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性类固醇激素及温度对胡子鲇性分化的影响

作　者: 王文达
导　师: 李广丽; 朱春华
学　校: 广东海洋大学
专　业: 海洋生物学
关键词: 胡子鲇性分化 17β-雌二醇 17α-甲基睾酮 Foxl2
分类号: S917.4
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
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内容摘要

胡子鲇是我国南方大面积养殖的淡水经济鱼类，其适应性强，营养价值高，肉质细嫩具有重要的经济价值。但胡子鲇达到上市规格时，雌性胡子鲇正处于性腺发育阶段，腹部膨大，其生殖腺占体重的比例远高于雄性，导致雌鱼价格低于同等规格的雄鱼。因此，单雄或高比例雄性胡子鲇的养殖可以有效地加快群体生长速度，提高产量及经济效益。本实验采用组织学方法对胡子鲇性腺分化进行研究，旨在掌握其性腺分化规律，为诱导性分化研究提供依据；用17α-甲基睾酮（17α-MT）、17β-雌二醇（17β-E₂）和温度（24℃、28℃、32℃）处理2日龄胡子鲇一个月，观察其对生长、成活率、雄性率、性腺分化和Foxl2表达的影响，为胡子鲇的单性育种提供一条新途径。其结果如下:1.胡子鲇性腺分化的研究早期性腺分化的形态特征明显不同，从性腺分化开始，未来发育为卵巢的性腺横切面变宽，呈梨状，体积快速增大；而未来发育为精巢的性腺前端尖，中间稍突，后端呈细长的柄状，增生不明显。此外，胡子鲇卵巢分化时间明显早于精巢。水温（26±1）℃时，卵巢分化最早开始于出膜后16日龄，其标志为卵巢腔的出现。出膜后18日龄，卵原细胞开始通过有丝分裂快速增殖，出膜后22日龄，进入成熟分裂阶段。精巢分化最早开始于出膜后30日龄，标志为精小叶和输精管的形成。出膜后30日龄，精原细胞开始大量增殖，成熟分裂最早发生于出膜后40日龄。2.17α-MT对胡子鲇幼鱼生长发育及性分化的影响17α-MT低（50μg/L）、中浓度（100μg/L）浸浴处理2日龄胡子鲇幼鱼30d，对其成活率及生长无影响，高浓度（200μg/L）17α-MT抑制其生长发育（P<0.05），但对成活率无影响；17α-MT低浓度诱导产生雄性率为54%，与对照组无显著差异（P>0.05），而17α-MT中、高浓度诱导产生雄性率分别为70%和76%，显著高于对照组（P<0.05）；17α-MT中、高浓度组，胡子鲇卵巢腔出现分别推迟4d和6d，初级卵母细胞出现分别推迟8d和9d，初级精母细胞出现分别提前3d和5d，17α-MT（100μg/L～200μg/L）抑制其卵巢发育，促进精巢发育，并且高浓度17α-MT抑制胡子鲇Foxl2表达。3.17β-E₂对胡子鲇幼鱼生长发育及性分化的影响17β-E₂低（100μg/g）、中浓度（200μg/g）投喂处理2日龄胡子鲇幼鱼30d，对其成活率及生长无影响，高浓度（300μg/g）17β-E₂抑制其生长发育（P<0.05），但对成活率无影响；17β-E₂低浓度诱导产生雌性率为66%，与对照组无显著性差异（P>0.05）。而17β-E₂中、高浓度组诱导产生雌性率分别为74%、78%，显著高于对照组（P<0.05）；17β-E₂中、高浓度组，胡子鲇卵巢腔出现分别提前2d和3d，初级卵母细胞出现分别提前1d和3d，初级精母细胞出现分别推迟3d和7d，17β-E₂（200μg/g～300μg/g）促进卵巢发育，抑制精巢发育，并且高浓度17β-E₂增强胡子鲇Foxl2表达。4.温度对胡子鲇幼鱼生长发育及性分化的影响24℃、28℃处理2日龄胡子鲇幼鱼30d，对其生长和死亡率无影响，32℃时，胡子鲇幼鱼生长加快（P<0.05），但成活率明显低于对照组（P<0.05）；24℃时，诱导产生雄性率为55%，与对照组无显著差异，28℃和32℃时，诱导产生雄性率分别为66%和80%，显著高于对照组（P<0.05），32℃实验组，胡子鲇卵巢腔、初级卵母细胞和初级精母细胞的出现均提前2d，高温促进其性腺发育。

全文目录

摘要  6-8
Abstract  8-13
1 前言  13-20
  1.1 鱼类的性腺类型及其分化  13-15
    1.1.1 鱼类的性腺类型  13-14
    1.1.2 鱼类的性腺分化  14-15
  1.2 鱼类遗传型性别决定  15-17
    1.2.1 Dmart1 基因  16
    1.2.2 Foxl2 基因  16
    1.2.3 Cyp19a 基因  16-17
  1.3 鱼类环境性别决定  17-19
    1.3.1 外源激素对鱼类性别的影响  17-18
    1.3.2 温度对鱼类性别的影响  18-19
  1.4 本实验研究目的及意义  19-20
2 胡子鲇性腺分化的研究  20-27
  2.1 材料与方法  20-21
    2.1.1 实验材料  20
    2.1.2 饲养条件  20
    2.1.3 实验仪器及工具  20
    2.1.4 所用试剂及配制  20-21
    2.1.5 材料的收集与实验步骤  21
  2.2 结果  21-24
    2.2.1 胡子鲇早期性腺的发生与分化  21
    2.2.2 胡子鲇卵巢的分化  21-23
    2.2.3 胡子鲇精巢的分化  23-24
  2.3 讨论  24-27
    2.3.1 胡子鲇早期性腺的发生与分化  24-25
    2.3.2 卵巢腔的形成方式  25
    2.3.3 胡子鲇性腺细胞学上的分化  25
    2.3.4 胡子鲇性腺分化的时间  25-27
3 17α-MT 对胡子鲇幼鱼生长发育及性腺分化的影响  27-38
  3.1 材料与方法  27-30
    3.1.1 实验材料  27
    3.1.2 饲养条件  27
    3.1.3 实验仪器及工具  27
    3.1.4 所用试剂及配制  27-28
    3.1.5 实验方案  28-29
    3.1.6 数据分析  29-30
  3.2 结果  30-36
    3.2.1 17α-MT 对胡子鲇幼鱼生长发育的影响  30-31
    3.2.2 17α-MT 对胡子鲇幼鱼性腺分化的影响  31-34
    3.2.3 17α-MT 对胡子鲇性比的影响  34
    3.2.4 胡子鲇 Foxl2 基因片段 cDNA 克隆  34-35
    3.2.5 17α-MT 对胡子鲇 Foxl2 表达的影响  35-36
  3.3 讨论  36-38
    3.3.1 17α-MT 对胡子鲇幼鱼生长发育的影响  36-37
    3.3.2 17α-MT 对胡子鲇幼鱼性别分化的影响  37
    3.3.3 17α-MT 对胡子鲇性比的影响  37-38
    3.3.4 17α-MT 对胡子鲇 Foxl2 表达的影响  38
4 17β-E_2对胡子鲇幼鱼生长发育及性腺分化的影响  38-48
  4.1 材料与方法  39
    4.1.1 实验材料  39
    4.1.2 饲养条件  39
    4.1.3 实验仪器及工具  39
    4.1.4 所用试剂及配制  39
    4.1.5 实验方案  39
    4.1.6 数据分析  39
  4.2 结果  39-44
    4.2.1 17β-E_2对胡子鲇幼鱼生长发育的影响  39-41
    4.2.2 17β- E_2对胡子鲇幼鱼性腺分化的影响  41-43
    4.2.3 17β- E_2对胡子鲇性比的影响  43-44
    4.2.4 17β- E_2对胡子鲇 Foxl2 表达的影响  44
  4.3 讨论  44-48
    4.3.1 17β- E_2对胡子鲇幼鱼生长发育的影响  44-45
    4.3.2 17β- E_2对胡子鲇幼鱼性腺分化的影响  45
    4.3.3 17β- E_2对胡子鲇性比的影响  45-48
5 温度对胡子鲇幼鱼生长发育及性腺分化的影响  48-55
  5.1 材料与方法  48
    5.1.1 实验材料  48
    5.1.2 饲养条件  48
    5.1.3 实验仪器及工具  48
    5.1.4 所用试剂及配制  48
    5.1.5 实验方案  48
    5.1.6 数据分析  48
  5.2 实验结果  48-52
    5.2.1 温度对胡子鲇幼鱼生长发育的影响  48-50
    5.2.2 温度对胡子鲇幼鱼性腺分化的影响  50-52
    5.2.3 温度对胡子鲇性比的影响  52
  5.3 讨论  52-55
    5.3.1 温度对胡子鲇幼鱼生长发育的影响  52-53
    5.3.2 温度对胡子鲇幼鱼性别分化的影响  53-55
6 结论  55-56
参考文献  56-68
致谢  68-69
作者简介  69-70
导师简介  70

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