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祛瘀解毒法对血瘀蕴毒型子宫内膜异位症卵泡液及颗粒细胞TNF-α、IL-6的研究
作 者: 李新玲
导 师: 连方
学 校: 山东中医药大学
专 业: 中医妇科学
关键词: 子宫内膜异位症 祛瘀解毒颗粒 卵泡液 颗粒细胞 NF-α IL-6
分类号: R271.9
类 型: 博士论文
年 份: 2008年
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内容摘要
目的:观察祛瘀解毒颗粒结合辅助生殖技术(ART)治疗血瘀蕴毒型子宫内膜异位症不孕的疗效并探讨其作用机理,试图开辟中医药治疗EM不孕的新思路,为临床有效治疗该病提供依据。方法:临床研究:60例子宫内膜异位症(EM)不孕患者随机分为治疗组和对照组,每组30例。治疗组有20例口服祛瘀解毒颗粒结合氯米芬(CC)促排卵+宫腔内人工授精(IUI);另外10例口服祛瘀解毒颗粒同时行IVF-ET。对照组有20例单纯给CC促排卵+IUI,另外10例行IVF-ET。观察治疗前后血瘀蕴毒证候积分变化、妊娠率、免疫及内分泌学相关指标、血清和卵泡液TNF-α、IL-6含量以及卵巢颗粒细胞TNF-αmRNA、IL-6mRNA的表达情况。实验研究一:40例EM模型大鼠随机分为试验组、观察组各20例,另取20只大鼠只牵拉子宫作为空白组。试验组每天给予祛瘀解毒颗粒溶于2ml生理盐水灌胃,观察组和空白组均给予2ml生理盐水,连续灌胃3周。末次给药后24h各组大鼠均给予人绝经后促性腺激素(HMG)50IU腹腔注射,48h后给予人绒毛膜促性腺激素(HCG)100IU/100g,14~16h后处死大鼠收集卵细胞及颗粒细胞团,观察优质卵细胞数目及优质卵细胞率,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测卵巢颗粒细胞TNF-αmRNA、IL-6mRNA表达。实验研究二:配制不同的培养液,对20只小鼠超排卵共收集189枚2-细胞鼠胚分别放入各组培养液进行培养。其中治疗组培养液为P-1胚胎培养液加10%SSS加10%治疗组EM患者卵泡液;对照组为培养液P-1胚胎培养液加10%SSS加10%对照组EM患者卵泡液;空白组培养液为P-1胚胎培养液加10%SSS加10%空白组人卵泡液。每日在显微镜下观察小鼠胚胎情况。结果:1.祛瘀解毒颗粒能够有效改善患者血瘀蕴毒证候,提高妊娠率,降低EMAb的阳性率及CA125水平,改善内分泌状态,降低患者血清及卵泡液TNF-α、IL-6的含量,降低卵巢颗粒细胞TNF-αmRNA、IL-6mRNA的表达,效果明显优于对照组(P<0.05)。2.试验组大鼠优质卵细胞数目、优质卵细胞率明显高于观察组(P<0.05),颗粒细胞TNF-αmRNA、IL-6mRNA表达明显低于观察组(P<0.05)。3.小鼠2-细胞胚胎在治疗组及空白组培养液中发育到8-细胞期、桑葚胚及囊胚及优质胚胎的比率均明显高于对照组(P<0.05)。结论:祛瘀解毒颗粒可以改善血瘀蕴毒症候,提高EM不孕患者妊娠率,是治疗血瘀蕴毒型子宫内膜异位症的有效药物。推测其作用机理可能与调节免疫功能,改善内分泌状态,降低卵泡液TNF-α、IL-6水平及颗粒细胞TNF-αmRNA、IL-6mRNA表达等有关,通过旁分泌或(和)自分泌方式直接或间接参与卵巢功能的局部调节,改善卵子生存的内环境,提高卵细胞质量,减少对胚胎的毒性作用,从而提高EM患者妊娠率。
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全文目录
提要 3-5 Abstract 5-10 引言 10-11 文献研究 11-19 一、现代医学对子宫内膜异位症不孕的研究进展 11-16 (一) 现代医学对子宫内膜异位症致不孕病因认识 11-14 (二) 现代医学对子宫内膜异位症致不孕治疗认识 14-16 二、中医学对子宫内膜异位症不孕的研究进展 16-19 (一) 中医对子宫内膜异位症病因病机认识 16-17 (二) 中医对子宫内膜异位症不孕治疗认识 17-19 临床研究 19-43 技术路线图 19-20 一、研究对象 20-23 (一) 病例来源 20 (二) 诊断标准 20-21 (三) 病例选择标准 21 (四) 症状分级量化评分标准 21-22 (五) 观察项目 22-23 二、研究方法 23-27 (一) 临床分组 23 (二) 药物、实验室设备及培养液 23-24 (三) 用药方法 24 (四) 标本的收集 24 (五) 颗粒细胞TNF-Α、IL-6MRNA 表达量的定量测定 24-27 (六) 统计学分析 27 三、一般资料 27-28 (一) 治疗组、对照组及空白组患者年龄(岁)分布比较(见表3) 27 (二) 治疗组与对照组患者病程(年)比较(见表4) 27 (三) 治疗组与对照组孕产史分布比较(见表5) 27-28 (四) 治疗组与对照组患者治疗前血瘀蕴毒证候积分比较(见表6) 28 (五) 治疗组与对照组治疗前基础内分泌的比较(见表7) 28 四、研究结果 28-32 (一) 治疗组与对照组患者治疗前后血瘀蕴毒证候积分变化比较(见表8) 28-29 (二) 治疗组与对照组妊娠率的比较(见表9) 29 (三) 治疗组与对照组氯米芬结合IUI 妊娠率的比较(见表10) 29-30 (四) 治疗组、对照组及空白组IVF 控制超促排卵结果(见表11) 30 (五) 治疗组与对照组治疗前后黄体期内分泌指标比较(表12) 30-31 (六) 治疗组与对照组治疗前后外周血EMAB 效价比较(表13) 31 (七) 治疗组与对照组治疗前后血清CA125、TNF-Α、IL-6 含量的比较(表14) 31 (八) 治疗组、对照组及空白组卵泡液TNF-Α、IL-6 的比较(表15) 31-32 (九) 治疗组、对照组及空白组颗粒细胞TNF-ΑMRNA、IL-6MRNA 表达的比较(表 16) 32 五、讨论 32-43 (一) 血瘀蕴毒病机的建立与子宫内膜异位症的关系 32-35 (二) 祛瘀解毒颗粒组成与应用基础 35-37 (三) 研究结果分析 37-43 实验研究 43-58 技术路线图 43-45 实验一 祛瘀解毒颗粒对子宫内膜异位症模型大鼠卵巢颗粒细胞TNF-ΑMRNA、 IL-6MRNA 表达的影响 45-53 一、材料与方法 45-49 (一) 药物与试剂 45-46 (二) 实验仪器与设备 46 (三) 引物设计与合成 46-47 (四) 实验动物 47 (五) 实验方法 47-49 二、实验结果 49-51 (一) 祛瘀解毒颗粒对EM 大鼠优质卵数以及优质卵率的影响(见表18) 49-50 (二) 祛瘀解毒颗粒对EM 大鼠颗粒细胞TNF-ΑMRNA 表达的影响(见表19) 50 (三) 祛瘀解毒颗粒对EM 大鼠颗粒细胞IL-6MRNA 表达的影响(见表20) 50-51 三、讨论 51-53 (一) EM 模型大鼠优质卵细胞数目和优质卵细胞率分析 51-52 (二) EM 模型大鼠卵巢颗粒细胞TNF-Α、IL-6 分析 52-53 实验二 子宫内膜异位症患者卵泡液对小鼠胚胎发育影响的研究 53-58 一、材料与方法 53-55 (一) 实验动物 53 (二) 药物与试剂 53 (三) 实验仪器与设备 53 (四) 实验方法 53-54 (五) 统计学分析 54-55 二、实验结果 55 (一) 早期鼠胚在三种培养液中发育情况比较(见表21) 55 (二) 早期鼠胚优质胚胎数目及优质胚胎率的比较(见表22) 55 三、讨论 55-58 (一) EM 患者卵泡液对早期鼠胚体外培养的影响 56 (二) 祛瘀解毒颗粒治疗后EM 患者卵泡液对早期鼠胚体外培养的影响 56-58 结语 58-59 参考文献 59-67 附录 67-71 致谢 71-72 查新报告 72-80
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中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中医妇产科 > 现代医学妇产科疾病
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