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东亚钳蝎毒镇痛活性肽Ⅴ（SAPⅤ）的分离纯化及部分性质研究

作　者: 汪丽
导　师: 张景海
学　校: 沈阳药科大学
专　业: 微生物与生化药学
关键词: 东亚钳蝎蝎毒分离纯化镇痛活性肽醋酸扭体法
分类号: R914
类　型: 硕士论文
年　份: 2006年
下　载: 42次
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内容摘要

蝎毒中含有许多具有独特生物活性的多肽成分，有着重要的临床价值，其作用主要有以下几个方面：抗肿瘤、镇痛、抗惊厥、抗癫痫、降血压及抗血栓形成等。本文主要关注蝎毒的镇痛活性。本文利用四步柱层析，从东亚钳蝎毒中筛选到一种新的镇痛活性肽Ⅴ(SAPⅤ)。经SDS-PAGE鉴定为单一条带，反相离子对高效液相色谱及高效毛细管电泳鉴定均为对称单峰。经SDS-PAGE测定SAPⅤ的分子量为8.9K，在278.4nm处有紫外最大吸收峰，用等电聚焦法测得它的等电点为8.77。用Edman降解法测定东亚钳蝎毒镇痛活性肽SAPⅤN-末端20个氨基酸序列。用小鼠醋酸扭体法进行药理活性测定，结果表明SAPⅤ对小鼠内脏痛有明显抑制作用。在剂量为0.1mg／kg小鼠体重时，SAPⅤ对由醋酸引起的小鼠扭体反应抑制率为70％。

全文目录

摘要  9-10
Abstract  10-11
第一章引言  11-25
  1.蝎毒的组成成分及其性质  11-12
  2.蝎神经毒素研究概况  12-17
    2.1 Na~+通道毒素  12-15
    2.2 K~+通道毒素  15-16
    2.3 Cl~-通道毒素  16
    2.4 Ca~(2+)通道毒素  16-17
  3.蝎毒的药理作用及临床应用  17-20
    3.1 蝎毒的药理作用  17-18
    3.2 临床应用  18-20
  4.蝎毒组分的分离纯化  20-22
    4.1 哺乳动物神经毒素及甲壳动物毒素  20-21
    4.2 昆虫神经毒素  21
    4.3 膜毒素  21-22
  5.东亚钳蝎毒镇痛活性研究  22-23
    5.1 镇痛方法  22
    5.2 蝎毒的镇痛作用  22-23
    5.3 蝎毒的镇痛机理  23
  6.蝎毒的研究方向及立题依据  23-25
第二章东亚钳蝎毒镇痛活性肽Ⅴ(SAPⅤ)的分离纯化  25-42
  1.实验材料  25
    1.1 东亚钳蝎蝎毒  25
    1.2 昆明种小白鼠  25
    1.3 填料  25
    1.4 试剂  25
  2.实验仪器  25-26
  3.实验方法  26-32
    3.1 蛋白含量测定——Lowry法(即Folin法)  26
    3.2 镇痛活性筛选——小鼠醋酸扭体法  26-27
    3.3 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)  27-29
    3.4 柱层析  29-32
  4.实验结果  32-38
    4.1 蛋白含量测定——Lowry法(即Folin法)  32
    4.2 第一步柱层析(First chromatograpy)  32-33
    4.3 第二步柱层析(Second chromatography)  33-35
    4.4 第三步柱层析(Third chromatography)  35-36
    4.5 第四步柱层析(Fourthchromatography)  36-38
  5.讨论  38-41
  6.小结  41-42
第三章东亚钳蝎毒镇痛活性肽Ⅴ(SAPⅤ)的纯度鉴定及部分性质研究  42-55
  1.实验材料  42
    1.1 东亚钳蝎蝎毒镇痛活性肽SAPⅤ  42
    1.2 试剂  42
  2.实验仪器  42-43
  3.实验方法  43-46
    3.1 纯度鉴定  43-44
    3.2 部分性质测定  44-46
  4.实验结果  46-51
    4.1 纯度鉴定  46-49
    4.2 部分性质测定  49-51
  5.讨论  51-54
    5.1 纯度鉴定  51-53
    5.2 部分性质  53-54
  6.小结  54-55
结论  55-56
参考文献  56-61
致谢  61

东亚钳蝎毒镇痛活性肽Ⅴ（SAPⅤ）的分离纯化及部分性质研究

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