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福建国兰种质资源遗传多样性研究

作　者: 随粉粉
导　师: 潘大仁
学　校: 福建农林大学
专　业: 草业科学与技术
关键词: 中国兰花 遗传多样性 形态 同工酶 RAPD ISSR SRAP
分类号: S682.31
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
下　载: 108次
引　用: 2次
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内容摘要


根据目前兰花主要还是以传统的形态学分类为主,将中国兰花分为五大类的情况,本研究分别运用形态学、生物化学(同工酶)和分子生物学(三种分子标记)的方法,较全面、综合地对福建省的主要中国兰花种质资源进行了研究。以根、茎、叶和花为主要形态指标,证明了武夷山兰花与其他国兰种质资源之间存在明显的差异。过氧化物氧化酶和酯酶酶谱多样性程度较高。11份种质材料的过氧化物氧化酶共产生76条酶谱带,表现出14种不同的迁移率,Rf值变动在0.09~0.81之间;武夷山兰花谱带有两条特征性谱带,迁移率分别是0.15和0.18,说明了武夷山兰花的特异性。11份种质材料共产生69条酯酶酶谱带,表现出11种不同的迁移率,Rf值变动在0.15~0.65之间,并Rf =0.59处有一条11份种质的基本谱带。三种分子标记试验中,分别从100条RAPD引物、100条ISSR引物和80组SRAP引物组合中筛选出适合国兰种质分析多态性好的12条RAPD引物、17条ISSR引物和24个SRAP引物组合。其中12条RAPD引物扩增出138条带,多态性带108条,约占总数的78.3%;17条ISSR引物产生扩增172条带多态性带142条,约占总数的82.5%;24个SRAP引物组合,PCR扩增出204条条带,其中多态性条带是168条,占总条带数的82.4%,显示了较高的多态性。本研究从三个不同方面分析都显示不同福建国兰种质资源在遗传背景上有一定的差异;同时验证了采集自武夷山的兰花与建兰及其他兰花在遗传背景上有一定的差异,可以从中筛选出新的种质资源。建议中国兰花现可分为六大类,同时,聚类结果为中国兰花,特别是武夷山野生兰花资源的研究和保护,及兰花的新品种繁育提供了依据。

全文目录


中文摘要  7-8
ABSTRACT  8-9
第一章 文献综述  9-23
  1 引言  9-13
    1.1 中国兰花概述  9
    1.2 中国兰花历史  9-13
      1.2.1 中国兰花的栽培历史  9-10
      1.2.2 中国兰花的文化  10-11
      1.2.3 中国兰花的价值  11-13
  2 中国兰花种质资源研究进展  13-16
    2.1 形态学研究  13
    2.2 细胞学研究  13-14
    2.3 同工酶  14
    2.4 蛋白质  14
    2.5 分子生物学  14-16
  3 DNA 分子标记技术及其进展  16-20
    3.1 RFLP（Restriction Fragment Length Polymorphism）  16-17
    3.2 RAPD（Random Amplified Polymorphic DNA）  17
    3.3 SSR（Simple Sequence Repeat）  17-18
    3.4 ISSR（Inter-Simple Sequence Repeat, DNA）  18
    3.5 AFLP（Amplified Fragment Length Polymorphism）  18-19
    3.6 SCAR (Sequence—characterized Amplified Region)  19
    3.7 SRAP (Sequence Related Amplified Polymorphism )  19-20
  4 同工酶技术及其进展  20-21
  5 存在问题、本研究的意义及主要研究内容  21-23
    5.1 存在问题  21
    5.2 本研究的内容、目的和意义  21-23
第二章 形态特征、同工酶和分子标记分析  23-57
  1 材料与方法  23-30
    1.1 材料  23-25
      1.1.1 形态特征  23
      1.1.2 同工酶比较分析  23-24
      1.1.3 三种分子标记比较分析  24-25
    1.2 试验方法  25-30
      1.2.1 形态特征  25
      1.2.2 同工酶比较分析  25-27
      1.2.3 三种分子标记比较分析  27-30
  2 结果与分析  30-54
    2.1 形态特征  30-34
      2.1.1 形态指标图片  30-31
      2.1.2 形态指标结果  31-34
    2.2 同工酶分析比较  34-39
      2.2.1 不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳体系的优化  34-36
      2.2.2 遗传多样性分析  36-39
    2.3 三种分子标记比较分析  39-54
      2.3.1 DNA 提取结果  39
      2.3.2 三种分子标记最佳反应体系的建立  39-45
      2.3.3 遗传多样性分析  45-54
  3 小结与讨论  54-57
    3.1 RAPD-PCR 反应体系的优化  55
    3.2 同工酶酶液的提取  55
    3.3 POD 同工酶染色  55
    3.4 遗传多样性分析  55-57
第三章 本研究的主要结论、创新点及研究展望  57-58
  1 主要结论  57
  2 本研究的主要创新点  57
  3 进一步研究展望  57-58
参考文献  58-62
附录Ⅰ试验所用部分试剂配方  62-64
附录Ⅱ缩写词和英汉对照  64-65
致谢  65

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中图分类: > 农业科学 > 园艺 > 观赏园艺（花卉和观赏树木） > 多年生花卉类 > 其他花卉类 > 兰科植物
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