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负重游泳运动对大鼠肾细胞凋亡和调控因素的影响

作　者: 李晟玮
导　师: 张一民
学　校: 北京体育大学
专　业: 运动人体科学
关键词: 细胞凋亡 负重游泳运动 肾小管细胞凋亡率 肾小球细胞凋亡率 bcl-2 Bax 血清睾酮 皮质酮 T/C 血清CK 血尿素
分类号: G861.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2006年
下　载: 177次
引　用: 2次
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内容摘要


研究目的负荷运动会诱导细胞凋亡发生,细胞凋亡是否随激素水平下降而变化,通过对长时间负重游泳运动中大鼠肾小管和肾小球细胞凋亡情况的跟踪调查,寻找激素水平下降与AI之间的可能关系,探讨影响凋亡变化的因素。研究方法负重游泳动物模型为6周龄雄性SD大鼠,体重180～220克,通过负重百分比变化改变运动负荷。持续运动10周。采用TUNEL染色确定AI,免疫组织化学技术测定组织Bcl-2和Bax蛋白阳性表达,通过计算机图像进行细胞半定量分析,检测阳性染色的平均光密度(MOD)、阳性表达面积率与阳性细胞百分比,计算蛋白阳性表达指数(PEI%)。采用RIA测T和C。肌酸显色法测CK。二乙酰-肟显色法测BUN。数据处理为常规统计法:数据统计由SPSS完成,采用均数比较中的单因素方差分析模型,组间检验采用t检验,AI与调控因素的相关分析采用Pearson积矩相关系数。结果相同负荷量和强度TAI、GAI却不同;TAI、GAI均伴随负荷强度和负荷量的变化而相应变化。负荷强度越大,AI越高,伴随负荷强度增大,TAI增加38.3%、GAI增加57.1%;运动量越大,AI越高,伴随负荷量增大,TAI增加91.3%、GAI增加93.1%。长时间负重游泳运动中,负荷量和负荷强度不同,肾小管和肾小球细胞Bcl-2和Bax蛋白表达也不同;长时间负重游泳运动会出现T下降、C升高、T/C比值下降。长时间负重游泳运动BUN和血清CK也伴随运动发生相应变化;结论本研究发现,负重游泳过程中大鼠肾小管、肾小球细胞凋亡的特点:长时间负重游泳运动会诱导肾小管和肾小球细胞凋亡。负荷强度和/或负荷量增加都会导致AI升高。不同负荷强度和负荷量的运动对TAI、GAI的影响不同。长时间负重游泳运动诱导肾小管和肾小球细胞凋亡,引发这一变化的影响因素是Bax和Bcl-2蛋白的不同表达比例。长时间负重游泳运动导致T下降、C升高、T/C比值下降。运动性低血睾是TAI和GAI升高的诱发因素。随负荷量和/或负荷强度的增加TAI增加与T下降同步;随负荷量增加GAI增加与T浓度下降同步;而负荷强度的变化是否能导致GAI增加与T浓度下降同步证据尚不充分。长时间负重游泳运动导致TAI和GAI升高,BUN和血清CK变化在T下降诱导细胞凋亡的过程中起协同调控细胞凋亡的作用。Bax和Bcl-2蛋白表达在肾小管和肾小球细胞中的表现不完全同步的原因还有待探讨。另外,在多种调控因素中,哪一调控因素最主要。还有待于今后研究。总之,长时间负重运动导致T下降、BUN和血清CK升高诱发AI增加可能是长时间负荷运动机体疲劳、体能下降,最终运动成绩下降的重要原因。

全文目录


中文摘要  10-12
ABSTRACT  12-15
缩略语（ABBREVIATION）  15-17
1 前言  17-21
  1.1 选题依据  17-20
  1.2 研究目的  20-21
2 文献综述  21-34
  2.1 细胞凋亡的生物学意义  21-24
    2.1.1 细胞凋亡的发现  21-22
    2.1.2 细胞凋亡与疾病  22-23
    2.1.3 其它相关研究（诱导因素）  23-24
  2.2 凋亡细胞的特征  24-26
    2.2.1 形态学特征  24-25
    2.2.2 生化特征  25-26
  2.3 细胞凋亡的调控机制  26-28
    2.3.1 调控基因  26-27
    2.3.2 激素与细胞凋亡  27-28
    2.3.3 其它因素  28
  2.4 检测技术  28-29
  2.5 细胞凋亡与运动  29-34
    2.5.1 急性运动与凋亡  29-30
    2.5.2 长期运动与凋亡  30-32
    2.5.3 运动与细胞凋亡的关系  32-34
3 材料与方法  34-44
  3.1 实验动物  34
  3.2 训练方案及实验分组  34-36
    3.2.1 训练方案  34-36
    3.2.2 实验分组  36
  3.3 实验方法  36-41
    3.3.1 大鼠宰杀  36-37
    3.3.2 取材  37
    3.3.3 样品制作  37-38
    3.3.4 肾细胞凋亡的检测〔TUNEL〕  38-39
    3.3.5 Bcl-2原癌基因蛋白的检测（间接法）  39-40
    3.3.6 睾酮和皮质酮的测定  40
    3.3.7 肌酸激酶的测定  40-41
    3.3.8 尿素氮的测定  41
  3.4 技术路线  41-43
  3.5 数据处理  43-44
4 实验结果与分析  44-54
  4.1 大鼠体重的变化特征  44-45
  4.2 负重游泳运动对肾细胞凋亡的超微结构的影响  45
  4.3 负重游泳运动对大鼠肾细胞凋亡的影响  45-46
    4.3.1 长时间负重游泳运动对TAI 和GAI 的诱导  45-46
    4.3.2 不同运动负荷对TAI 及GAI 的影响  46
  4.4 不同运动负荷对凋亡调控因素的影响  46-52
    4.4.1 对Bcl-2及Bax蛋白表达的影响  46-48
    4.4.2 不同运动负荷对血清睾酮及皮质酮浓度的影响  48-51
    4.4.3 随运动负荷血清肌酸激酶的变化  51-52
  4.5 全部指标的相关关系  52-54
5 讨论  54-66
  5.1 大鼠体重与运动负荷的关系  54-55
  5.2 负重游泳运动对凋亡的诱导  55-56
  5.3 细胞凋亡的可能机制  56-60
  5.4 运动性睾酮低下对细胞凋亡的影响  60-63
  5.5 运动性睾酮低下的辅助生化指标CK 和BUN 对细胞凋亡的协同影响  63-65
  5.6 肾细胞凋亡率与其调控因素之间的相关关系  65-66
6 结论  66-67
7 建议  67-68
致谢  68-69
参考文献  69-82
附件  82-101
  1 检测细则  82-94
    1.1 组织切片基本程序  82-84
    1.2 末端脱氧核糖核酸转移酶介导的dUTP 缺口末端标记技术（TUNEL）  84-86
    1.3 Bcl-2 原癌基因蛋白的检测（间接法）  86
    1.4 血清中的睾酮（T）测试  86-90
    1.5 血清中的皮质酮测试  90-92
    1.6 血尿素的测定  92-94
  2 照片  94-101

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