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端粒序列和rDNA在几种禾本科植物中的定位分析

作　者: 赵丽娟
导　师: 李立家
学　校: 武汉大学
专　业: 遗传学
关键词: 玉米原位杂交基因组原位杂交 rDNA 台湾甜草
分类号: Q943
类　型: 硕士论文
年　份: 2005年
下　载: 212次
引　用: 3次
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内容摘要

玉米在分类学上属于禾本科、玉蜀黍族的玉蜀黍属(Zea)。在玉蜀黍族中,摩擦禾属(Tripsacum)和薏苡属(Coix)与玉蜀黍属的关系最近。因此玉米的近缘种主要指这三个属中的物种。物种间重复序列的同源程度可以有效地反映它们亲缘关系的远近。 1.染色体定量作图是近年来新发展的一项分子细胞遗传学技术,即通过计算机软件对染色体上着色深浅不同的区域或带纹进行定量分析,实现常规方法所难以达到的精确定量目标。通过这样的定量分析,可以大大提高染色体识别的准确度。例如,经DAPI染料染色后染色体上显示明显不同的深染区和浅染区,深染区和浅染区分别相当于染色体上染色质纤维较浓缩和较伸展的区域。我们用MetaMorph软件定量分析了每条中期染色体上(从短臂到长臂)DAPI荧光强度的变化,结合染色体的长度和臂比作为辅助参数,中期染色体的定量染色体图。该定量染色体图不仅描述了每条染色体不同区域浓缩程度的不同,而且也反应出不同浓缩区域所占染色体长度的比例,可作为识别台湾甜草基因组中每条染色体的有力依据。 2.对其它特定的重复序列,如端粒pAtT DNA在玉米和大麦的不同分裂时期的FISH和Fiber-FISH分析。在玉米中期染色体上,观察到杂交的结果是十对染色体上都有信号存在,但是可以明显地看到信号的强弱都不同。为了进一步分析,对现有的提核方法进行了改进,采用了新的方法制备DNA纤维,克服了液氮研磨法的不足,并在基因组比较大,重复序列较多的玉米(Zea mays)上获得成功,同时用伸展DNA纤维的荧光原位杂交(Fiber-FISH)技术测定了端粒DNA在玉米染色体上的拷贝数。结果表明玉米各条染色体端粒重复序列的拷贝数存在差异(大约在15—230之间),在供试大麦(Hordeum vulgare L.的)有丝分裂中期染色体进行了确定分析,较强的45S rDNA信号共有两对,分别分布在大麦的第1染色体的短臂和第2染色体的长臂。而5S rDNA则只有一对杂交信号,位于第3

端粒序列和rDNA在几种禾本科植物中的定位分析

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