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胆管缺血再灌注损伤后病理生理变化及HIF-1α的表达

作　者: 张虎
导　师: 杨玉龙
学　校: 大连大学
专　业: 普外科
关键词: 肝移植胆管热缺血再灌注损伤胆道并发症
分类号: R657.3
类　型: 硕士论文
年　份: 2014年
下　载: 3次
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内容摘要

背景：目前，肝移植术已经成为治疗终末期肝脏疾病最有效选择，但是肝移植术后胆道并发症，往往是导致移植肝丢失及需行二次肝移植6的主要原因之一[1]。胆管缺血再灌注损伤是活体肝移植后胆管损伤的主要原因，其中胆道最容易受到热缺血损伤的影响，,如何确定胆管耐受热缺血的安全时限是肝移植临床上需要解决的问题，但肝内胆管在常温下能够耐受多长时间的热缺血目前暂无定论[2]。目的：建立SD大鼠胆道缺血再灌注损伤的模型，根据实验数据及病理生理变化分析出SD大鼠肝内胆管热缺血的安全时限，从而为临床上设计合理的手术方案及活体肝移植阻断胆道血流的安全时间提供依据。方法：将SD大鼠按照抽签法随机分为假手术组，联合阻断肝动脉、胆总管和门静脉15、30、45、60min组。假手术组仅离肝周韧带、肝动脉、门静脉及胆总管，分离后不夹闭；肝动脉、门静脉、胆总管联合阻断15、30、45、60min组应用无损伤动脉夹联合夹闭肝动脉、门静脉、胆总管及其间疏松结缔组织，阻断15、30、45、60min后去除无损伤动脉夹，即恢复胆管和肝脏的血流。各组分别于复流前，复流12h，1、2、3和7d取SD大鼠下腔静脉血4ml，分离血清后进行肝功能测定（谷草转氨酶AST、谷丙转氨酶ALT、丙氨酰转肽酶GGT、碱性磷酸酶ALP)；光学显微镜镜下观察肝脏组织病理变化，免疫组织化学SABC法检测HIF-1α在胆管热缺血再灌注复流前、复流12h、1d、2d、3d、7d的表达情况；电子显微镜下观察胆管上皮细胞超微结构的变化。结果：实验组于复流各时相点AST、ALT、ALP、GGT较相应时相点假手术组显著升高（P<0.05)，差异有统计学意义；随着胆道热缺血时间的延长，缺血30min以内，肝组织的病理学改变较轻，仅表现为炎细胞浸润及细胞水肿，而热缺血30min以后，肝脏组织的病理学改变可见胆管上皮细胞坏死脱落明显，肝组织见片状、多灶性坏死灶，损伤不可逆；随着热缺血时间延长，相应时相点HIF-1α表达增强。结论：本实验研究表明，SD大鼠能够耐受30min以内的肝内胆管热缺血。

全文目录

摘要  5-6
Abstract  6-9
引言  9-12
1 材料与方法  12-15
  1.1 实验动物及其分组  12
  1.2 主要试剂及仪器  12
    1.2.1 主要试剂  12
    1.2.2 实验仪器  12
  1.3 实验方法  12-13
    1.3.1 动物分组  12-13
    1.3.2 动物模型建立  13
  1.4 标本获取及检测指标  13-14
    1.4.1 血清 ALT、AST、TBIL、ALP  13
    1.4.2 组织病理学检查及免疫组化HIF-1α的表达  13
    1.4.3 透射电镜标本制备  13-14
  1.5 统计学方法  14-15
2 结果  15-23
  2.1 血清 ALT、AST、TBIL、ALP 的测定结果  15-16
  2.2 光镜观察  16-17
  2.3 电镜观察  17-20
  2.4 HIF-1α的表达情况  20-23
3 讨论  23-26
结论  26-27
参考文献  27-29
综述  29-37
  参考文献  35-37
攻读硕士学位期间发表学术论文情况  37-38
致谢  38

胆管缺血再灌注损伤后病理生理变化及HIF-1α的表达

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