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南极磷虾油脂提取、分析及其对小鼠酒精性脂肪肝模型作用研究

作　者: 赵传凯
导　师: 姜国良
学　校: 中国海洋大学
专　业: 海洋生物学
关键词: 南极磷虾油脂肪酸酒精性脂肪肝三酰甘油胆固醇
分类号: R-332
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
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内容摘要

作为地球上数量最大、繁衍最成功的单种生物资源之一的南极磷虾，营养丰富全面，又因其巨大的生物量和潜在的渔业资源，及在南极生态中的关键地位而日益受到人们的关注。南极磷虾油具有极高的营养价值和医用价值。相关研究已发现，南极磷虾油可以降低血糖和调节血脂等，对脂肪肝也有一定的治疗作用；而目前国内对于南极磷虾油的研究还处在一个初级阶段。探索南极磷虾油脂提取工艺技术和进行生物活性实验验证，寻找适合我国国情的南极磷虾油开发技术路线，具有重要的经济和社会价值。本研究利用无水乙醇萃取南极磷虾干粉，经溶剂浸提、减压蒸馏、恒温干燥后得到高纯度南极磷虾油。并以此为基础，优化提取工艺，并对南极磷虾油的生物活性进行验证，对受试酒精性肝损伤小鼠作用效果作了评价。本研究共分三个部分。第一部分：南极磷虾油提取工艺优化研究使用有机溶剂提取南极大磷虾油脂工艺。通过单因素实验和正交实验进行探讨，结果表明，最佳工艺条件为以无水乙醇为提取剂，提取温度为65℃，时间为3h，料液比为1：9。按此工艺虾油的提取率为19.60%。第二部分：无水乙醇提取物成分分析对使用优化工艺提取的南极磷虾油脂的丙酮不溶物、乙醚不溶物、磷脂、虾青素含量进行检测，并利用担气相分析提取物中的脂肪酸组成，气相分析，发现无水乙醇提取物中含有比较丰富的多不饱和脂肪酸。提取物中共检测出21种脂肪酸，其中饱和脂肪酸5中，共占总含量33.32%，不饱和脂肪酸成分16种，占总含量的66.43%。；主要脂肪酸种类包括棕榈酸（21.3%）、油酸（13.3%）、十四酸（10.11%）、二十二碳六烯酸（11.6%）、二十碳五烯酸（15.0%）、十六烯酸（5.54%）、亚油酸（2.67%）、亚麻酸（1.38%）。油脂样品中不饱和脂肪酸含量较高，具有一定的营养价值。第三部分：南极磷虾油对小鼠酒精性脂肪肝模型作用的研究以高脂饲料加乙醇灌胃30d造成小鼠酒精性脂肪肝模型后，分为南极磷虾油低、中、高剂量组，正常组和自然恢组5组，连续给药10d后，检测相关生化和病理指标。结果，南极磷虾油组与自然恢复组相比，血清中的三酰甘油（TG）和胆固醇(TC)、谷草转氨酶（AST）以及谷丙转氨酶（ALT）水平有显著改善(P<0.01或P<0.05);肝组织中的三酰甘油(TG)和胆固醇（TC）含量显著降低(P<0.01或P<0.05)，冷冻切片脂肪染色结果显示南极磷虾油剂量组肝细胞脂滴蓄积明显减少，脂肪变程度减轻。结论在本研究条件下，南极磷虾油对小鼠酒精性脂肪肝有治疗作用。

全文目录

摘要  5-7
Abstract  7-14
第一章前言  14-29
  1. 南极磷虾综述  14-27
    1.1 南极磷虾小百科  14-17
      1.1.1 生物分类学地位  14
      1.1.2 南极磷虾的生物学特点  14-15
      1.1.3 南极磷虾的生殖周期  15
      1.1.4 资源分布  15-17
    1.2 南极磷虾营养价值分析  17
    1.3 油脂研究概况  17-25
      1.3.1 油脂提取概况  17-22
        1.3.1.1 物理机械压榨法  17-18
        1.3.1.2 水代油法  18
        1.3.1.3 碱水解法  18
        1.3.1.4 溶解度法  18
        1.3.1.5 酶解法  18-19
        1.3.1.6 超声波提油法  19-20
        1.3.1.7 有机溶剂提取法  20
        1.3.1.8 SFE--超临界流体萃取技术  20-22
        1.3.1.9 各种油脂提取法比较  22
      1.3.2 南极磷虾油脂研究进展  22-24
      1.3.3 虾青素  24-25
    1.4 南极磷虾开发现状  25-26
    1.5 南我国极磷虾的开发社会和经济意义重大  26-27
  2 课题研究的社会背景，研究内容及创新点  27-29
    2.1 课题的研究背景及其重要社会经济意义  27-28
    2.2 课题所研究的内容简介  28
    2.3 本课题所具有的创新点  28-29
第二章南极磷虾油脂的提取工艺探究  29-39
  1 材料与仪器  29-30
    1.1 实验材料  29
    1.2 实验仪器  29-30
    1.3 实验药品  30
  2 实验方法  30-33
    2.1 水分测定  30-31
    2.2 粗脂测定  31-32
    2.3 溶剂法提取  32-33
      2.3.1 有机溶剂的提取工艺流程  32-33
      2.3.2 提取设计方案  33
      2.3.3 提取率计算  33
  3 实验结果与分析  33-38
    3.1 水分测定  33-34
    3.2 粗脂测定  34
    3.3 溶剂法提取工艺探讨与优化  34-38
      3.3.1 不同提取试剂对提取效果的影响  34-35
      3.3.2 提取过程不同温度对提取效果的影响  35
      3.3.3 提取时间长短的设定对提取效果的影响  35-36
      3.3.4 料液比的设定不同对提取效果的影响  36-37
      3.3.5 正交实验  37-38
  4. 小结  38-39
第三章溶剂法提取物成分分析  39-47
  1. 材料与设备  39-40
    1.1 实验仪器  39
    1.2 实验试剂  39-40
  2. 实验方法  40-42
    2.1 油脂中丙酮不溶物检验方法  40
    2.2 油脂中乙醚不溶物的检测  40-41
    2.3 测定提取油脂中虾青素含量  41
    2.4 磷脂含量测定  41-42
    2.5 虾油酸价、皂化值、过氧化值、蛋白含量和氟含量的测定  42
    2.6 脂肪酸成分分析  42
  3 结果与分析讨论  42-46
    3.1 丙酮不溶物测定  42
    3.2 乙醚不溶物测定  42
    3.3 虾青素含量测定  42-43
    3.4 磷脂含量测定  43-44
      3.4.1 标准曲线的绘制  43
      3.4.2 磷脂含量测定  43-44
    3.5 虾油酸价、皂化值、过氧化值、蛋白含量与氟含量的测定  44-45
    3.6 脂肪酸组分分析  45-46
  4 小结  46-47
第四章南极磷虾油对小鼠酒精性脂肪肝模型作用研究  47-58
  1 材料与设备  47-49
    1.1 实验材料  47
    1.2 实验仪器  47-48
    1.3 材料与试剂  48-49
  2 实验方法  49-51
    2.1 南极磷虾油的制备  49
    2.2 高脂饲料配制  49
    2.3 动物模型建立  49
    2.4 南极磷虾油缓解小鼠酒精性脂肪肝的灌喂方法  49-51
    2.5 数据分析  51
  3 实验结果  51-56
    3.1 小鼠酒精性肝损伤模型的建立  51-52
    3.2 南极磷虾油对小鼠酒精性脂肪肝模型的作用  52-56
      3.2.1 南极磷虾油对实验小鼠血清 TG、TC 含量的影响  52-53
      3.2.2 南极磷虾油对实验小鼠血清 ALT、AST 活性的影响  53-54
      3.2.3 南极磷虾油对小鼠肝脏 TG、TC 的影响  54-55
      3.2.4 肝脏组织冷冻切片脂肪染色结果  55-56
  4 讨论与小结  56-58
参考文献  58-63
致谢  63-64
硕士研究生期间发表的学术论文与研究成果  64

南极磷虾油脂提取、分析及其对小鼠酒精性脂肪肝模型作用研究

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