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实时荧光定量PCR检测大肠癌患者中caveolin-1mRNA和cyclinD1mRNA表达及意义

作　者: 黄红
导　师: 李晓燕；陈娅蓉；缪应雷
学　校: 昆明医学院
专　业: 内科学
关键词: 小窝蛋自-1(caveolin-1) 细胞周期蛋白D1(cyclinD1) 实时荧光定量PCR (real-time fluorescent quantitative PCR FQ-PCR) 大肠肿瘤
分类号: R735.34
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
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内容摘要

目的:近年来大量研究表明肿瘤的发生、发展与细胞周期调控失调有关,CyclinD1是细胞周期调控系统中最为重要的一种基因,它的紊乱对于肿瘤的形成起到关键性的作用。Caveolin-1广泛地存在于多种细胞表面。参与调节细胞周期与信号传导。本文通过实时荧光定量PCR的方法检测大肠癌患者中caveolin-1mRNA和cyclinD1mRNA的表达量,分析与大肠癌患者临床病理参数之间的关系。进一步论证caveolin-1在大肠肿瘤中的作用及两者在大肠肿瘤中的相关性,旨在探讨caveolin-1和cyclinD1能否成为大肠肿瘤重要的生物学标志物,从而提高临床诊断率,为大肠肿瘤的早期诊断、早期治疗、预后判断及将来大肠癌基因治疗的靶点提供一定的依据。方法:采用实时荧光定量PCR（FQ-PCR）方法检测随机抽取的经病理证实为大肠肿瘤的癌灶组织30例和12例切端正常组织（距肿瘤边缘10cm以外均经术后病理证实为正常组织）中caveolin-1和cyclinD1mRNA的表达量,并且以内参基因β-actin为基准,采用2^-ΔΔct的方法进行分析,2^-ΔΔct表示目的基因在癌组织中的表达量相对正常组织中表达量的倍数。利用SPSS13.0统计软件分析caveolin-1和cyclinD1mRNA在大肠肿瘤组织与正常黏膜组织中的差异表达,并与临床病理参数的相关性进行处理分析。结果:30例大肠癌患者癌组织中caveolin-1mRNA相对表达量为0.66±0.25,在癌组织中的表达量仅为正常组织的0.66倍,表达下调。cyclinD1mRNA在癌组织中的表达量是正常组织的5.94倍,表达上调。大肠癌患者中caveolin-1和cyclinD1基因表达与肿瘤的分化程度有关（t=2.281;-2.164,p＜0.05）,与有无淋巴转移有关（t=-2.272;2.219,p＜0.05）。Caveolin-1的表达在Dukes分期中差异无意义（F=1.896,p＞0.05）,而cyclinD1在Dukes分期中差异有意义（F=4.171,p＜0.05）。Caveolin-1和cyclinD1基因表达与患者性别、年龄、肿瘤生长的部位无关（p＞0.05）。本研究表明caveolin-1在大肠恶性肿瘤中扮演着抑癌基因的角色,并且caveolin-1和cyclinD1在大肠肿瘤中表达呈负相关,共同作用促进肿瘤的发生、发展。结论:1、通过实验证实大肠癌患者中caveolin-1呈低表达,cyclinD1呈高表达,两者呈负相关性。2、大肠癌患者中caveolin-1和cyclinD1基因表达与肿瘤的恶性程度、转移有关。3、探讨大肠肿瘤中两种基因的异常可同时存在并呈负反馈调节参与肿瘤的发生、发展。4、Caveolin-1和cyclinD1可成为大肠癌的肿瘤标志物,提高大肠肿瘤的早期诊断率,并为将来大肠癌的基因治疗靶点提供一定的理论依据。

全文目录

中文摘要  5-7
英文摘要  7-9
正文  9-36
  引言  9-11
  材料和方法  11-15
  实验方法及步骤  15-22
  结果  22-31
  讨论  31-35
  结论  35-36
参考文献  36-39
综述  39-49
  综述参考文献  45-49
在读期间发表文章  49-50
致谢  50

实时荧光定量PCR检测大肠癌患者中caveolin-1mRNA和cyclinD1mRNA表达及意义

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