学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

三裂叶豚草霜霉病发生规律及与锈菌协同侵染机制的研究

作　者: 王娟
导　师: 姜华
学　校: 辽宁师范大学
专　业: 微生物学
关键词: 三裂叶豚草三裂叶豚草霜霉菌苍耳柄锈菌三裂叶豚草专化型协同侵染生物防治
分类号: S451
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
下　载: 16次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载

内容摘要

三裂叶豚草是重要的外来入侵有害生物，对该恶性杂草的防治已成为杂草学家和社会普遍关注的问题。三裂叶豚草对农业生产和农业生态环境及人类健康构成了严重危害。尽管人们应用了较多方法（人工防除、化学防除、植物替代）开展三裂叶豚草的防治工作，但依然没有有效遏制住其猖獗蔓延的趋势。利用三裂叶豚草专性寄生菌防治三裂叶豚草是实现三裂叶豚草可持续控制的有效途径。苍耳柄锈菌三裂叶豚草专化型（Puccinia xanthii Schwein. f.sp. ambrosiae-trifidae S.W.T. Batra）和三裂叶豚草霜霉菌(Plasmopara angustiterminalis Novotelnova)是近些年来在我国三裂叶豚草上普遍发生的专性寄生菌，对三裂叶豚草表现出较好的生物防治潜力。在自然条件下，霜霉菌和锈菌经常协同侵染，明显促进罹病三裂叶豚草死亡，是防治三裂叶豚草的理想生防菌。作者通过野外调查与人工接种及定点系统观察，研究发现三裂叶豚草霜霉菌属于喜高温、高湿专性寄生菌，在夏季可反复侵染三裂叶豚草，以卵孢子形式在病残体中越冬成为第二年三裂叶霜霉菌发生的初侵染菌源。利用考马斯亮蓝组织透明染色法、棉蓝-乳酚油透明法和改良NaOH透明法观察了卵孢子，其中改良NaOH透明观察法效果最佳。通过野外调查和室内人工接种，测定三裂叶豚草霜霉菌的寄主范围。测定结果表明，该霜霉菌只侵染三裂叶豚草和苍耳，对其他菊科植物、农作物和观赏植物不侵染，具备寄主专一、病害流行速度快等特点，可用来有效控制三裂叶豚草。比较研究了7种三裂叶豚草霜霉菌DNA提取的方法，其中CTAB-钢珠法以及真菌试剂盒法获得的基因组DNA经检测质量较好。在此基础上，利用rDNA ITS-PCR法进行DNA扩增和检测。结果表明，上述两种方法提取的DNA适合于后续分子生物学研究。利用光学显微镜和电子显微镜，观察两种专性寄生菌的协同侵染机制。

全文目录

摘要  4-5
Abstract  5-10
引言  10-11
1 文献综述  11-24
  1.1 豚草生物学特征  11-13
    1.1.1 豚草的分类  11
    1.1.2 豚草属植物的生物学特征  11-13
    1.1.3 豚草的生境  13
    1.1.4 豚草的分子生物学研究  13
  1.2 豚草的分布与危害  13-16
    1.2.1 豚草的分布  13-15
    1.2.2 豚草的危害  15-16
  1.3 豚草的防治  16-21
    1.3.1 人工防除  17
    1.3.2 化学防除  17
    1.3.3 植物替代  17-18
    1.3.4 生物防治  18-21
  1.4 苍耳柄锈菌三裂叶豚草专化型的研究进展  21-22
    1.4.1 三裂叶豚草锈菌的侵染机制  21-22
    1.4.2 三裂叶豚草锈菌的 ISSR 和 SRAP 遗传多样性分析  22
  1.5 论文的研究目的和意义  22-24
2 三裂叶豚草霜霉菌的病原学研究  24-30
  2.1 材料与方法  24
  2.2 结果  24-26
    2.2.1 症状观察  24-25
    2.2.2 病原鉴定  25-26
  2.3 讨论  26-30
3 三裂叶豚草霜霉菌卵孢子的观察  30-34
  3.1 试验材料  30
  3.2 试验方法  30-31
    3.2.1 考马斯亮蓝组织透明染色法  30
    3.2.2 棉蓝-苯酚油透明法  30-31
    3.2.3 改良 NaOH 透明法  31
  3.3 结果与分析  31-32
  3.4 结论与讨论  32-34
4 三裂叶豚草霜霉菌寄主专化性的研究  34-39
  4.1 材料  34
  4.2 方法  34-35
    4.2.1 野外直接观察  34
    4.2.2 孢囊孢子喷雾接种法  34-35
    4.2.3 菌片粘贴法  35
  4.3 结果与分析  35-38
    4.3.1 野外观察  35
    4.3.2 离体叶片接种  35-37
    4.3.3 苗期接种  37-38
  4.4 结论与讨论  38-39
5 三裂叶豚草霜霉菌 DNA 提取方法研究  39-46
  5.1 材料  39
    5.1.1 霜霉菌材料  39
    5.1.2 植物材料  39
    5.1.3 试验药品  39
  5.2 DNA 提取方法  39-42
    5.2.1 CTAB-钢珠法  40
    5.2.2 CTAB-电钻法  40
    5.2.3 液氮研磨法  40
    5.2.4 SDS-钢珠法  40-41
    5.2.5 SDS-液氮研磨法  41
    5.2.6 尿素法  41
    5.2.7 真菌试剂盒提取法  41-42
  5.3 DNA 质量检测  42
    5.3.1 电泳检测  42
    5.3.2 DNA 质量的 ITS-PCR 定性检测  42
  5.4 结果与分析  42-44
  5.5 讨论  44-46
6 三裂叶豚草锈菌与霜霉菌协同侵染的研究  46-50
  6.1 材料  46
  6.2 方法  46-47
    6.2.1 显微观察  46
    6.2.2 冷冻切片观察  46-47
    6.2.3 透射电镜观察  47
  6.3 结果与分析  47-49
  6.4 讨论  49-50
结论  50-51
参考文献  51-56
附录 A 三裂叶豚草霜霉菌与苍耳霜霉菌的交互接种试验  56-57
附录 B 三裂叶豚草霜霉菌与苍耳霜霉菌的测序波峰图  57-62
攻读硕士学位期间发表学术论文情况  62-63
致谢  63

三裂叶豚草霜霉病发生规律及与锈菌协同侵染机制的研究

内容摘要

全文目录

相似论文