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BDNF和bFGF对全脑缺血再灌注大鼠内源性神经干细胞的影响

作　者: 任铭新
导　师: 臧卫东；文小军；冯志博
学　校: 郑州大学
专　业: 人体解剖与组织胚胎学
关键词: 全脑缺血 内源性神经干细胞 bFGF BDNF 大鼠
分类号: R743.3
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要


目的探讨BDNF和bFGF对全脑缺血再灌注大鼠内源性NSCs增殖、迁移和分化的影响。方法选用体重在250-300g的健康雄性SD大鼠,随机分为假手术组(A)12只、模型组(B)、BDNF治疗组(C)、bFGF治疗组(D)、BDNF和bFGF联合治疗组(E)(各24只)。B组大鼠制作全脑缺血再灌注模型,C、D、E组大鼠在全脑缺血再灌注模型基础上侧脑室注射BDNF、bFGF、BDNF和bFGF混合液,假手术组大鼠不进行模型制作,侧脑室注射同剂量的生理盐水。首先侧脑室插管并固定,建立给药途径；一周后,采用Pulsinelli法(闭合大鼠四条动脉)制作全脑缺血再灌注模型,模型制作前30分钟给药一次,以后隔天给药一次,每次5微升(0.1μg/μl)。分别于全脑缺血再灌注后3d、7d、11d、15d取脑,处死前1天腹腔注射BrdU标记液。HE染色观察大鼠海马、皮质神经元的形态学改变；免疫组织化学方法动态检测大鼠脑海马、皮质BrdU和Nestin的表达；利用RT-PCR技术半定量检测大鼠脑NSE mRNA的表达。统计结果应用SPSS13.0统计软件进行统计学处理,统计数据用均数±标准差(i±s)表示,两样本之间均数比较采用t检验,P<0.05具有显著性差别。结果(1)HE染色：假手术组海马、皮质神经细胞形态正常,数量多,排列整齐。模型组神经细胞稀疏,细胞间隙增大,并可见大量细胞变性坏死,表现为胞体皱缩,核固缩深染,核仁消失；而C、D、E组神经细胞存活数量增多,损伤程度减轻。(2)免疫组织化学：假手术组大鼠海马、皮质区很少见到阳性细胞表达；与假手术组相比手术各组大鼠脑海马和皮质的BrdU和Nestin阳性细胞均在全脑缺血再灌注3d后开始显著增加,模型组7d达到高峰,BDNF治疗组、bFGF治疗组和BDNF+bFGF治疗组1ld达到高峰,随后开始逐渐下降；与模型组相比缺血后各时间点,BDNF治疗组、bFGF治疗组、BDNF和bFGF联合治疗组BrdU和Nestin阳性细胞数明显增加(P<0.05); BDNF治疗组和bFGF治疗组组间比较无统计学意义(P>0.05)；与BDNF治疗组、bFGF治疗组相比缺血后各时间点,BDNF和bFGF联合治疗组BrdU和Nestin阳性细胞数增加更明显(P<0.05)。(3) RT-PCR:B、C、D、E各组NSE mRNA表达11d前没有明显变化,第15d表达有所增加,仅bFGF治疗组、BDNF和bFGF联合治疗组增加具有统计学意义(P<0.05)。结论(1)全脑缺血再灌注能够引起内源性神经干细胞的原位增殖；(2) BDNF、bFGF可促进并延长全脑缺血再灌注大鼠内源性神经干细胞原位增殖,BDNF和bFGF联合应用有协同增效作用；(3)bFGF较之BDNF有明显促进内源性神经干细胞向神经元分化的作用,BDNF和bFGF联合应用促进作用更加明显。

全文目录


摘要  5-7
Abstract  7-10
前言  10-12
材料与方法  12-20
实验结果  20-30
讨论  30-36
小结  36-37
参考文献  37-42
综述:神经递质和神经营养因子对中枢神经系统神经发生的影响  42-53
  正文  42-48
  参考文献  48-53
硕士期间所发表的文章  53-54
缩略词表  54-56
致谢  56

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中图分类: > 医药、卫生 > 神经病学与精神病学 > 神经病学 > 脑血管疾病 > 急性脑血管疾病（中风）
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