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白藜芦醇对淋巴瘤细胞的抑制作用及对促凋亡蛋白caspase-3影响的研究

作　者: 田双
导　师: 魏锐利
学　校: 第二军医大学
专　业: 眼科学
关键词: 白藜芦醇淋巴瘤细胞增值细胞凋亡
分类号: R733.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
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内容摘要

白藜芦醇对淋巴瘤细胞的抑制作用及对促凋亡蛋白caspase-3影响的研究目的：最常见的眼眶淋巴瘤细胞的来源几乎都是B细胞，而BJAB细胞也是来源于B细胞。因此，选择BJAB细胞作为研究对象，探讨白藜芦醇它的抑制作用，以及对促凋亡蛋白caspase-3影响，进而研究白藜芦醇对眼附属器结外边缘区B细胞淋巴瘤(extranodal marginal zone B cell lymphoma of mucosa-associated lymphoidtissue，MALT)的作用和相关机制。方法：1、首先复苏BJAB细胞。细胞稳定后培养并观察生长状况，了解细胞的生物学特性。2、实验分为白藜芦醇药物组（浓度分别为25μmol/L、50μmol/L、100μmol/L）、阿霉素阳性对照组（浓度为40μmol/L）及空白对照组，分别作用于BJAB细胞，在24、48、72h时观察细胞的形态变化，采用CCK-8法检测不同组别的BJAB细胞增殖的抑制率，从而观察各组不同浓度的药物在不同时间对BJAB细胞增殖的抑制作用。3、采用western blot检测各组细胞caspase-3(半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3)蛋白的表达情况，分析不同浓度的药物在不同时间对BJAB细胞凋亡的影响。结果：1、复苏的BJAB细胞密度中等，形态正常。胞体呈圆形或类圆形，细胞核圆，生长状态良好。2、不同药物浓度的白藜芦醇药物组和阿霉素阳性对照组作用于BJAB细胞24、48、72h，均可以不同程度地抑制细胞增殖，cck-8法检测的OD值均低于空白对照组，经统计分析，差距具有统计学意义（P<0．05）。3、western blot检测结果显示，与空白对照组相比，不同药物浓度的白藜芦醇药物组和阿霉素阳性对照组作用于BJAB细胞24、48、72h，caspase-3蛋白的表达均有不同程度的升高。结论：1、白藜芦醇对BJAB细胞的增殖具有一定的抑制作用，浓度和时间均可以影响细胞增殖，其中时间依赖性作用明显。当白藜芦醇浓度为100μmol/L时,呈现时间依赖性，浓度为25μmol/L和50μmol/L时，虽然不呈现时间依赖性，但是72h后，浓度为50μmol/L的细胞活性较低，细胞死亡较多，故浓度也会影响细胞活性，影响细胞增殖。2、白藜芦醇可以影响caspase-3蛋白的表达，从而促进细胞凋亡。白藜芦醇各个浓度的处理组在24h和48h时，caspase-3蛋白表达升高不明显，但是在72h时，caspase-3蛋白表达显著升高，呈剂量依赖型。3、眼附属器malt淋巴瘤细胞和BJAB细胞是同源细胞，因此根据白藜芦醇对于BJAB细胞的作用，推测其对malt淋巴瘤也具有一定的抑制细胞增殖作用，但是具体的实验还有待进一步研究。

白藜芦醇对淋巴瘤细胞的抑制作用及对促凋亡蛋白caspase-3影响的研究

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