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PTEN及RhoA在大鼠缺血—再灌注大脑皮层的表达及Cystamine对其表达的影响
作 者: 程晓荷
导 师: 李云
学 校: 山东大学
专 业: 临床医学
关键词: Cystamine 脑缺血 再灌注损伤 Ras基因同源物A(RhoA) 第10号染色体同源丢失性磷酸酶张力蛋白(PTFN)
分类号: R743.31
类 型: 硕士论文
年 份: 2012年
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内容摘要
目的①研究大鼠全脑缺血再灌注后大脑皮层PTEN、RhoA表达及凋亡细胞数目的变化②观察应用Cystamine后对这种变化的影响③探讨Cystamine神经保护作用的可能机制。方法采用经典的4血管阻断法改良法制作大鼠全脑缺血再灌注模型,取104只(模型成功率75%,死亡后补充动物)成年雄性SD大鼠,体重280-320g,随机分为假手术组(sham)、全脑缺血组(GI)和全脑缺血+Cystamine (GI+CYS)治疗组3组,其中sham组8只大鼠,GI和GI+CYS组各48只大鼠。GI组和GI+CYS组又按再灌注后不同的时间点(6h、12h、1d、3d、5d、7d)随机分为六个亚组,各亚组8只大鼠。GI+CYS组在缺血10分钟后立即给予Cystamine (150mg/kg)腹腔注射,并于缺血后每24小时给予一次CYS(150mg/kg)腹腔注射;于相同时间点各缺血组亚组给予同等计量的生理盐水腹腔注射。Sham组的大鼠每天腹腔注射生理盐水1ml,连续注射三天后处死;GI和GI+CYS组各亚组分别于再灌注后相应时间点处死。TUNEL染色观察全脑缺血再灌注后大脑皮层额叶神经元凋亡水平的变化,用图像采集系统和图像处理软件计数额叶中央前回区TUNEL阳性细胞数。免疫组织化学染色观察再灌注后大脑皮层额叶PTEN及RhoA蛋白表达强度的变化,用图像采集系统和图像处理软件对皮层额叶中央前回区PTEN及RhoA蛋白进行光密度分析。结果1)TUNEL染色结果全脑缺血再灌注后大脑皮层TUNEL阳性细胞数明显增加,1d、3d、5d、7d缺血组亚组与sham组相比有统计学意义(p<0.01),治疗组1、3、5、7天亚组的阳性细胞数与相应时间点GI组亚组相比明显减少(p<0.01)。2)免疫组化染色结果①RhoA的表达:全脑缺血后大脑皮层RhoA蛋白的表达水平明显增高。RhoA于缺血后6h开始增加,至72h达高峰,持续到7天时仍明显增高,12h、1d、3d、5d、7d缺血组亚组与sham组相比有统计学意义(p<0.01);与缺血组相比,治疗组RhoA于12h、1d、3d、5d、7d蛋白表达水平显著下降,与缺血组相应时间点相比有统计学意义(p<0.01,p<0.05)。②PTEN的表达:全脑缺血后PTEN蛋白的表达也显著增加,PTEN的表达水平于缺血后1天开始上升,3天达到高峰,持续至7天表达仍明显增高。缺血组1d、3d、5d、7d亚组与sham组相比有统计学意义(p<0.01)。治疗组PTEN于1d、3d、5d、7d蛋白表达平均光密度明显低于相应时间点缺血组(p<0.01)。结论全脑缺血再灌注后大脑皮层中凋亡细胞增多,且PTEN及RhoA的表达也显著增加,提示脑缺血再灌注后PTEN及RhoA的高表达促进了神经元的损伤。Cystamine可以减少大鼠大脑皮层缺血再灌注后凋亡神经元的数目,并且可以降低PTEN及RhoA蛋白的表达,提示对PTEN、RhoA表达的抑制可能参与了Cystamine的神经保护作用机制。
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全文目录
中文摘要 6-8 ABSTRACT 8-10 符号及英文说明 10-11 前言 11-16 材料和方法 16-22 结果 22-23 讨论 23-36 结论 36-37 附录及图表 37-43 参考文献 43-51 致谢 51-52 攻读学位期间发表的学术论文 52-53 学位论文评阅及答辩情况表 53
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中图分类: > 医药、卫生 > 神经病学与精神病学 > 神经病学 > 脑血管疾病 > 急性脑血管疾病(中风) > 短暂性脑缺血
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