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槲皮素对人大肠癌SW480细胞侵袭及转移作用的体外实验研究

作　者: 林增海
导　师: 马涛
学　校: 汕头大学
专　业: 外科学
关键词: 槲皮素结肠癌 SW480细胞侵袭转移
分类号: R285
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

目的:探讨槲皮素对体外培养的人结肠癌 SW480细胞侵袭及转移能力的影响。方法:观察不同浓度(5、10、20、40、80、160μmol/L)的槲皮素及阳性对照组5-Fu(50mg/L)在24、48及72小时对人结肠癌SW480细胞增殖的影响,分别在光学显微镜和电子显微镜下检测槲皮素对人结肠癌SW480细胞生长的影响;运用细胞计数试剂盒检测法(CCK-8)测定不同浓度槲皮素对人结肠癌SW480细胞生长的影响;使用流式细胞仪检测细胞周期及凋亡的情况;利用粘附实验检测各组细胞的粘附率;利用Transwell小室实验检测各组细胞侵袭运动的能力;通过明胶酶谱分析法检测各组细胞基质金属蛋白酶的分泌水平。结果:光学显微镜和电子显微镜下观察到经槲皮素处理的人结肠癌SW480细胞较阴性对照组细胞数量减少,部分细胞的体积缩小,细胞膜完整,胞浆浓缩,核染色质固缩,细胞核碎裂,形成凋亡小体;CCK-8法检测显示槲皮素对人结肠癌SW480细胞的增殖有抑制作用,且其抑制作用随着处理药物浓度的增加和作用时间的延长而增强;流式细胞仪分析结果显示,随着槲皮素处理浓度的增加,SW480细胞的凋亡率逐渐增高,不同浓度槲皮素作用72h的结果显示该药物能呈浓度依赖性地诱导SW480细胞凋亡,且主要将细胞阻滞在G2/M期;粘附实验证明槲皮素能明显抑制结肠癌SW480细胞的粘附能力,且随着药物浓度的增加,粘附率逐渐下降;Transwell实验证明槲皮素能明显抑制结肠癌SW480细胞侵袭及转移能力,且随浓度增加,抑制作用增大;明胶酶谱分析实验发现,槲皮素有抑制基质金属蛋白酶MMP-2、MMP-9分泌的作用,且随着药物浓度的增加,分泌的基质金属蛋白酶逐渐减少。结论:在体外研究中,槲皮素能够有效抑制人结肠癌SW480细胞的生长增殖、粘附、侵袭和转移的能力,并呈时间和剂量依赖性;同时能够诱导结肠癌SW480细胞凋亡的发生,并阻滞细胞周期的进展。并且从分子水平上证明,槲皮素抑制SW480侵袭转移能力可能与其抑制基质金属蛋白酶MMP-2、MMP-9分泌有关。所以槲皮素是一种潜在的抗结肠恶性肿瘤侵袭和转移的药物。

全文目录

中文摘要  3-4
英文摘要  4-5
符号表（缩略语）  5-8
第1章前言  8-17
  1.1 大肠癌  8-10
  1.2 肿瘤的侵袭和转移  10-11
  1.3 细胞凋亡  11-12
  1.4 抗肿瘤药物的开发  12-13
  1.5 槲皮素  13-15
  1.6 研究目的和内容  15-17
第2章实验研究  17-31
  2.1 实验技术路线  17-18
  2.2 实验材料  18-20
    2.2.1 细胞株  18
    2.2.2 实验试剂  18-19
    2.2.3 一般性耗材  19
    2.2.4 主要仪器设备  19-20
  2.3 实验方法  20-31
    2.3.1 主要试剂配制  20-23
    2.3.2 细胞培养  23-24
    2.3.3 CCK-8增殖实验  24-25
    2.3.4 形态学观察  25-26
    2.3.5 细胞凋亡检测  26-27
    2.3.6 粘附实验  27-28
    2.3.7 TRANSWELL小室侵袭实验  28-29
    2.3.8 明胶酶谱分析实验  29-30
    2.3.9 统计分析  30-31
第3章实验结果  31-39
  3.1 CCK-8法检测SW480 细胞增殖抑制率  31-32
  3.2 槲皮素对人结肠癌SW480 细胞形态结构的影响  32-33
    3.2.1 光镜下观察  32
    3.2.2 电镜下观察  32-33
  3.3 槲皮素对人结肠癌细胞SW480凋亡及细胞周期的影响  33-35
  3.4 槲皮素对SW480 细胞粘附能力的影响  35-36
  3.5 槲皮素对SW480 细胞侵袭运动能力的影响  36-38
  3.6 槲皮素对SW480 细胞分泌金属蛋白酶的影响  38-39
第4章讨论  39-43
第5章结论  43-44
参考文献  44-47
文献综述  47-55
  参考文献  52-55
致谢  55-56
论文发表  56-57
本人简历  57

槲皮素对人大肠癌SW480细胞侵袭及转移作用的体外实验研究

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