学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

环维黄杨星D对大鼠心衰的治疗作用及其对心肌Na~+-K~+-ATPase亚基表达的影响

作　者: 黄丹丹
导　师: 许立
学　校: 南京中医药大学
专　业: 药理学
关键词: 环维黄杨星D 心力衰竭治疗作用 Na~+-K~+-ATPase 机制
分类号: R965
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
下　载: 16次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载

内容摘要

环维黄杨星D (Cyclovirobuxine D,简称CVB-D)为黄杨生物碱中主要的有效单体,为黄杨宁片的主要组成成分。临床主要用于治疗心肌缺血、冠心病等心血管疾病。近些年,对环维黄杨星D的研究主要在心脑血管方面。已有的研究显示：CVB-D对心衰心脏具有保护作用,且这一作用与其抑制心肌钠钾ATP酶有关。本研究探讨CVB-D对心衰心脏的正性肌力作用是否与心脏Na+-K+-ATPase活性及其对Na+-K+-ATPase亚基α1、α2、α3、β1的影响有关。本实验造模方法：结扎冠脉左前降支,复制大鼠心衰模型。检测超声心动,查看参数指标,确定造模成功与否。造模成功的标准：EF<50%(射血分数)即为成模。成模后,分组给药,给药60天后,观察大鼠一般情况(存活率、饮食、运动等)。再次测超声心动,观察CVB-D对心衰大鼠心功能改善情况。血流动力学检测：收缩压,舒张压,平均压,脉压差的变化；左室收缩压、左室舒张末期压、左室压力最大变化速率,左室收缩开始至最大室内压时间等变化情况,判断CVB-D对心衰大鼠的心脏收缩,心功能改变,血压的作用。组织形态方面,称量动物心室质量,计算相关指数,制作心肌组织切片,进行HE染色,观察心脏病变部位,严重程度,透射电镜观察超微结构的改变。试剂盒检测心衰心肌组织中LDH、MDA、SOD的含量变化。细胞实验：组织块贴壁培养原代心肌细胞,鉴定细胞纯度。复制缺氧复氧损伤模型,模仿在体心衰模型。MTT法检测细胞成活率,检测各组心肌细胞中LDH、MDA、SOD的含量变化,Na+-K+-ATPase活性的变化,观察CVB-D对缺氧复氧损伤心肌细胞的作用。复制大鼠心衰模型,Elisa法测定心衰大鼠心肌组织中Na+-K+-ATPase活性变化,Western Blot检测Na+-K+-ATPaseα1、α2、α3、β1亚基蛋白表达的变化；RT-PCR检测Na+-K+-ATPaseα1、α2、α3、β1亚基mRNA表达的变化。实验结果显示：超声心动：与假手术组比较,模型组心衰大鼠EF、LVFS、SV、CO、LVPWs显著减少;LVIDd、LVIDs则显著增加(P<0.05,P<0.001)。与模型组比较,CVB-D中、高剂量组EF、LVFS明显增加(P<0.05,P<0.01); CVB-D低、中剂量组可见SV增加(P<0.05)；CVB-D低、中、高剂量组显示CO增加(P<0.05)。同时,与模型组比较,CVB-D高剂量组显示LVPWs增加,但LVIDs却减少(P<0.05)。血流动力学：与假手术组比较,模型组血流动力学指标明显下降的有：±dp/dtmax、 LVSP、收缩压、舒张压、舒张压及平均压；同时LVEDP (P<0.05,P<0.01)增加。与模型组比较,CVB-D (0.5、1、2mg/kg)三个剂量组±dp/dtmax、LVSP、收缩压、舒张压、舒张压增加明显,LVEDP明显降低(P<0.05,P<0.01)。组织形态：与假手术组比较,模型组HMI和LVMI出现明显升高,提示模型组大鼠心脏有一定程度地肥大。CVB-D各给药组出现HMI和LVMI的降低(P<0.05,P<0.01)。HE染色显示：CVB-D低、中、高剂量给药组心肌纤维逐渐变细、肌纤维排逐渐整齐,“分枝”状与“漩涡”状渐渐消失,细胞核染色变浅,相对均匀,且形状整齐。透射电镜显示：CVB-D各剂量组肌纤维排列有所改善,肌纤维断裂减少,线粒体数量增多,肿胀变性减轻。嵴增多,清晰度、致密度得到改善。试剂盒测定：与假手术组比较,模型组SOD含量减少,LDH、MDA含量明显增加(P <0.05, P<0.01)。 CVB-D三个剂量组SOD活力增加,MDA含量显著减少,与模型组相比较(P<0.05,P<0.01)。给药组中只有CVB-D高剂量组LDH降低(P<0.05)。缺氧复氧损伤：MTT结果显示,CVB-D10-4,10-5,10"6mol/L对原代心肌细胞有增殖作用。CVB-D作用于缺氧复氧损伤心肌细胞12小时后,受损细胞活力增强,贴壁增多。CVB-D给药组SOD、MDA与模型组比较均有明显增加(P<0.05, P<0.01)。LDH释放量CVB-D与模型组比较有差异(P<0.05)。与模型组比较,CVB-D低剂量给药组Na+-K+-ATPase活性升高(P<0.05), CVB-D中、高剂量给药组Na+-K+-ATPase活性显著升高(P<0.01)。动物心衰实验显示：与假手术组相比,模型组的Na+-K+-ATPase活性显著降低(P<0.01)；与模型组相比,CVB-D各给药组明显升高Na+-K+-ATPase活性。与假手术组相比,模型组的Na+-K+-ATPaseal、α2、α3、β1蛋白表达显著下降(P<0.01)；与模型组比较,CVB-D各给药组Na+-K+-ATPaseal、α2、α3、β1蛋白表达显著升高(P<0.01)。与假手术组比较,模型组的Na+-K+-ATPaseal、α2、α3、β1基因表达显著下降(P<0.01)与模型组比较,CVB-D各给药组Na+-K+-ATPaseal、α2、α3、β1基因表达显著升高(P<0.01)。

全文目录

目录  5-7
摘要  7-9
Abstract  9-12
前言  12-15
  参考文献  13-15
第一章环维黄杨星D对心衰大鼠的治疗作用  15-41
  第一节 CVB-D对心衰大鼠心功能的改变  15-22
    摘要  15
    1 实验动物、试剂与仪器  15
    2 实验方法  15-16
    3 结果  16-20
    4 讨论  20
    5 参考文献  20-22
  第二节 CVB-D对心衰大鼠血流动力学的影响  22-28
    摘要  22
    1 实验动物、试剂与仪器  22
    2 实验方法  22-23
    3 结果  23-26
    4 讨论  26
    5 参考文献  26-28
  第三节观察CVB-D对心衰大鼠心肌形态的影响  28-34
    摘要  28
    1 实验动物、试剂与仪器  28
    2 实验方法  28-29
    3 结果  29-33
    4.讨论  33
    5.参考文献  33-34
  第四节 CVB-D对心衰大鼠LDH、MDA、SOD的影响  34-41
    摘要  34
    1 实验动物、试剂与仪器  34-35
    2 实验方法  35-37
    3 统计分析  37
    4 结果  37-39
    5 讨论  39-40
    6 参考文献  40-41
第二章环维黄杨星D对心肌细胞缺氧复氧损伤的作用  41-59
  第一节新生大鼠原代心肌细胞的培养与鉴定  41-46
    摘要  41
    1 材料与方法  41-42
    2 结果  42-44
    3 讨论  44
    4 参考文献  44-46
  第二节 CVB-D对缺氧复氧损伤心肌细胞的影响  46-59
    摘要  46
    1 实验试剂、材料、仪器  46-47
    2 实验方法  47-51
    3 统计分析  51
    4 结果  51-57
    5 讨论  57-58
    参考文献  58-59
第三章环维黄杨星D对心衰大鼠心肌钠钾ATP酶亚基的影响  59-72
  摘要  59
  1 实验动物、试剂与药品、仪器  59-61
  2 实验方法  61-64
  3 统计学方法  64-65
  4 结果  65-69
  5 讨论  69-70
  6 参考文献  70-72
全文小结  72-73
综述：环维黄杨星D心血管系统药理作用研究进展  73-78
  参考文献  75-78
英文缩写对照  78-79
发表论文  79-80
致谢  80

环维黄杨星D对大鼠心衰的治疗作用及其对心肌Na~+-K~+-ATPase亚基表达的影响

内容摘要

全文目录

相似论文