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汉赛巴尔通体感染长角血蜱后的体内分布及宿主SOD和CAT的活性变化

作　者: 李志芳
导　师: 张卫东；刘起勇
学　校: 郑州大学
专　业: 流行病与卫生统计学
关键词: 汉赛巴尔通体长角血蜱酶活性同工酶
分类号: R363
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

目的本研究以长角血蜱和汉赛巴尔通体为对象,对长角血蜱感染汉赛巴尔通体后的生化反应和生存状态进行较为系统的研究。从生物化学水平分析蜱媒对该病原体入侵的防御反应,并分析蜱媒与病原体间的相互适应结果。通过上述研究,试图为长角血蜱与汉赛巴尔通体的媒介关系提供实验室证据,同时也为探讨蜱媒对相关病原体的免疫应答机制提供线索。方法实验采用人工注射的方式将汉赛巴尔通体菌液悬浮液注射入长角血蜱成蜱血腔内,直接观察蜱感染汉赛巴尔通体后的存活情况；在染毒后不同时间内,测定血淋巴中超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)的活性及SOD的同工酶变化；对处理后不同时间蜱的血淋巴进行革兰染色以及其与蜱残体的分离培养,观察汉赛巴尔通体在蜱体内的存活情况,通过解剖分离感染不同时间的长角血蜱内脏,观察汉赛巴尔通体在蜱体内的动态变化。另外通过研究自然状态下几种蜱感染汉赛巴尔通体的流行情况了解该种菌的分布情况。结果1、在对长角血蜱处理后的不同时间内,注射汉赛巴尔通体组与注射生理盐水组蜱的死亡率没有统计学差异。2、长角血蜱在接种汉赛巴尔通体后,SOD和CAT活性相对于生理盐水均在一定时间内受到抑制,虽然两种酶的表现并不一致,但在48h时均与生理盐水没有差异,这说明在48h时汉赛巴尔通体对蜱的胁迫作用已与生理盐水无异,汉赛巴尔通体对蜱可能不会产生很大的伤害。SOD同工酶谱显示在不同的时段和组织内可能有不同的同工酶参与防御反应。3、在处理后96h内,对长角血蜱的血淋巴革兰染色,均为阳性,而血淋巴分离培养则未分离到巴尔通体。对处理后1h及24h蜱的匀浆接种均分离到汉赛巴尔通体,其他时间段未分离到。对感染后96h内蜱残体的PCR检测也全部显示阳性结果。解剖分离蜱唾液腺、中肠、卵巢及马氏管在9天内除个别外均有阳性条带。31天时汉赛巴尔通体在不同个体均有不同组织的阳性结果。4、对蜱自然种群中汉赛巴尔通体的PCR检测,汉赛巴尔通体在海南采集的微小牛蜱中带菌率较高,其中石家庄的长角血蜱中分离培养呈阳性。结论1、长角血蜱在受到汉赛巴尔通体的攻击之后,抗氧化酶的活性在一定时间内受到了抑制,在不同的组织中有不同的SOD同工酶参与反应。2、汉赛巴尔通体在进入长角血蜱的血腔中之后,可以存活一段时间,并且可以通过血腔进入蜱的唾液腺,中肠、马氏管等组织内。通过上述实验室和现场调查结果,提示长角血蜱有可能成为汉赛巴尔通体的潜在传播媒介。

全文目录

摘要  4-6
ABSTRACT  6-10
图和附表清单  10-11
英文缩略词  11-12
1 引言  12-16
2 方法  16-38
  2.1 材料  16-20
    2.1.1 研究对象  16
    2.1.2 主要试剂及配方  16-19
    2.1.3 主要仪器与设备  19-20
  2.2 研究方法  20-38
    2.2.1 长角血蜱感染汉赛巴尔通体后致死率观察  20-26
    2.2.2 主要防御酶活性的变化  26-32
    2.2.3 血淋巴内巴尔通体的存活情况  32-36
    2.2.4 蜱自然种群中汉赛巴尔通体的检测  36-38
3 结果  38-50
  3.1 长角血蜱感染汉赛巴尔通体后致死率观察  38-39
    3.1.1 实验动物及菌株的准备  38
    3.1.2 长角血蜱与ICR小鼠的病原检测  38
    3.1.3 长角血蜱感染汉赛巴尔通体模型  38
    3.1.4 长角血蜱感染汉赛巴尔通体后致死率观察  38-39
  3.2 主要防御酶活性的变化  39-46
    3.2.1 超氧化物歧化酶(SOD)活性测定结果  39-41
    3.2.2 过氧化氢酶(CAT)活性测定结果  41-45
    3.2.3 同工酶变化  45-46
  3.3 血淋巴内巴尔通体的存活情况  46-48
    3.3.1 血淋巴革兰染色  46
    3.3.2 血淋巴分离培养  46
    3.3.3 残体分离培养  46-47
    3.3.4 汉赛巴尔通体在蜱脏器内的存留情况  47-48
  3.4 蜱自然种群中汉赛巴尔通体的检测  48-50
4 讨论  50-58
5 结论  58-60
6 参考文献  60-63
综述  63-71
  1、传播媒介  63-64
  2、宿主  64-65
  3、在宿主中存在的状态  65
  4、传播途径  65
  5、人工感染  65-66
  6、合并感染  66-67
  结语  67-68
  参考文献  68-71
附录长角血蜱饲养图片  71-72
个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果  72-74
致谢  74

汉赛巴尔通体感染长角血蜱后的体内分布及宿主SOD和CAT的活性变化

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