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猪囊尾蚴一种蛋白抗原的分子克隆

作　者: 李文玲
导　师: 刘殿武
学　校: 河北医科大学
专　业: 流行病与卫生统计学
关键词: 猪囊尾蚴分子克隆 cDNA文库序列分析同源性分析
分类号: R346
类　型: 硕士论文
年　份: 2002年
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内容摘要

目的：为了从分子水平研究猪囊尾蚴的基因结构，本研究构建了猪囊尾蚴的cDNA文库从中筛选出编码某种蛋白抗原的基因。方祛：用异硫氰酸胍一步法提取猪囊尾蚴总RNA，经反转录合成cDNA片段后，将其与Uni—ZAP XR载体连接、包装成噬菌体构建猪囊尾蚴cDNA文库。以免抗猪囊尾蚴多克隆抗体筛选cDNA文库，得到一个阳性克隆(命名为pTS)。将此阳性克隆亚克隆到pBluescript SK质粒中，以载体臂上的通用引物采用双脱氧末端终止法测定插入片段的核苷酸序列，GENETYX软件分析核苷酸序列编码的氨基酸序列，并在GeneBank中进行核苷酸与氨基酸序列同源性检索。结果：从cDNA文库中筛选出的基因片断，其长度为1358bp，含有一个开放读码框，编码434个氨基酸，分子量为50785Da，5′端未发坝启动子，3′端未发现poly(A)信号，但有PolyA尾巴。开放读码框末端有由TAA组成的终止密码子。氨基酸序列中疏水性残基占40.09％(174／434)、亲水性残基占41.24％(179／434)、中性残基占17.74％(77／434)，有两个糖基结合位点。同源性检索表明pTS片段的部分核苷酸序列与恶性疟原虫红细胞表面抗原(ESA)同源性达100％，部分序列与D.melanogaster的弹性蛋白酶抑制素同源性达97％。其编码的434个氨基酸中的30—423个氨基酸与人、D.melanogaster、新杆状线虫和小鼠的α—血影蛋白同源性分中文摘要别为 49O／、58％、47％禾 49O／，其中 3＊05之间的一与人类pj影蛋白有3Th的同源性。 e：ph cDNA片段的核昔酸部分序列与 D．melanowt弹性蛋白酬制素基因的部分序列驱同源，部颁列与珊疟原虫红细胞表面抗原基因相关。其氨基酸序列与人、D．melmpaste、新杆状线虫、小鼠的。一血影蛋白有同源性，与人p血影蛋白同源性较低。

全文目录

中文摘要  4-6
英文摘要  6-8
研究论文猪囊尾蚴—种蛋白抗原的分子克隆  8-42
  前言  8-10
  材料与方法  10-23
  结果  23-26
  讨论  26-29
  结论  29-30
  参考文献  30-33
  附图  33-42
综述  42-70
致谢  70-71
个人简历  71

猪囊尾蚴一种蛋白抗原的分子克隆

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