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MACC1对前列腺癌体外侵袭转移能力的影响

作　者: 吕煊
导　师: 王世宣
学　校: 华中科技大学
专　业: 妇产科学
关键词: MACC1 前列腺癌侵袭转移预后卵巢肿瘤 Bub1 免疫组织化学
分类号: R737.25
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

【目的】本实验在高表达MACC1的前列腺癌高转移细胞株1E8中进行SiRNA反面干预,并与前列腺癌低转移细胞株2B4进行对比,在体外细胞水平上研究MACC1对前列腺癌侵袭转移能力的影响。【方法】采用小分子干扰RNA (siRNA)沉默MACC1在前列腺癌高转移潜能细胞株1E8中的表达,沉默效应通过Western Blot,RT-PCR分别验证转染前后蛋白和RNA水平的变化;同时验证MACC1在正常前列腺、前列腺增生、前列腺慢性炎症以及前列腺癌及转移灶组织中的表达差异;通过划痕实验,Transwell检测其对侵袭转移的影响;CCK8观察细胞增殖能力的改变;共聚焦显微镜成像观察细胞骨架的改变。【结果】分别用Western Blot、RT-PCR验证MACC1在前列腺癌高低转移配对细胞株PC-3M-1E8和PC-3M-1E8中的表达情况为:1E8细胞中MACC1的表达强于2B4;通过在前列腺正常组织、前列腺增生组织、前列腺慢性炎症组织和前列腺癌的组织芯片中的免疫组化发现:MACC1在癌组织中表达与正常组织相比,有统计学差异,并且与分期、转移因素相关( P<0.05 ),而与年龄、Gleason评分无关( P>0.05 );划痕试验、Transwell观察到反义干预MACC1后能明显减弱细胞的侵袭转移运动能力;CCK-8增殖试验发现干扰MACC1后,细胞增殖能力减弱;Confocal发现干扰MACC1后,能使骨架染色减弱,微丝微管解聚,极性消失。【结论】在前列腺癌高低转移配对细胞株1E8/2B4中,1E8中MACC1的蛋白表达强于2B4;组织芯片提示在不同前列腺组织中,MACC1的表达在前列腺癌和前列腺正常组织中的表达具有统计学差异,且MACC1的表达阳性率和前列腺癌患者的分期、转移相关,而与年龄、Gleason评分无关;用RNA反义干扰1E8后通过划痕、Transwell、骨架染色、增殖等实验验证了MACC1在侵袭转移中的促进作用。结果显示:反义干预高表达MACC1的1E8细胞后,其侵袭能力得到一定程度逆转。这为前列腺癌的转移预测、治疗方案的个体化、甚至为肿瘤的侵袭逆转提供了一个新策略。【目的】探讨各种卵巢组织中Bub1的表达及其与临床分期、病理分级、淋巴结转移等的关系。【方法】采用免疫组织化学方法检测Bub1在52例卵巢癌、19例卵巢良性病变组织及17例正常卵巢组织中的表达情况,并结合临床及病理参数分析其表达的意义。【结果】卵巢癌组织中Bub1的阳性表达率为94.2%,交界性卵巢癌组织中为76.9%,卵巢良性病变组织中为5.3%,正常卵巢组织中为23.5%,三者间差异有显著性(P均<0.05),Bub1表达与临床分期、肿瘤分化程度、淋巴结转移有关(P均<0.05);与年龄、残留病灶大小无关。【结论】Bub1蛋白表达与卵巢癌的发生发展可能存在一定的相关性。(P <0.05)

全文目录

第一部分 MACC1在前列腺中侵袭转移能力的影响一研究背景  5-40
  一研究背景  5-6
  二中文摘要  6-7
  三英文摘要  7-9
  四前言  9-12
  五材料与方法  12-26
  六实验结果  26-35
  七讨论  35-38
  八参考文献  38-40
第二部分 Bub1 在卵巢上皮性肿瘤中的表达及临床意义一中文摘要  40-49
  一中文摘要  40
  二英文摘要  40-41
  三前言  41
  四材料与方法  41-43
  五实验结果  43-46
  六讨论  46-47
  七参考文献  47-49
第三部分综述：MACC1—一个新基因的由来及发展现状  49-65
  参考文献  60-65
致谢  65-66

MACC1对前列腺癌体外侵袭转移能力的影响

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