食物变应原。花生过敏反应因其潜在的危险性、长期慢性反应以及不断增加的发病率而日益受到重视。花生过敏反应可发生在各个年龄段,轻可出现口腔粘膜过敏、皮肤荨麻疹等,重可出现危及生命的严重咽喉水肿、急性哮喘、过敏性休克,甚至导致死亡。目前研究已初" />
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花生变应原研究

作 者: 李宏
导 师: 张宏誉
学 校: 中国协和医科大学
专 业: 内科免疫
关键词: 花生仁 食物 过敏原 协和 过敏性 变态反应 学位 抗原 蛋白质 聚丙烯酰胺
分类号: R593.2
类 型: 博士论文
年 份: 2000年
下 载: 159次
引 用: 3次
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内容摘要


花生是重要的学位论文">食物变应原。花生过敏反应因其潜在的危险性、长期慢性反应以及不断增加的发病率而日益受到重视。花生过敏反应可发生在各个年龄段,轻可出现口腔粘膜过敏、皮肤荨麻疹等,重可出现危及生命的严重咽喉水肿、急性哮喘、过敏性休克,甚至导致死亡。目前研究已初步证明花生是由多组份变应原组成,对其中少数主要变应原的理化特性及免疫学特征也有一定的认识。但距完全了解花生变应原中各个致敏组份还相差很多。 本研究利用PBS溶液,提取去脂花生,经膜包分子筛和冷冻干燥等技术,得到花生变应原。从门诊病人中收集典型的花生过敏病人20例。花生过敏诊断主要结合典型的食物过敏病史,皮肤点刺试验阳性以及RAST FEIA测出的特异性IgE重度升高,个别病例辅以食物激发试验加以确诊。利用其中8例花生高度过敏病人血清组成的血清池,采用带有质控保证的Pharmacia CAP System进行了花生变应原的RAST inhibition试验,结果显示生花生和熟花生(以烤花生为例)抗原二者产生的RAST inhibition线的斜率分别为0.53和0.51,t检验P>0.05,两者达到50% inhibition所需的抗原量分别为33.9μg和30.2μg,熟花生抗原强度稍高于生花生,加热也许有利于增强花生抗原与IgE的结合。但总体而言,生花生和烤花生二者的抗原性效价无显著差异,是基本接近一致的。 同时还对花生变应原进行了聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和免疫印迹(Immuno-blot)分析。实验结果:SDS-PAGE表明,花生变应原至少含有14条蛋白区带,其中以63kd、41.7kd、39kd、34.8kd、和17.9kd等5条带蛋白含量最丰富。免疫印迹显示:花生变应原中有

全文目录


论文部分  5-71
  前言  5-7
  中文摘要  7-9
  英文摘要  9-12
  第一部分 花生变应原抗原性及致敏组份分析  12-32
    临床资料收集  13-15
    抗原制备  15-17
    RAST抑制试验  17-22
    聚丙烯酰胺凝胶电泳及免疫印迹  22-32
  第二部分 花生变应原Ara h1的基因克隆与原核表达  32-57
    实验原理  33-34
    实验材料  34-40
    实验方法  40-51
      花生总RNA的提取  40
      RT-PCR  40-41
      PCR扩增Ara h1目的基因片段  41-43
      PCR回收产物Ara h1与pGEM-T easy Vector的连接  43-46
      Ara h1基因导入pGEM-11Z载体  46-47
      Ara h1基因转入原核表达载体pRSET-B  47-48
      Ara h1蛋白的诱导表达与纯化  48-50
      聚丙烯酰胺凝胶电泳及免疫印迹检测  50-51
    实验结果  51-57
  讨论  57-62
  小结  62-63
  参考文献  63-67
  英文缩写词  67-69
  附图表  69-71
综述部分  71-93
  综述  71-86
  参考文献  86-93
致谢  93

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中图分类: > 医药、卫生 > 内科学 > 全身性疾病 > 免疫性疾病 > 自身免疫性疾病、结缔组织疾病
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