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胞核M-CSF对人宫颈癌HeLa细胞药物抗性的影响

作　者: 陈文琦
导　师: 姜浩；唐圣松
学　校: 南华大学
专　业: 肿瘤学
关键词: 巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF) 人宫颈癌细胞细胞凋亡多药耐药
分类号: R737.33
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

目的探讨胞核M-CSF对人宫颈癌HeLa细胞药物抗性的影响。方法分别以浓度为0.2μg/mL、2.0μg/mL、20μg/mL的顺铂或紫杉醇孵育HeLa细胞、HeLa-M细胞(M-CSF稳定转染并在核定位表达的HeLa细胞)、HeLa-C细胞(空载体稳定转染的HeLa细胞)48小时后,MTT法检测细胞相对活性、台盼兰拒染法测细胞存活率。分别以浓度为0.2μg/mL、2.0μg/mL、20μg/mL的顺铂或紫杉醇孵育HeLa-M细胞、HeLa细胞、HeLa-C细胞2小时后高效液相色谱法测细胞内顺铂和紫杉醇药物浓度;Western Blot检测Bcl-2蛋白的表达。结果MTT比色法及台盼兰细胞计数法测定结果显示:在顺铂或紫杉醇浓度为2.0μg/mL、20.0μg/mL时,HeLa-M细胞对顺铂或紫杉醇的抗性显著高于HeLa细胞、和HeLa-C细胞(p<0.01),当顺铂或紫杉醇浓度为0.2μg/mL时,三种细胞对顺铂或紫杉醇的抗性无明显差别(p>0.05)。在顺铂或紫杉醇三种浓度处理后,HeLa细胞与HeLa-C细胞的药物抗性无显著差异(p>0.05)。Annexin V/PI双染色流式细胞术分析结果显示:在顺铂或紫杉醇浓度为为2.0μg/mL、20.0μg/mL时,HeLa-M细胞凋亡率明显低于HeLa细胞与HeLa-C细胞组(p<0.01),当顺铂或紫杉醇浓度为0.2μg/mL时,三种细胞凋亡率相比无明显差别(p>0.05)。在上述三种浓度处理后,HeLa细胞和HeLa-C细胞凋亡率无明显差异(p>0.05)。高效液相色谱检测细胞内药物浓度显示:在顺铂或紫杉醇浓度为2.0μg/mL、20.0μg/mL时,HeLa-M细胞内顺铂浓度明显低于HeLa细胞与HeLa-C细胞组(p<0.01),当顺铂或紫杉醇浓度为0.2μg/mL时,三种细胞内药物浓度相比无明显差别(p>0.05)。在上述三种浓度处理后,HeLa细胞和HeLa-C细胞内药物浓度无明显差异(p>0.05)。Western Blot显示: HeLa-M细胞Bcl-2蛋白的表达明显高于HeLa细胞和HeLa-C细胞(p<0.01)。结论1.胞核M-CSF降低细胞内顺铂和紫杉醇的浓度,增强人宫颈癌HeLa细胞对顺铂和紫杉醇的抗性。2.胞核M-CSF上调人宫颈癌HeLa细胞Bcl-2蛋白的表达,抑制人宫颈癌HeLa细胞的凋亡。

全文目录

中英文缩略词表  4-5
中文摘要  5-7
英文摘要  7-9
前言  9-11
材料与方法  11-16
实验结果  16-26
讨论  26-29
结论  29-30
参考文献  30-37
综述  37-47
硕士期间撰写的论文  47-48
致谢  48

胞核M-CSF对人宫颈癌HeLa细胞药物抗性的影响

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