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桔黄假单胞菌JD37抑菌物质的分离及其对油菜防病促生作用的研究

作　者: 方蕊
导　师: 肖明
学　校: 上海师范大学
专　业: 微生物学
关键词: 生物防治 生物农药 微生物农药 抑菌物质 桔黄假单胞菌JD37
分类号: S435.654
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
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内容摘要


农作物病害主要是由真菌、细菌、线虫或病毒等在适宜条件下从植物根部或茎部侵害而引起的,其危害程度会随农作物连作年限的增加而加重,造成农作物严重减产甚至绝产,经济损失重大。相关数据显示,在农作物病害中,由真菌引起的病害约占侵染性病害的80%。目前,防治植物病害主要依赖于化学农药,但此法易引起农药残留、环境污染和食品污染,甚至破坏生态平衡,同时易引起病原菌产生抗药性,因而导致防病效率下降甚至失败。本实验室自主筛选得到一株具有广谱抗病能力的拮抗细菌桔黄假单胞菌JD37(专利保藏号：CGMCC.7099),该拮抗菌对多种植物病原真菌较强抑制作用,如小麦赤霉病菌、水稻纹枯病菌、番茄灰霉病菌、油菜菌核病菌等。同时,JD37菌株还具有促生能力,对多种单子叶、禾本科植物(玉米、小麦等)以及多种绿叶蔬菜、蔬果类如鸡毛菜、空心菜、番茄等具有明显促生作用。在本实验中,通过提取分离JD37抑菌物质成分,进一步分析JD37的抑菌机理；并将其作为微生物农药作用于另一种重要经济作物油菜,研究该微生物农药在温室内的生防效果,为该菌株在防病促生方面的实际应用奠定了基础。研究结果表明：一、JD37发酵液对油菜种子发芽率的影响：用不同浓度的JD37发酵液处理油菜种子,发现JD37发酵液在较高浓度时不利于油菜种子的萌发,当其稀释度≥30倍时,对种子萌发的抑制作用解除。因此,在使用JD37菌剂时可在油菜出苗后施用或者经适度稀释后使用。二、JD37对油菜幼苗生长的影响：用不同浓度的JD37发酵液处理油菜幼苗,结合相关研究发现,JD37对不同植物的最佳促生浓度不同,如：对玉米小麦的最佳促生浓度约107cfu/g,对油菜的最佳促生浓度约106cfu/g。因此,对JD37发酵液适度稀释后既可以促进幼苗的生长,又可以起到防治病害的效果。三、JD37在油菜根际及根内部定殖情况：JD37在土壤中的定殖浓度约为105-106cfu/g,在根部的定殖浓度约为103-104cfu/g,良好的定殖能力是生防细菌发挥其防病促生效果的基础,因此,该菌对油菜具有良好的防病促生的潜能。四、JD37抑菌物质的提取分离：通过对JD37发酵液上清液萃取、薄层层析、液相色谱等方法,检测出JD37能够产生广谱抗菌抗生素PCA,其粗提样品中所含PCA浓度为103mg/L。其抗生素PCA的产生,使其更直接有效的抑制多种植物病原真菌,因此,该菌制备成JD37生物农药可用于农作物病菌的防治。五、JD37菌液在温室防效：JD37菌液在温室条件下对油菜菌核病生防作用明显,防治效果达82.3%,以滑石粉为载体JD37生物农药对油菜菌核病生防作用良好,防治效果为66.7%,比JD37菌悬液的防治效果稍低,这可能与其载体、保护剂、存放时间、使用浓度等相关。

全文目录


摘要  3-5
Abstract  5-9
第一章 绪论  9-21
  1.1 生物防治的特点及其现状  9-11
    1.1.1 农作物病虫害的防治方法  9-10
    1.1.2 微生物防治的优点  10
    1.1.3 生防细菌的种类  10-11
  1.2 拮抗细菌的抑菌机理  11-15
    1.2.1 拮抗细菌的竞争作用  12
    1.2.2 拮抗细菌诱导植物系统抗病性  12-14
    1.2.3 拮抗细菌产生抑菌物质  14-15
  1.3 油菜菌核病的现状及其防治  15-18
    1.3.1 油菜菌核病的特征  15
    1.3.2 油菜菌核病的危害症状  15-16
    1.3.3 油菜菌核病的发生原因  16-17
    1.3.4 油菜菌核病的防治方法  17-18
  1.4 研究目的与意义  18-21
第二章 桔黄假单胞菌JD37抑菌物质的提取分离与鉴定  21-33
  2.1 试验材料  21-22
    2.1.1 供试菌株  21-22
    2.1.2 培养基  22
    2.1.3 主要试剂  22
    2.1.4 主要仪器  22
  2.2 实验方法  22-25
    2.2.1 JD37菌株抑菌物质的提取  22-23
    2.2.2 JD37菌株抑菌物质的分离  23-24
    2.2.3 JD37菌株抑菌物质的鉴定  24-25
  2.3 结果与分析  25-30
    2.3.1 JD37菌株抑菌物质的提取  25-26
    2.3.2 JD37菌株抑菌物质的分离  26-28
    2.3.3 JD37菌株抑菌物质的鉴定  28-30
  2.4 小结  30-33
第三章 桔黄假单胞菌JD37对油菜病害的生防作用  33-41
  3.1 试验材料  33-35
    3.1.1 供试菌株  33-34
    3.1.2 培养基  34
    3.1.3 栽培土  34
    3.1.4 盆栽  34
    3.1.5 主要材料  34
    3.1.6 主要仪器  34-35
  3.2 实验方法  35-37
    3.2.1 JD37微生物农药的制备  35
    3.2.2 JD37微生物农药对油菜菌核病温室内防效测定  35-37
  3.3 结果与分析  37-39
    3.3.1 JD37微生物农药的制备  37
    3.3.2 JD37微生物农药对油菜菌核病温室内防效测定  37-39
  3.4 小结  39-41
第四章 桔黄假单胞菌JD37对油菜的促生作用  41-57
  4.1 试验材料  41-44
    4.1.1 供试菌株  41-42
    4.1.2 供试种子  42
    4.1.3 栽培土  42
    4.1.4 盆栽  42
    4.1.5 培养基  42
    4.1.6 主要试剂  42-44
    4.1.7 主要仪器  44
  4.2 实验方法  44-47
    4.2.1 抗药性JD37菌株的筛选  44-45
    4.2.2 JD37菌株种子液的制备  45
    4.2.3 JD37菌株对油菜种子萌发的影响  45-46
    4.2.4 JD37菌株对油菜幼苗生长的影响  46
    4.2.5 JD37菌株在油菜根际土壤和根内的定殖能力  46-47
  4.3 结果与分析  47-54
    4.3.1 JD37抗药性菌株的筛选  47-48
    4.3.2 JD37菌株对油菜种子萌发的影响  48-49
    4.3.3 JD37菌株对油菜幼苗生长的影响  49-51
    4.3.4 JD37菌株在油菜根际土壤和根内的定殖  51-54
  4.4 小结  54-57
总结  57-59
致谢  59-61
参考文献  61-67
主要科研成果  67-70
答辩委员会签名  70

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中图分类: > 农业科学 > 植物保护 > 病虫害及其防治 > 农作物病虫害及其防治 > 经济作物病虫害 > 油料作物病虫害 > 油菜子（芸苔）病虫害
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