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贝达变异株系耐盐性鉴定及耐盐基因的RAPD标记

作　者: 李伟
导　师: 陈佰鸿
学　校: 甘肃农业大学
专　业: 果树学
关键词: 葡萄耐盐性生理指标 RAPD 标记
分类号: S663.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
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内容摘要

我国西北地区葡萄种植面积较广，但该区冬季干燥严寒，且土壤盐渍化程度较高，严重阻碍了葡萄产业的发展，因此选育抗冻耐盐的砧木和品种是一个亟待解决的问题。本研究以45个贝达葡萄变异株系(编号‘1’～‘45’)和4个砧木品种‘(贝达’、‘SO4’、‘山河系’、‘5BB’)一年生成熟枝条为试材，研究了它们在0.1%NaCl溶液间隔7天5次处理后的盐害指数、电导率、以及游离脯氨酸、丙二醛、叶绿素含量的变化，并通过聚类分析、相关分析对其耐盐性进行综合评价，并对材料进行RAPD 标记取得了下列研究结果：1.在NaCl终浓度达到0.578%时，在45个贝达变异株系中有2个株系（‘43’、‘16’）仍能较好的生长，耐盐性最好。2.随着NaCl处理次数的增加，各品种的叶绿素含量呈逐渐降低的趋势，而叶片的电导率、游离脯氨酸、丙二醛含量却逐渐升高，并且各品种和株系升降的速度和幅度有明显差异，其中‘贝达’和‘SO4’升降最快、幅度最大，贝达变异株系‘43’和‘16’升降最慢、幅度最小。说明葡萄叶片的盐害指数、相对电导率、MDA含量以及叶绿素含量的变化可以作为评价葡萄耐盐性的鉴定指标。3.在初选的6个材料和4个砧木品种中，各项指标的升降幅度大小顺序与其耐盐性强弱顺序一致，其耐盐性由强到弱依次为‘43’>‘16’>‘5BB’>‘42’>‘32’>‘36’>‘23’>‘山河系’>‘SO4’>‘贝达’。4.通过聚类分析将供试材料分成了三类，耐盐性强的为‘43’、‘16’、‘5BB’、‘36’、‘42’、‘32’；耐盐性中等的为‘1’、‘2’、‘3’、‘5’、‘7’、‘8’、‘13’、‘15’、‘17’、‘21’、‘22’、‘23’、‘24’、‘29’、‘31’、‘33’、‘35’、‘37’、‘38’、‘39’、‘41’；而对盐分比较敏感的为‘贝达’、‘SO4’、‘山河系’。5.通过RAPD标记筛选结果表明，引物OPR15在耐盐性强的株系（‘43’、‘16’‘、5BB’、‘32’、‘42’）中都扩增出了一条1400bp的条带，有可能作为葡萄耐盐辅助选择的分子标记。

全文目录

缩略词  2-3
摘要  3-4
Summary  4-5
目录  5-7
前言  7-9
第一章文献综述  9-22
  1 葡萄砧木的研究进展  9-12
    1.1 国外砧木的研究现状  9
    1.2 国内砧木的研究利用概况  9-11
    1.3 葡萄砧木对接穗生长发育影响的研究进展  11-12
      1.3.1 葡萄砧木对接穗营养生长的影响  11-12
      1.3.2 葡萄砧木对接穗果实产量的影响  12
      1.3.3 葡萄砧木对接穗品种果实品质及葡萄酒品质的影响  12
  2 果树耐盐性研究进展  12-18
    2.1 盐碱土成分及形成原因  13
    2.2 关于盐害机理及耐盐机制的研究  13-15
      2.2.1 盐害机理  13
      2.2.2 耐盐机制  13-15
    2.3 果树耐盐力研究  15-16
    2.4 葡萄砧木的耐盐性研究  16-18
  3 分子标记在葡萄育种上的应用  18-21
    3.1 构建遗传图谱  18-19
    3.2 种质资源研究  19
    3.3 基因定位与分子标记辅助选择  19-21
  4 本试验研究技术路线  21-22
第二章贝达抗寒耐盐株系的筛选与评价  22-35
  1 材料与方法  22-23
    1.1 材料  22
    1.2 方法  22-23
      1.2.1 扦插育苗  22
      1.2.2 NaCl 处理  22
      1.2.3 指标测定  22-23
      1.2.4 数据处理  23
  2 结果与分析  23-32
    2.1 NaCl 处理后蛭石的含盐量变化  23
    2.2 NaCl 胁迫下葡萄砧木的盐害指数  23-24
    2.3 NaCl 胁迫对葡萄砧木相对电导率和 MDA 的影响  24-28
      2.3.1 相对电导率  24-26
      2.3.2 MDA 含量  26-28
    2.4 游离脯氨酸含量  28-29
    2.5 NaCl 胁迫对葡萄砧木叶片中叶绿素含量的影响  29-31
    2.6 各项指标相关系数矩阵  31
    2.7 砧木耐盐性分类  31-32
  3 讨论  32-35
第三章贝达变异株系耐盐基因的 RAPD 标记  35-42
  1 材料与方法  35-37
    1.1 材料  35
      1.1.1 葡萄材料  35
      1.1.2 试剂  35
    1.2 方法  35-37
      1.2.1 基因组 DNA 的提取  35-36
      1.2.2 DNA 质量检测  36-37
      1.2.3 RAPD 反应体系优化  37
      1.2.4 RAPD 引物多态性筛选  37
      1.2.5 所选具多态性引物在各葡萄株系的检测  37
  2 结果分析  37-40
    2.1 葡萄基因组 DNA 的提取  37-38
    2.2 SSR 扩增反应体系和程序  38-39
    2.3 RAPD 引物的初筛  39
    2.4 RAPD 引物在耐盐和不耐盐株系上的筛选  39-40
    2.5 多态性引物在各株系间的检测  40
  3 讨论  40-42
第四章结论  42-43
参考文献  43-51
附录 1：主要试剂及溶液(缓冲液)配制  51-52
附录 2：附图  52-54
致谢  54-55
导师简介  55-56
作者简介  56-57

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