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恶性疟原虫红细胞表面膜蛋白1 DBLα区的功能分析

作　者: 张岩
导　师: 尹继刚
学　校: 吉林大学
专　业: 预防兽医学
关键词: 恶性疟原虫恶性疟原虫表面膜蛋白基序受体亲和力
分类号: R382
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
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内容摘要

本研究根据大肠杆菌密码子组成特点重新合成在GenBank注册的EF158099的1～1179bp序列,即PfEMP1(IT4-var60)DBLα区。另外,利用PCR的方法,成功扩增到优化后的PfEMP1(FCR3S1.2-var1)DBLα区序列,并将优化后的PfEMP1(FCR3S1.2-var1)DBLα区序列分为三段。将两个DBLα区全长基因和PfEMP1(FCR3S1.2-var1)DBLα区的三个基因片段分别在原核系统中表达、纯化,最终获得五个可溶性的重组蛋白。通过重组蛋白与肝素的亲和试验及GAG抑制试验,分析功能区与肝素/硫化肝素的亲和力,结果表明PfEMP1(IT4-var60)DBLα区对肝素/硫化肝素的亲和力比PfEMP1( FCR3S1.2-var1)D BLα区强,在PfEMP1( FCR3S1.2-var1)D BLα分段表达的三个功能区中,第285～415位氨基酸序列对肝素/硫化肝素的亲和力最强。根据PfEMP1与肝素/硫化肝素结合的分子基础是在其DBLα区含有类似于XBBXXBX或XBBBXXBX结构(B代表碱性氨基酸,如赖氨酸、精氨酸、组氨酸,X代表任意氨基酸),可推测出PfEMP1(FCR3S1.2-var1)DBLα序列中的C R K K K K K L E N L E K Q,S R K G K V R M,D K Q K K Y三个基序可能是被恶性疟原虫寄生的红细胞与红细胞表面的硫化肝素受体结合的关键氨基酸序列。另外,重组的DBLα蛋白与ABO血型抗原亲和试验的结果表明,重组的PfEMP1-DBLα蛋白对血型抗原A、B有特异性的亲和力。该试验结果将为揭示恶性疟原虫的主要致病分子与人体细胞相互作用机制提供很重要的实验依据。

全文目录

内容提要  4-5
英文缩写词  5-8
前言  8-10
第一篇文献综述  10-22
  恶性疟原虫致病机制的研究进展  10-22
    1.1 碳水化合物是恶性疟原虫识别的重要受体  10-13
    1.2 恶性疟原虫致病因子 PfEMP1 的生物学功能  13-15
    1.3 肝素/硫化肝素结合特性与恶性疟原虫致病相关性  15-17
    1.4 ABO 血型抗原与恶性疟原虫致病相关性  17-19
    1.5 恶性疟原虫表型与致病的相关性  19-20
    1.6 展望  20-22
第二篇研究内容  22-66
  第1章恶性疟原虫红细胞表面膜蛋白 1 DBLα 区基因的表达及纯化  22-52
    1.1 材料  22-25
    1.2 方法  25-34
    1.3 结果  34-49
    1.4 讨论  49-51
    1.5 小结  51-52
  第2章恶性疟原虫红细胞表面膜蛋白 1 DBLα 区的功能分析  52-66
    2.1 材料  52-53
    2.2 方法  53-55
    2.3 结果  55-63
    2.4 讨论  63-65
    2.5 小结  65-66
结论  66-67
参考文献  67-74
致谢  74-75
中文摘要  75-77
Abstract  77-79
导师简介  79-80
作者简介  80

恶性疟原虫红细胞表面膜蛋白1 DBLα区的功能分析

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