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加味四逆散治疗大鼠溃疡性结肠炎的分子机制研究

作　者: 郭晓东
导　师: 关庆增
学　校: 北京中医药大学
专　业: 中医临床基础
关键词: 加味四逆散 肝郁 气机不调 溃疡性结肠炎 细胞因子 自由基损伤 粘附分子
分类号: R259.7
类　型: 博士论文
年　份: 2004年
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内容摘要


溃疡性结肠炎(Ulcerative colitis,UC),是一种原因不明的慢性非特异性炎症性肠病。主要临床表现为腹泻伴脓血便、腹痛和里急后重。结肠粘膜的炎症及溃疡是其主要病理特点。本文为探讨加味四逆散治疗 UC 的作用机制,分上下两篇对 UC 和四逆散进行了理论与实验研究。理论研究包括:1.现代医学对 UC 的研究现状 对现代医学对 UC 的发病机理、临床治疗和动物模型研究概况进行了全面综述。尤其是对目前现代医学比较公认的免疫学发病机制进行了重点阐述,基本理清了现代医学对 UC 研究的轮廓。2.中医学对 UC 的研究现状 对中医学关于 UC 的病名的认识、病因病机的认识、治疗现状及实验研究概况进行了全面综述。并根据 UC 的主要临床表现,经严密剖析与推理,提出我们的观点:气机不调是 UC 的基本病机,贯穿 UC 的始终。3.四逆散的研究现状 系统阐述了有关四逆散方证的理论争鸣、组方涵义、临床应用规律及实验研究概况。并得出结论:其调理气机之功用与 UC 的基本病机吻合。实验研究包括:1.方法 将健康雄性 Wisater 大白鼠随机分成六组,即正常对照组、模型组、加味四逆散大剂量组、加味四逆散中剂量组、加味四逆散小剂量组、柳氮磺胺吡啶组。采用 TNBS/乙醇溶液(100mg/kgTNBS+50%的乙醇 0.25ml)灌肠复加束缚法造模。按人与动物等效剂量,分别对各组大鼠进行中、西药及生理盐水灌胃,每日一次,连续三周。第 3 周末处死大鼠,采集血液与结肠组织标本。然后对下列项目进行观测:(1)处死动物前肉眼观察各组动物的一般状态。(2)光学显微镜 HE 染色法观察结肠粘膜组织的病理形态学改变。(3) 测定结肠粘膜组织髓过氧化物酶(MPO)、超氧化物岐化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的含量。(4)测定血清 IL-4、IL-10、TXB2、6-Keto-PGF1α 的水平。(5)RT-PCR 法检测结肠组织 ICAM-1mRNA。实验数据经 spss11.0 软件处理,进行 one-way 方差分析。2.结果 一般状态 :正常组大鼠明显优于模型组大鼠,治疗组用药3周后能明显改善模型组大鼠的状态。 光镜观察:正常组结肠各层结构清晰,无炎性改变。模型组结肠粘膜炎症显著,重者有严重溃疡形成。各治疗组炎症程度均有改善。 MPO 含量:模型组 MPO 含量明显升高,与正常组比较有显著性差异(p<0.01)。<WP=5>2 加味四逆散治疗大鼠溃疡性结肠炎的分子机制研究加味四逆散各组 MPO 含量明显低于模型组(p<0.01)。 MDA 与 SOD 含量:加味四逆散各组 MDA 含量明显低于模型组(p<0.01)。加味四逆散各组 SOD 含量明显高于模型组(p<0.01)。 TXB2、6-Keto-PGF1α 的含量:加味四逆散各组 TXB2 含量明显低于模型组(p<0.05)。加味四逆散各组 6-Keto-PGF-1α 含量明显高于模型组(p<0.05)。 IL-4、IL-10 含量:加味四逆散各组 IL-4、IL-10 含量明显高于模型组(p<0.05)。 在以上实验中,加味四逆散中剂量组疗效最佳,且往往优于 SASP 组。 ICAM-1mRNA 的表达:加味四逆散大剂量组 ICAM-1mRNA 的表达明显低于模型组。而加味四逆散中、小剂量组 ICAM-1mRNA 的表达与模型组无明显区别。3.结论 采用 TNBS/乙醇溶液(100mg/kgTNBS+50%的乙醇 0.25ml)灌肠外加束缚法复制 UC 肝郁大鼠模型成功,完全符合实验要求。 以调理气机为主要功用的加味四逆散对 UC 有肯定疗效,进而说明气机不调是UC 发病的基本病机之一,且其疗效的产生与该方能对抗自由基损伤(上调 SOD 及下调 MDA)、改善肠粘膜的血液循环(降低 TXB2、提高 6-Keto-PGF1α)、上调抑炎性细胞因子 IL-4 和 IL-10 并下调细胞间粘附分子 1(ICAM-1)的表达有关。因而开拓了中医治疗 UC 的新思路并明确了加味四逆散治疗 UC 的部分作用机制。

全文目录


中文摘要  4-6
英文摘要  6-8
英文缩略词  8-9
上篇 理论研究  9-52
  综述一 中医学对溃疡性结肠炎的研究现状  9-23
    1 中医学对溃疡性结肠炎的称谓  9
    2 中医学对溃疡性结肠炎病因病机的认识  9-12
    3 中医学对溃疡性结肠炎的治疗现状  12-16
    4 中医学对溃疡性结肠炎的实验研究现状  16-19
    参考文献  19-23
  综述二 西医学对溃疡性结肠炎的研究现状  23-41
    1 发病机制研究进展  23-31
    2 药物治疗研究进展  31-33
    3 动物模型研究进展  33-36
    参考文献  36-41
  综述三 四逆散的研究现状  41-52
    1 四逆散方证的理论探讨  41-43
    2 四逆散临床应用概况  43-45
    3 四逆散的实验研究概况  45-49
    参考文献  49-52
下篇 实验研究  52-83
  前 言  52-54
  实验一 加味四逆散对溃疡性结肠炎肝郁大鼠模型一般状态及结肠组织病理形态学的影响  54-60
    材料和方法  54-55
    结 果  55-56
    讨 论  56-58
    参考文献  58-60
  实验二 加味四逆散对溃疡性结肠炎肝郁大鼠模型结肠组织髓过氧化物酶含量的影响  60-63
    材料和方法  60-61
    结 果  61-62
    讨 论  62
    参考文献  62-63
  实验三 加味四逆散对溃疡性结肠炎肝郁大鼠模型氧自由基损伤的影响  63-68
    材料和方法  63-64
    结 果  64-66
    讨 论  66-67
    参考文献  67-68
  实验四 加味四逆散对溃疡性结肠炎肝郁大鼠模型血清中TXB2和6-Keto-PGF1α的影响  68-73
    材料和方法  68-69
    结 果  69-70
    讨 论  70-72
    参考文献  72-73
  实验五 加味四逆散对溃疡性结肠炎肝郁大鼠模型血清 IL-4、IL-10 的影响  73-78
    材料与方法  73-74
    结 果  74-75
    讨 论  75-76
    参考文献  76-78
  实验六 加味四逆散对溃疡性结肠炎肝郁大鼠模型结肠粘膜 ICAM-1mRNA 表达的影响  78-83
    材料与方法  78-80
    结 果  80-81
    讨 论  81-82
    参考文献  82-83
结 语  83-85
致谢  85-86
个人简历  86-87
附图  87-89

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中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中医内科 > 现代医学内科疾病
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