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YB-1 RNAi对肺腺癌细胞A549中MACC1基因表达影响的研究

作 者: 尧然
导 师: 顾春东
学 校: 大连医科大学
专 业: 胸外科学
关键词: 肺腺癌 YB-1 MACC1 转染
分类号: R734.2
类 型: 硕士论文
年 份: 2011年
下 载: 7次
引 用: 0次
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内容摘要


目的:近年来,肺腺癌的发病率明显上升,已占非小细胞肺癌(NSCLC)的40%以上,以肿瘤早期即易发生远处转移为特点,临床处理上极为棘手。结肠癌转移相关基因1(Metastasis-Associated in Colon Cancer 1,MACC1)是最近发现的一种新基因,与肿瘤增殖及早期转移的密切相关,并成为近年肿瘤转移研究领域最具影响力的发现之一。人类YB-1蛋白(Y box-binding protein-1,YB-1)是一类特异性结合目的基因启动子和增强子内部Y-box序列的重要的核转录因子,在MACC1基因序列中,其启动子含有数个Y-box序列。因此,对人类YB-1蛋白及其相关功能的研究,可能会部分揭示MACC1表达的调控机制。本实验在前期研究的基础上,在肺腺癌A549细胞株中,利用脂质体转染及RNA干扰技术,抑制YB-1蛋白的表达,检测转染前后MACC1基因的表达变化,从而初步证实YB-1蛋白是否对MACC1基因的表达具有调控作用。方法:利用脂质体Lipofectamine2000将Santa Cruz公司设计合成的YB-1 siRNA片段转入肺腺癌A549细胞株中,并以Control siRNA转染组、空白转染组及正常培养组为对照。通过RT-PCR与Western Blot法分别检测各组转染前后YB-1与MACC1在基因及蛋白水平表达的变化。采用SPSS17.0统计学软件对以上实验数据进行分析,实验组与对照组实验皆重复3次,量化资料用均数标准差((x|-)±S)表示,各实验组间利用单因素方差分析检验其差异是否具有显著性(P<0.05)。结果:1.RT-PCR检测结果显示,肺腺癌A549细胞中YB-1蛋白mRNA的表达量经YB-1 siRNA干扰后出现明显下降,MACC1的mRNA表达量亦出现下降(P<0.05)。2. Western Blot检测结果显示,肺腺癌A549细胞中YB-1蛋白的表达量经YB-1 siRNA干扰后出现明显下降,MACC1蛋白的表达量亦出现下降(P<0.05)。结论:通过RT-PCR与Western Blot检测方法分别在基因及蛋白水平初步证实在肺腺癌A549细胞中YB-1蛋白对MACC1基因的表达具有调控作用。

全文目录


摘要  6-7Abstract  7-9前言  9-10材料和方法  10-16结果  16-17讨论  17-19结论  19-20参考文献  20-22综述  22-32  参考文献  28-32附录  32-33致谢  33

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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 呼吸系肿瘤 > 肺肿瘤
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