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Stathmin表达沉默鼻咽癌细胞株的建立及其生物学特性初探

作　者: 范才文
导　师: 向秋
学　校: 桂林医学院
专　业: 病理学与病理生理学
关键词: 鼻咽癌 5-8F细胞 stathmin 沉默 RNA干扰
分类号: R739.63
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
下　载: 15次
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内容摘要

目的：构建stathmin-siRNA重组质粒表达载体,建立stathmin表达沉默鼻咽癌 5-8F细胞株,探讨stathmin沉默对鼻咽癌5-8F细胞的增殖、周期和成瘤性的影响,为鼻咽癌的基因治疗提供实验依据。方法：(1)合成stathmin特异性siRNA片段,片段插入pGenesil-1.1质粒表达载体构建重组质粒表达载体。(2)重组质粒表达载体转染,RT-PCR和Western blotting鉴定,建立stathmin稳定抑制表达5-8F细胞株。(3)MTT实验分析细胞的增殖,流式细胞仪分析细胞的周期。(4)裸鼠移植瘤实验分析肿瘤细胞的成瘤性。结果：(1)获得了stathmin siRNA pGenesil-1.1重组质粒表达载体和stathmin沉默的鼻咽癌5-8F细胞株。(2)Stathmin沉默5-8F细胞株孵育48、72和96h,细胞增殖抑制率分别为(33.67±2.52)%,(28.33±1.15)%,(31.67±1.53)%,与阴性对照组分别为(8.13±0.60)%,(3.20±0.53)%,(3.97±0.15)%和空白对照组(0)比较,差异有显著性(p<0.01)。(3)Stathmin沉默组G2期细胞为(15.8±0.55)%,与阴性对照组(11.3±0.79)%和空白对照组(10.9±0.92)%比较,差异有显著性(P<0.05)。(4)Stathmin沉默组,裸鼠移植瘤重量为(0.32±0.21)g,与阴性对照组(1.10±0.40)g和空白对照组(1.52±0.30)g比较,差异有显著性(P<0.05)结论：(1)成功构建stathmin-siRNA重组质粒表达载体。(2)建立了stathmin急定抑制表达的5-8F细胞株。(3)Stathmin沉默抑制5-8F细胞的恶性生物学表型。

全文目录

中文摘要  4-5
ABSTRACT  5-7
英汉缩略词对照表  7-8
前言  8-10
1 材料与方法  10-27
  1.1 实验材料与仪器  10-13
  1.2 实验方法  13-27
2 结果  27-33
3 讨论  33-36
4 结论  36
参考文献  36-40
综述  40-51
  参考文献  45-51
攻读学位期间发表的学术论文目录  51
致谢  51

Stathmin表达沉默鼻咽癌细胞株的建立及其生物学特性初探

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