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经前舒颗粒对PMS肝气郁证模型大鼠相关脑区5-HT1AR表达水平的影响

作　者: 邵春娥
导　师: 薛玲
学　校: 山东中医药大学
专　业: 中药学
关键词: PMS肝气郁证 经前舒颗粒 5-HT1A受体 RT-PCR western blot
分类号: R285.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
下　载: 39次
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内容摘要


目的：在前期工作的基础上,通过检测经前期综合征(premenstrual syndrome, PMS)肝气郁证模型大鼠相关脑区(下丘脑、海马)5-HT1A受体mRNA与蛋白水平,探讨5-HT1A受体基因表达与PMS肝气郁证发病相关性及经前舒颗粒对其治疗的相应微观机制。方法：用细胞涂片法观察大鼠阴道细胞形态,确定动情周期后,选非接受期大鼠随机分为正常组、PMS肝气郁证模型组和模型给药组；以束缚造模法复制PMS肝气郁证模型大鼠,模型给药组以经前舒颗粒进行干预；采用半定量RT-PCR基因扩增技术与western blot法分别检测上述三组大鼠下丘脑、海马的5-HT1A受体mRNA与蛋白水平。结果：束缚造模后,与正常组比较,模型组大鼠体重显著降低(P<0.05);与模型组比较,模型给药组大鼠体重显著增加(P<0.05)。旷场实验结果表明,与正常组相比,模型组旷场实验评价的水平得分、垂直得分及旷场总分均显著减少(P<0.05)；而与模型组相比,模型给药组各层次得分显著增加(P<0.05)。各组大鼠下丘脑、海马的5-HT1A受体基因表达检测结果表明：与正常组相比,模型组大鼠两脑区5-HT1A受体的mRNA与蛋白表达显著降低(P<0.05),而模型给药组大鼠两脑区的表达无显著性差异；与模型组相比,模型给药组大鼠两脑区5-HT1A受体mRNA与蛋白表达显著升高(P<0.05)；调肝方药经前舒颗粒可以纠正5-HT1A受体mRNA与蛋白表达降低的状态结论：束缚造模法制备PMS肝气郁证模型大鼠成功；大鼠下丘脑、海马的5-HT1A受体基因转录与蛋白翻译降低与PMS肝气郁证关系密切,提示5-HT1A受体基因表达在PMS肝气郁证的发生中可能起重要作用；经前舒颗粒可上调该证模型大鼠上述脑区内5-HT1A受体mRNA与蛋白水平至正常状态,可能是该药治疗PMS肝气郁证的重要作用机制之一。

全文目录


提要  3-4
Abstract  4-8
引言  8-10
材料与方法  10-32
  1 材料  10-16
    1.1 实验动物  10
    1.2 药品与试剂  10
    1.3 实验仪器  10-16
  2 方法  16-27
    2.1 大鼠模型制备  16-18
      2.1.1 受试大鼠筛选  16-18
      2.1.2 PMS肝气郁证造模与给药方法  18
      2.1.3 造模后行为学测定——旷场评价  18
    2.2 脑组织取材  18
    2.3 大鼠脑组织总RNA提取、反转录及扩增  18-21
      2.3.1 总RNA提取  18-19
      2.3.2 RNA反转录(RT)  19-20
      2.3.3 PCR扩增  20-21
      2.3.4 琼脂糖凝胶的制备及电泳检测  21
    2.4 大鼠脑组织总蛋白提取及检测步骤  21-27
      2.4.1 脑组织总蛋白提取[28]  21-22
      2.4.2 蛋白变性  22
      2.4.3 样品蛋白含量的测定  22-23
      2.4.4 SDS—PAGE电泳  23-25
      2.4.5 电转移  25-26
      2.4.6 免疫反应  26-27
      2.4.7 显色与图象分析  27
    2.5 统计方法  27
  3 结果  27-32
    3.1 行为学指标结果  27-29
      3.1.1 各组大鼠造模前后体重变化  27-28
      3.1.2 各组大鼠旷场试验评价  28-29
    3.2 各组大鼠中枢5-HT_(1A)受体基因与蛋白水平的测定  29-32
      3.2.1 各组大鼠中枢5-HT_(1A)受体基因水平的比较  29-30
      3.2.2 各组大鼠中枢5-HT_(1A)受体蛋白水平的比较  30-32
讨论  32-42
  1 关于经前抑郁的病因学探讨  32-34
    1.1 现代医学对经前抑郁的病因学探讨  32
    1.2 中医学对PMS经前抑郁的认识  32-34
  2 束缚应激制备PMS肝气郁证大鼠模型的探讨  34-35
  3 海马、下丘脑内5-HT1A受体与PMS的关系  35-39
    3.1 海马、下丘脑与抑郁情绪  35-36
    3.2 5-HT1A受体与PMS发病的相关性探讨  36-39
  4 经前舒颗粒对PMS肝气郁证的治疗作用机制探讨  39-40
  5 问题与展望  40-42
结语  42-43
参考文献  43-51
综述  51-60
  参考文献  55-60
附录一 芍药苷及其衍生物化学结构  60-61
附录二 缩写词表  61-62
致谢  62

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中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中药学 > 中药药理学 > 中药实验药理
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