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水通道蛋白家族在胃癌组织中的表达分布与临床意义

作　者: 朱正才
导　师: 吴文溪
学　校: 南京医科大学
专　业: 普外科
关键词: 水通道蛋白胃癌 RT-PCR Western-blot 免疫组织化学
分类号: R735.2
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
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内容摘要

目的:检测水通道蛋白家族(AQPs)在胃癌细胞株MKN45、AGS和SGC7901,正常胃黏膜上皮细胞株GES-1,胃癌组织和癌旁正常组织中的表达与分布,探讨其在胃癌发生中的可能作用。方法:在知情同意的原则下取江苏省人民医院胃肠外科2007年6月至2008年9月间胃癌手术切除的组织标本,分别应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、免疫印迹(Western-blot )、免疫组化(Immunohistochemistry)和免疫荧光(immunofluorescence)方法检测胃癌组织和癌旁正常组织中AQPs表达与分布情况,同时检测胃癌细胞株MKN45、AGS、SGC7901及人正常胃黏膜细胞株GES-1中AQPs的表达情况。结果:AGS、SGC7901与GES-1细胞株中表达AQP0、1、3、4、5、7、11 mRNA;低分化型细胞株MKN45中只有AQP3 mRNA表达。在人的胃癌组织及癌旁正常组织中AQP-0、2、6、7、8、9、10、12 mRNA均没有表达;在胃癌组织和癌旁正常组织中AQP1及AQP11 mRNA均有表达,AQP1、AQP11与GAPDH灰度值相比后统计分析证实,AQP1及AQP11 mRNA在胃癌组织与癌旁正常组织中表达都无明显差异(两者P>0.05 );AQP4mRNA在癌旁正常组织中表达丰富,在胃癌组织中无或低水平表达,与GAPDH灰度值相比后经统计分析证实,AQP4mRNA在胃癌组织中表达较癌旁正常组织表达明显减少(P<0.01);AQP3 mRNA在胃癌组织及癌旁正常组织中均有表达,AQP3与GAPDH灰度值相比后经统计分析证实,AQP3 mRNA在胃癌组织中表达较癌旁正常组织表达明显增多(P<0.01);AQP5 mRNA在癌旁正常组织中未见表达,而在胃癌组织中出现表达,差异有显著性(P<0.01);通过RT-PCR检测发现,AQP3、AQP4、AQP5 mRNA在肿瘤组织与正常组织中的表达存在明显差异,进一步通过Western-blot检测AQP3、AQP4、AQP5在肿瘤组织与癌旁正常组织之间蛋白水平的表达情况,结果显示胃癌组织有AQP3和AQP5的蛋白表达,正常组织标本有AQP4蛋白表达,从而进一步证实了RT-PCR的结果。免疫组织化学结果显示AQP4阳性反应呈棕黄色,主要存在于胃黏膜主细胞及壁细胞胞膜,而胃癌组织中未检测到其表达;免疫荧光结果显示AQP3,AQP5在肿瘤组织中表达丰富,而在癌旁正常组织表达显著降低。同时分析了胃癌组织中AQP3和AQP5的表达量与胃癌病人的临床病理特征之间的关系,结果发现低分化腺癌AQP3的表达量明显高于高分化腺癌,AQP3和AQP5的表达量与胃癌病人的淋巴结转移情况呈正相关,而与胃癌病人的年龄、性别、肿瘤的大小、部位和浸润深度无关。结论:1.本研究结果提示, AQP3、AQP4和AQP5在胃癌组织和癌旁正常组织之间存在差异表达;2.低分化腺癌AQP3的表达量明显高于高分化腺癌,AQP3和AQP5的表达量与胃癌病人的淋巴结转移情况呈正相关,这提示AQPs在胃癌的发生发展中可能起一定的作用。

全文目录

中文摘要  4-6
英文摘要  6-8
前言  8-10
第一部分  10-20
  材料和方法  10-14
  结果  14-20
第二部分  20-25
  材料和方法  20-23
  结果  23-25
第三部分  25-32
  材料和方法  25-27
  结果  27-32
讨论  32-38
参考文献  38-43
综述  43-56
  参考文献  51-56
附录  56-57
攻读学位期间发表文章情况  57-58
致谢  58

水通道蛋白家族在胃癌组织中的表达分布与临床意义

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