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电针预处理对兔心肌缺血再灌注损伤腺苷A1受体、PKC的影响

作　者: 张佳丽
导　师: 常小荣
学　校: 湖南中医药大学
专　业: 针灸推拿学
关键词: 电针预处理缺血预适应内关腺苷蛋白激酶C
分类号: R245
类　型: 硕士论文
年　份: 2014年
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内容摘要

目的：建立兔MIRI模型,观察电针内关预处理对MIRI兔血清腺苷,心肌腺苷A1受体、PKC的影响,对比电针“内关”预处理与IP两种预处理手段对心肌的保护作用,探讨电针预处理防治MIRI的可能作用机制,为临床应用针灸防治MIRI提供部分参考依据。方法：24只新西兰大耳白兔随机分为4组,A.假手术组,B.缺血再灌注组(模型组),C.IP组,D.电针内关+模型组。采用冠状动脉左旋支结扎30min再灌注60min的方法,建立MIRI模型。各组均于末次捆绑后开胸取材。A组穿线静置30分钟,拔线,续静置60分钟后取材；B、D组于末次捆绑后造模取材；C组行IP后同B组。用HE染色观察兔冠脉左旋支支配区细胞形态学变化；用高效液相色谱法测定血清腺苷含量；免疫组化方法检测腺苷A1受体的表达；western blot观察心肌p-PKC活性。结果：1.HE染色观察兔冠脉左旋支支配区心肌细胞形态：A组组织未见明显改变,C、D组组织形态学改变较B组轻。2.各组兔血清腺苷含量比较：B组含量较A组明显降低,具有统计学意义(P<0.05)；C与D组的含量较B组明显升高,具有显著统计学意义(P<0.01)；而C组与D组比较,组间差异不明显(P>0.05)。3.心肌腺苷A1受体含量比较：B组腺苷A1受体表达较A组明显降低,具有统计学意义(P<0.05)；C、D组含量较B组明显升高,具有显著统计学意义(P<0.01)；而C组与D组比较,组间差异不明显(P>0.05)。4.各组心肌pPKC/actin检测表明：与A组相比,B组PKC的活性表达明显降低(P<0.05),C、D组则明显升高,具有显著统计学意义(P<0.01)；与C组相比D组心肌细胞中p-PKC的活性表达明显升高,具有显著统计学意义(P<0.01)。结论：1.电针内关穴预处理可减轻MIRI模型兔心肌组织形态学的病变。2.电针内关预处理可促进MIRI兔血清中内源性保护物质腺苷的释放；诱导腺苷A1受体表达。3.电针内关预处理对心肌缺血再灌注损伤的保护作用可能与其促进PKC的活化有关,PKC的活化可能是腺苷A1受体起到心脏保护作用的中介通路之一。

全文目录

中英文术语缩写对照表  5-6
中文摘要  6-8
引言  8-11
材料与方法  11-20
  1. 实验材料  11-12
    1.1 实验动物  11
    1.2 主要器材及试剂  11-12
      1.2.1 主要仪器  11
      1.2.2 主要试剂  11-12
      1.2.3 主要器械  12
  2. 实验方法  12-19
    2.1 动物分组  12-13
    2.2 实验步骤  13-14
    2.3 穴位定位  14
    2.4 预处理方法  14
    2.5 造模方法  14-16
    2.6 取材  16-17
      2.6.1 血液样本的采集与处理  16
      2.6.2 心肌组织取材与处理  16-17
    2.7 指标检测  17-19
      2.7.1 HE染色观察兔冠脉左旋支支配区心肌的细胞形态学变化  17
      2.7.2 高效液相色谱法测定血清腺苷含量  17-18
      2.7.3 免疫组化法检测心肌组织腺苷A1受体含量  18
      2.7.4 western blot检测p-PKC在细胞中的表达  18-19
  3 统计方法  19-20
结果与分析  20-24
  1. 各组兔冠脉左旋支支配区心肌组织的细胞形态学观察(光镜×400)  20-21
  2. 电针内关穴预处理对MIRI兔血清腺苷的影响  21-22
  3. 电针内关穴预处理对MIRI兔心肌组织腺苷A1受体含量的影响  22-23
  4. 电针内关穴预处理对MIRI兔心肌细胞PKC活性表达的影响  23-24
讨论  24-36
  1. 现代医学对的MIRI的认识  24-25
  2. 中医对心肌缺血再灌注的认识  25-27
    2.1 病名  25-26
    2.2 病因病机  26
    2.3 治法治则  26-27
  3. 针灸防治MIRI的研究进展  27-29
  4. “针灸预处理”与“治未病”思想  29-30
  5. 电针预处理防治MIRI的临床和实验研究进展  30-31
  6. 本实验的选穴依据  31-32
  7. 腺苷、腺苷A1受体、蛋白激酶C在MIRI中的作用  32-34
  8. 电针内关预处理对兔MIRI保护作用的探讨  34-36
结论  36-37
致谢  37-38
参考文献  38-42
附录一：综述  42-50
  参考文献  48-50
附录二：攻读硕士学位期间发表论文、参与课题等情况  50

电针预处理对兔心肌缺血再灌注损伤腺苷A1受体、PKC的影响

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