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钩藤提取物对实验性高血压小鼠降压作用的实验研究

作　者: 顾施健
导　师: 余尚工
学　校: 湖北中医药大学
专　业: 中药学
关键词: 钩藤降血压内分泌型小鼠高效液相色谱法
分类号: R285.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

目的：研究钩藤及其提取物对正常动物及高血压模型动物血压的影响,以药理实验结合高效液相色谱法筛选钩藤降血压有效部位。通过观察钩藤各提取物对实验性内分泌型高血压动物的降压作用,并选用不同层次的多项实验指标探讨其降压机理。为临床防治高血压病及寻找钩藤降血压新化合物及开发降压新药提供理论依据。方法：Ⅰ以Wistar大鼠及KM小鼠为研究对象,通过皮下注射丙酸睾酮复制并比较高血压动物模型。丙酸睾酮剂量为：大鼠剂量为5mg／kg,小鼠剂量为0.22mg／kg,连续14天。观察动物的一般行为学和体重变化,测量各组动物的血压和心率,并测定血清TC、TG指标。Ⅱ将钩藤药材用不同浓度的甲醇提取后,进一步分离得到钩藤乙酸乙酯部位、正丁醇部位和水部位。对乙酸乙酯部位进行分离,共得20个流份。对Fr 3、Fr 7流分进一步分离纯化得6个结晶。使用HPLC法对钩藤及其提取物进行成分分析。Ⅲ将高血压实验动物随机分为10组,阳性对照组给予2.16mg·kg-1·d-1的卡托普利混悬液,钩藤各实验组的给药剂量均为90g(生药)/kg。模型对照组灌胃给予同量双蒸水,连续12天。分别测定各组给药前及给药后30,60,120,240,480 min以及24h的收缩压和心率。在实验过程中同时观察各组一般行为学情况,同时在实验开始前、第3天、第6天后、第9天和第12天后测量各组体重值、血压和心率值。Ⅳ实验后尾静脉取血测定血清TC、TG、HDL-C、ALT、AST、SOD、MDA、CRE、BUN的水平,并测定脏器系数。Ⅴ将正常小鼠分别给与钩藤各提取物,禁食18h后,空白组小鼠灌胃2g/Kg的葡萄糖溶液,钩藤给提取物分别按90g/Kg生药剂量及2g/Kg的葡萄糖。在灌胃前(0min)及灌胃30、60、120min后进行尾静脉取血,测定血糖值。结果：Ⅰ丙酸睾酮能引起实验动物一般行为学异常,体重增加缓慢。造模2周后,小鼠模型组血压升高达(30.2±7.88mmHg),其心率亦有升高。同时模型组血清TC和TG较空白组明显升高(P<0.01)。Ⅱ钩藤45、90mg剂量组均可以显著降低正常小鼠血压(P<0.05),其中以90 mg组收缩压下降最为明显。钩藤90 mg剂量组在给药120min后可以明显减缓小鼠心率(P<0.05)。钩藤总提物组、钩藤乙酸乙酯部位组经12天治疗后,小鼠的精神状态好转,打斗较少,毛发逐渐恢复光泽。对小鼠体重进行称量,各给药组与高血压模型组比较无显著差异(P>0.05)。钩藤总提物,乙酸乙酯部位于给药后1-12天内,对内分泌性高血压小鼠均有明显降低SBP和减慢HR的作用,其降压作用随给药次数的增加而增强。Ⅲ长期给药后,钩藤提取物能持续降低血压,改善因造模引起的一般行为学及体重的异常。对血清指标水平亦有明显改善。由实验结果可知,钩藤总提物及乙酸乙酯部位提能降低血清丙二醛(MDA)水平,同时能升超氧化岐化酶(SOD)活性。结论：Ⅰ通过皮下注射丙酸睾酮复制高血压小鼠模型,经济实用简便,模型重复性、稳定性较好,该模型进行降压实验是可行的。Ⅱ钩藤及其提取物无论对正常小鼠还是高血压小鼠均具有明显的降压作用,其特点是先降压,后升压,之后在持续降压,降压作用温和而持久,并在一定范围内呈现的药物量-效关系。同时对心率亦有一定的减慢作用,Ⅲ长期给药后,钩藤总提物组、乙酸乙酯部位能持续降低血压,并能改善因造模引起的一般行为学及体重的异常。Ⅳ钩藤提取物能明显降低由内分泌造模引起的血清TC,TG升高和升高HDL-c水平,并能一定程度上减少自由基产生,抑制过氧化损伤。

全文目录

中文摘要  4-6
英文摘要  6-9
缩略词表  9-10
前言  10-11
第一部分实验材料  11-12
  1.1 药品及试剂  11
  1.2 实验动物  11-12
  1.3 实验仪器  12
  1.4 统计分析  12
第二部分高血压动物模型的建立及比较  12-14
  2.1 分组及给药指标观察  12
  2.2 指标观察  12-13
  2.3 实验结果  13-14
第三部分钩藤提取物的制备  14-18
  3.1 提取物的制备、分离和纯化  14-15
  3.2 提取物的HPLC分析  15-16
  3.3 实验结果  16-18
第四部分钩藤及其组分降压作用的实验研究  18-28
  4.1 对正常血压小鼠血压的影响  18-20
  4.2 对实验性高血压小鼠的降压作用  20
  4.3 对实验性高血压小鼠的急性降压作用  20-23
  4.4 对实验性高血压小鼠的慢性降压作用  23-27
  4.5 对血清指标的测定  27-28
第五部分讨论  28-35
  5.1 高血压定义  28-29
  5.2 立题依据  29-30
  5.3 高血压动物模型的分类与选择  30-31
  5.6 钩藤提取物的制备及HPLC分析  31-32
  5.7 钩藤及其组分降压作用的实验研究  32-35
结论  35-36
参考文献  36-40
综述  40-49
致谢  49

钩藤提取物对实验性高血压小鼠降压作用的实验研究

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