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重组人血管内皮抑制素逆转人肺腺癌A549/DDP细胞耐药性的研究

作 者: 苏爽
导 师: 孙秀华
学 校: 大连医科大学
专 业: 肿瘤学
关键词: 重组人血管内皮抑制素 A549/DDP细胞株 耐药逆转
分类号: R734.2
类 型: 硕士论文
年 份: 2011年
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内容摘要


目的:探讨重组人血管内皮抑制素(rh‐Endostatin)对人肺腺癌A549/DDP细胞耐药性的逆转作用及其机制。方法:本实验采用人肺腺癌A549细胞及对顺铂(DDP)耐药的A549/DDP细胞作为研究对象,将DDP与rh‐Endostatin以分别单独给药及两者联合给药的方式,作用于人肺癌细胞株A549及耐药细胞株A549/DDP,作用时间72小时,观察不同给药方式导致的同株细胞之间耐药性的不同及不同株细胞间耐药性的差别。1.采用MTT法检测rh‐Endostatin和DDP对肺腺癌细胞株A549及耐药株A549/DDP的细胞生长抑制作用,确定rh‐Endostatin无细胞毒作用浓度及DDP的半数抑制率(IC50),确定耐药指数。2.用Caspase-3分光光度法测定rh-Endostatin单药组、DDP单药组、及rh‐Endostatin联合DDP组分别作用于A549/DDP细胞后的细胞凋亡率。3.采用western blot法检测rh-Endostatin单药组、DDP单药组、及rh-Endostatin联合DDP组分别作用于A549/DDP细胞后的耐药蛋白肺耐药蛋白(LRP)及谷胱甘肽-S-转移酶(GST)表达情况。结果:1.MTT法结果显示:浓度为400ug/ml的rh-Endostatin作用72小时对A549及A549/DDP细胞均无细胞毒性。DDP对A549细胞半数抑制浓度(IC50)为0.79±0.06ug/ml,对A549/DDP细胞的IC50为13.3±0.9ug/ml,A549/DDP对DDP的耐药指数为16.8。rh-Endostatin与DDP联合用药时,耐药细胞A549/DDP的IC50降为2.57±0.04ug/ml,逆转倍数(RF)5.14,相对逆转率(RRR%)85.6%,提示rh-Endostatin可能增强DDP对A549/DDP细胞的杀伤作用,具有一定的逆转A549/DDP细胞耐药的作用。2.Caspase-3分光光度法测定结果:rh-Endostatin单药组测定OD值为0.034±0.21,DDP单药组为1.289±0.39,rh-Endostatin联合DDP组为2.693±0.78,A549/DDP细胞对照组为0.015±0.35。联合用药组与单独给药组比较P=0.00,有统计学意义。3.western blot结果显示:A549/DDP细胞内的LRP、GST蛋白表达量,rh-Endostatin联合DDP组处理后的A549/DDP细胞的LRP、GST蛋白表达量均有明显下降。(P=0.00,有统计学意义。)结论:rh-Endostatin部分逆转A549/DDP细胞对DDP的耐药性,其逆转机制可能与A549/DDP细胞内LRP和GST的蛋白表达量降低、细胞凋亡增加相关。

全文目录


摘要  6-8
Abstract  8-10
前言  10-11
材料和方法  11-15
结果  15-21
讨论  21-24
结论  24-25
参考文献  25-26
综述  26-36
  参考文献  34-36
致谢  36

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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 呼吸系肿瘤 > 肺肿瘤
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