小结 36-37 参考文献 37-41 附录 41-42 发表的文章 42-64 致谢 64
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中图分类: > 医药、卫生 > 药学 > 药理学
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