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溃疡性结肠炎发病和激素耐药机制的研究
作 者: 马铭泽
导 师: 杨崇美
学 校: 山东大学
专 业: 内科学
关键词: 溃疡性结肠炎 食物过敏 免疫球蛋白G 多药耐药基因 激素耐药
分类号: R574.62
类 型: 硕士论文
年 份: 2011年
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内容摘要
目的1.探讨食物过敏在溃结发病中的作用;2.检测溃结患者接受糖皮质激素治疗前后结肠黏膜MDR1基因mRNA及P糖蛋白(P-gp)的表达,探讨溃结患者发生激素耐药的机制。方法1、初治溃结患者121例,健康对照47例,采用ELISA法检测溃结患者及健康对照者血清14种食物过敏原特异性IgG抗体及IgE抗体。将血清食物slgG检测阳性的溃结患者随机分为剔除slgG阳性食物的饮食控制组和不予剔除slgG阳性食物的非饮食控制组,两组患者均接受泼尼松(1mg/kg/d)和5-氨基水杨酸制剂的综合治疗,随访两个月比较两组患者疗效差异。2、溃疡性结肠炎患者在接受激素治疗前及治疗8周后均接受结肠镜检查并留取肠黏膜标本,采用免疫组织化学方法检测肠黏膜P糖蛋白(P-gp)的表达情况,采用逆转录-PCR方法检测肠黏膜MDR1基因nRNA表达水平,使用Leica QwinV3图像分析软件半定量分析PCR条带,计算MDR1/β2-MG密度比值反映MDR1-mRNA表达水平。比较激素治疗前后肠黏膜MDR1-mRNA和P-gp表达变化,以及治疗后激素敏感患者与激素耐药患者MDR1-mRNA和P-gp表达差异。结果1.血清食物特异性抗体IgG (SlgG) & IgE (SIgE)的检测结果及剔除致敏食物对疗效的影响:溃疡性结肠炎患者中79例出现SlgG阳性,总阳性率为65.29%(79/121);健康对照组仅8例食物SlgG阳性,总阳性率仅为17.02%(8/47)。二组比较差异有统计学意义(P<0.01)。溃疡性结肠炎患者中出现1种食物SlgG阳性率15.70%(19/121),2种食物SlgG阳性率25.62%(31/121),3种或3种以上食物SlgG阳性率为23.97%(29/121),即有49.59%的溃结患者同时有2种或2种以上食物SIgG阳性;而对照组仅出现1种食物SIgG阳性。溃疡性结肠炎患者组中有49例出现对至少一种食物过敏原slgE阳性,阳性率为40.50%(49/121);健康对照组只有2例出现slgE阳性反应,阳性率仅为4.26%(2/47)。治疗2个月后,饮食控制组患者总有效率高于非饮食控制组(P<0.05)。2.免疫组织化学染色结果:溃结患者激素治疗前肠黏膜P-gp的总阳性表达率为8.26%(10/121),健康对照者肠黏膜P-gp表达阳性率为43.33%(13/30),溃结患者激素治疗前P-gp的阳性表达率显著低于健康对照组(P<0.05)。治疗8周后P-gp的总阳性表达率为35.54%(43/121),激素治疗后溃结患者肠黏膜P-gp表达高于治疗前水平(P<0.05)。治疗8周后依据激素疗效分为激素敏感患者(n=85)和激素耐药患者(n=36),激素敏感患者中P-gp的阳性表达率为17.65%(15/85),激素耐药患者P-gp的阳性表达率为77.78%(28/36)。激素耐药患者P-gp表达率显著高于激素敏感患者(P<0.05)。3.逆转录-PCR反应结果:溃结患者激素治疗前肠黏膜MDR1-mRNA表达水平为0.12±0.03,健康对照者肠黏膜MDR1-mRNA表达水平为0.68±0.06。初治溃结患者激素治疗前MDR1-mRNA表达水平低于健康对照者,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗8周后溃结患者肠黏膜MDR1-mRNA表达平均水平为0.57±0.04,治疗后患者肠黏膜MDR1-mRNA表达高于治疗前水平(P<0.05)。治疗8周后激素敏感患者MDR1-mRNA表达水平为0.46±0.05,激素耐药患者MDR1-mRNA表达水平为0.89±0.03。激素耐药患者MDR1-mRNA表达水平显著高于激素敏感患者(P<0.05)。结论剔除溃结患者饮食中的致敏食物可提高药物治疗的效果,食物过敏因素可能在溃疡性结肠炎发病中发挥作用。溃疡性结肠炎患者肠黏膜P-gp表达下降与溃结发病有关。溃疡性结肠炎患者接受激素治疗后肠黏膜MDR1基因表达和P-gp表达水平升高,MDR1基因和P-gp表达水平升高可能是导致溃疡性结肠炎发生激素耐药的原因之一
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全文目录
中文摘要 6-8 ABSTRACT 8-12 符号说明 12-14 前言 14-17 材料与方法 17-26 1. 一般资料 17 2. 实验试剂 17-18 3. 实验设备和仪器 18 4. 实验方法 18-25 4.1 免疫组化染色 18-20 4.2 逆转录PCR反应 20-22 4.3 血清食物特异性抗体IgG和IgE的ELISA法检测 22-24 4.4 血清食物特异性抗体IgE(speeiifcIgE,slgE)的检测: 24-25 6. 统计学处理 25-26 结果 26-28 1. 26 1.1 食物过敏原特异性抗体IgG和IgE检测结果 26 1.2 食物过敏原特异性抗体1gE检测结果 26 1.3 依据slgG检测结果剔除致敏食物对临床疗效的影响 26 2. 免疫组织化学染色结果 26-27 3. 逆转录-PCR反应结果 27-28 讨论 28-40 结论 40-41 附图表 41-49 参考文献 49-55 致谢 55-56 攻读学位期间发表的学术论文 56-57 学位论文评阅及答辩情况表 57
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中图分类: > 医药、卫生 > 内科学 > 消化系及腹部疾病 > 肠疾病 > 大肠疾病 > 结肠疾病
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