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方榄Canarium bengalense Roxb.抗癌活性成分的研究

作　者: 杜玉虹
导　师: 崔承彬；姚新生
学　校: 沈阳药科大学
专　业: 药物化学
关键词: 方榄 tSFT210细胞 细胞周期抑制 GO／GI期 酚酸类 抗癌
分类号: R284
类　型: 硕士论文
年　份: 2003年
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内容摘要


本文利用tsFT210细胞的流式细胞术筛选模型，首先对从上千种中草药和民间药物中经初筛有效的40种中草药进行了复筛。在本文复筛的40种中草药中，17种在100μg／mL浓度下未能检测到任何活性，而其余23种则在同浓度下检测到具有细胞周期抑制、细胞凋亡诱导或细胞毒等抗癌活性，复筛阳性率达57.5％。在23种复筛有效的植物样品中，方榄提取物将tsFT210细胞的细胞周期显著地抑制在G0／G1期，这一结果虽然与前期初筛结果(较弱的G2／M抑制活性，赵庆春 沈阳药科大学博士学位论文)不一致，但在多次重复筛选中其G0／G1期抑制活性稳定重现，是活性好的植物品种，但迄今尚未见有关方榄的研究报道。因此，本文选择方榄作为深入研究的目标植物。 方榄Canarium bengalense Roxb.系橄榄科(Burseraceae)橄榄属(Canarium)植物，其茎皮在我国部分地区民间用于治疗癌症，但迄今尚未见有关其化学成分和药理活性的研究报道。鉴于此，本文以tsFT210细胞系活性筛选模型为向导，对方榄的抗癌活性成分进行了系统研究。文中采用跟踪活性进行分离的研究模式，首先确定了方榄提取物G0／G1期抑制活性的有效部位，继而从活性部位中分离得到10个细胞周期抑制活性成分。根据理化性质和波谱数据(UV、NMR、MS)，鉴定了其中8个化合物的结构，分别为没食子酸(1)、没食子酸乙酯(2)、没食子酸甲酯(3)、鞣花酸(4)、1-O-β-D-没食子酰基-3,6-O-六羟基联苯二甲酰基葡萄糖(5)和1,2,3,4,6-五没食子酰基-β-D葡萄糖(6)、槲皮素(7)、山奈酚(8)。采用流式细胞术测试并配以光学显微镜细胞形态学观察，系统地测试了化合物1-8的细胞周期抑制活性。结果表明，1-8均能有效地抑制tsFT210细胞的细胞周期。其中，化合物1、7、8将tsFT210细胞的细胞周期抑制在G2／M期，而2-6则将tsFT210细胞抑制在G0／G1期。这些化合物抑制tsFT210细胞细胞周期的最低抑制浓度(MIC)分别为50μg／mL(1)、1.56μg／mL(2)、3.13μg／mL(3)、、6.25μg／mL(4)、25μg／mL(5)、6.25μg／mL(6)、0.78μg／mL(7)、1.56μg／mL(8)，其中1、3、5为新细胞周期抑制剂。化合物1-8均为首次从方榄中分离得到，化合物2，3，5-8系首次从该属植物中分离得到。沈阳药科大学硕士论文 中文摘要 在活性跟踪分离过程中，活性部位的确定以及各种层析分离直至得到活性单体的每一步实验，都通过微量活性跟踪预实验结果来确定分离方案，从而保证了活性成分的快速、准确和有效分离。分离得到的8个酚酸类化合物中，2－6在 tsFTZIO细胞活性筛选模型上表现出很强的GO／GI期抑制活性，而且化合物6在方榄中含量也很高，表明化合物2－6的活性代表了方揽总浸膏的GO／GI期抑制活性。 本文首次系统研究了方榄中的抗癌活性成分，确定了酚酸类化合物l－8是该植物抗癌活性的主要有效成分，为方榄在我国民间用于治疗癌症的民间用法提供了部分科学依据，同时为细胞周期抑制剂家族增添了没食于酸uX 没食子酸甲酯p）和l－O－在D－没食于酚基l，6－O－六羟基联苯二甲酚基葡萄糖G）等酚酸类新细胞周期抑制剂。

全文目录


摘要  6-8
ABSTRACT  8-10
缩略词表  10-11
前言  11-16
第一章 方榄等40种中草药的抗癌活性复筛  16-22
  第一节 活性筛选模型  16-18
  第二节 中草药样品的活性筛选  18-20
  第三节 小结与讨论  20-22
第二章 方榄抗癌活性成分的跟踪分离  22-28
  第一节 实验材料及活性测试方法  22-23
  第二节 方榄茎皮活性成分的跟踪分离  23-27
  第三节 小结与讨论  27-28
第三章 方榄中单体活性成分的结构研究  28-40
  第一节 没食子酸及其酯类和鞣花酸的结构鉴定  28-30
  第二节 水解鞣质类化合物的结构鉴定  30-33
  第三节 黄酮类化合物的结构鉴定  33-35
  第四节 小结与讨论  35-37
  第五节 实验部分  37-40
第四章 酚酸类化合物1-8的生物活性研究  40-48
  第一节 化合物1-8的活性测试结果  40-43
  第二节 新细胞周期抑制剂1，3，5的抑制活性特点  43-47
  第三节 小结与讨论  47-48
结论  48-49
参考文献  49-52
致谢  52-53
附图  53-55

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中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中药学 > 中药化学
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