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可固化氢氧化钙根管封闭剂生物相容性及根尖封闭性的研究

作　者: 穆云静
导　师: 余擎; 屈铁军
学　校: 第四军医大学
专　业: 口腔临床医学
关键词: 氢氧化钙根管封闭剂细胞毒性生物相容性微渗漏葡萄糖氧化酶法
分类号: R781.05
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
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内容摘要

根管治疗术是治疗急慢性牙髓炎及根尖周疾病最有效的方法，其最终步骤是进行根管系统的严密充填，目的为消除根管内死腔阻断感染途径，且能够诱导根尖孔闭合。许多研究表明根管封闭剂是根管封闭良好不可缺少的材料1。目前临床常用的根管封闭剂主要分为氧化锌类、氢氧化钙类、硅酮类、树脂类、玻璃离子类以及纳米材料等，然而至今仍然没有一种材料能够同时满足理想封闭剂的各种要求。第四军医大学材料教研室自主研发的可固化氢氧化钙根管封闭剂是一种双组分糊剂，Ａ组分主要为Ca（OH）₂，B组分主要为水杨酸1,3-丁二醇酯，两种组分混合发生螯合作用而凝固，该材料具有可凝固性，容易就位，X射线阻射性，不使牙体染色等特点。然而，该材料是否能够作为临床的根管充填材料尚未见文献报道，还需要进行一系列的实验研究。本文通过对根管封闭剂的细胞毒性、生物相容性和根尖封闭能力三方面进行检测，将自制的Ca（OH）₂封闭剂与国内外临床常用的几种封闭剂MTA、AH Plus、Roeko Seal、Cortisomol、RC Sealer等进行比较研究，并利用X射线能谱仪分析材料内部元素含量，通过场发射扫描电子显微镜观察材料超微结构。本研究为该材料进入临床使用的可能性进行客观的综合评价，并提供相关理论依据。实验一CCK-8法对几种根管封闭剂的体外细胞毒性研究目的：检测MTA、AH Plus、Roeko Seal、Cortisomol、Ca（OH）2几种根管封闭剂对L-929细胞的体外细胞毒性作用，评价其对细胞的生物相容性。方法：本实验通过X射线谱仪对MTA、AH Plus、Roeko Seal、Cortisomol、Ca（OH）2几种根管封闭剂进行元素分析，并采用CCK-8法检测各材料凝固后即刻和凝固1周后在100%和50%两种浸提液浓度下对L-929细胞的体外细胞毒性作用。结果：AH Plus组的即刻组和1周组样本中100%浓度浸提液与50%浓度浸提液第1、2、4天的细胞增殖率有统计学差异（P<0.05），50%浓度组细胞增殖率高，即细胞毒性减小。其他4组封闭剂的即刻组和1周组样本中100%浓度浸提液与50%浓度浸提液第1、2、4天的细胞增殖率比较无显著性差异（P>0.05），即细胞毒性无明显变化。Cortisomol组与Ca（OH）₂组之间的细胞增殖率无统计学差异（P>0.05），MTA组与Roeko Seal组之间无统计学差异（P>0.05），AH Plus组与其它各组间均有有统计学差异（P<0.05）。结论：MTA与Roeko Seal的细胞毒性最小，AH Plus的细胞毒性居中，Cortisomol与Ca（OH）₂的细胞毒性相似，且毒性都未超过3级。实验二可固化氢氧化钙根管封闭剂对大鼠皮下及颅骨的组织相容性研究目的：通过大鼠皮下埋植和骨内埋植实验，比较MTA、AH Plus和Ca（OH）₂几种根管封闭剂的生物相容性。方法：分别将28只SD大鼠随机分为4组，每组7只，把MTA、AH Plus和Ca（OH）₂几种根管封闭剂埋植于大鼠皮下或者颅骨内，于术后1周、2周、4周、8周观察皮下埋植材料的组织相容性；术后2周、4周、8周、12周观察颅骨内埋植材料的组织相容性。结果：皮下埋植实验观察为，除第1周外MTA均表现为I级炎症反应，与阴性对照组相比无统计学意义（P>0.05），术后第1、2、4周AH Plus和Ca（OH）₂组表现为II级炎症反应，与阴性对照组相比有统计学意义（P<0.05），到第8周表现为I级炎症反应。骨内埋植实验观察为，术后第2、4周MTA组表现为纤维结缔组织移行，第8周起成新骨向材料内部生长，第12周材料表面被新生骨完全覆盖；AH Plus组和Ca（OH）₂组术后第2、4、8周可见纤维结缔组织逐渐包绕材料，第12周可见部分新骨包绕分割材料并向材料内部不规则生长。结论：材料MTA对大鼠皮下结缔组织和骨组织的生物相容性较好，材料AH Plus和Ca（OH）₂对大鼠皮下结缔组织和骨组织的生物相容性近似。实验三恒压式葡萄糖定量法评价几种根管封闭剂的封闭性能目的：本实验将通过建立恒压式葡萄糖定量微渗漏模型，并以此评价AHPlus、Roeko Seal、Cortisomol、RC Sealer、Ca（OH）₂几种根管封闭剂的封闭性能。方法：选取68颗单直根管的上前牙，随机分为五个实验组：A组：AH Plus组；B组：Roeko Seal组；C组：Cortisomol组；D组：RC Sealer组；E组：Ca（OH）₂组，每组各12颗，另设阳性对照组和阴性对照组（每组各4颗）。常规根管预备后，实验组用冷牙胶侧向加压充填技术配合各根管封闭剂充填根管，对照组只使用牙胶尖充填。通过恒压式葡萄糖定量微渗漏模型，用葡萄糖氧化酶（glucose oxidase, GOD）法检测第1、3、5、7、10、15、20、25、30天从冠方向根方漏出的葡萄糖的量。结果：第1、3、5天时，A、B两组间及C、D、E组间葡萄糖微渗漏值无统计学意义（P>0.05）；第7天起实验各组微渗漏值逐渐增大，C、E组间无统计学意义（P>0.05），其它各组间均有统计学意义（P<0.05）。结论：恒压式葡萄糖微渗漏模型建模简单、灵敏度高、操作性强，此模型测试结果显示，根管封闭剂聚二甲基硅氧烷类（Roeko Seal）封闭根管的能力较强，树脂类封闭剂（AH Plus）居中，Ca（OH）₂与氧化锌类封闭剂（Cortisomol、RC Sealer）封闭性能相当。

可固化氢氧化钙根管封闭剂生物相容性及根尖封闭性的研究

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