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重组人血管内皮抑制素对人肺腺癌A549细胞ERCC1基因表达的影响

作 者: 颜燕
导 师: 孙秀华
学 校: 大连医科大学
专 业: 肿瘤学
关键词: 肺癌 重组人血管内皮抑制素 顺铂 ERCC1 A549细胞株
分类号: R734.2
类 型: 硕士论文
年 份: 2011年
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内容摘要


肺癌是近年来发病率逐渐上升的恶性肿瘤之一,各种耐药现象的产生极大的限制了其临床治疗疗效,因此对参与耐药的相关基因及其作用机制的研究将在很大程度上为肺癌的治疗提供帮助。顺铂(DDP)是临床上治疗肺癌最常用的化疗药物之一,铂类药物通过诱导肿瘤细胞DNA的损伤导致DNA复制障碍,而DNA修复系统可以修复药物引起的DNA损伤,从而使机体产生抗药性。目前研究表明,ERCC1基因的表达与DDP耐药现象的产生有着必然的联系。重组人血管内皮抑制素(rh-Endostatin),商品名为恩度(Endostar),是我国第一个自主研发生产的抗血管生成药物,它与化疗药物联合使用可提高化疗疗效,并且此药物的毒副作用少,安全性好。本实验将DDP、Endostar以不同给药方式作用于人肺腺癌A549细胞,对药物处理后的细胞中ERCC1基因mRNA的表达进行分析。目的:探讨Endostar联合DDP不同给药方式对人肺腺癌A549细胞中ERCC1基因表达的影响,为肺癌二线治疗提供理论指导。方法:以人肺腺癌细胞株A549作为研究对象,所使用的药物为DDP和Endostar。采用MTT法分别检测Endostar、DDP以及DDP联合Endostar对A549细胞的生长抑制作用,进而确定实验所采用的药物浓度。本实验将对数生长期的细胞分为4个加药组,1个对照组,分别为:(1)DDP一次性加入(0.34μg/ml);(2)DDP分三天加入(每天0.11μg/ml);(3)DDP(0.34μg/ml)、Endostar(300μg/ml)一次性加入;(4)DDP分三天加入(每天0.11μg/ml),同时每天加入Endostar(300μg/ml);(5)对照组。按上述分组方法将相关药物作用于细胞后,采用Real Time PCR方法检测经处理后的细胞中ERCC1mRNA的相对表达量。结果:1.MTT法得出Endostar浓度为300μg/ml时,对A549无明显细胞毒作用。DDP对A549细胞的IC30约为0.34μg/ml。联合Endostar时DDP对A549细胞的IC30约为0.13μg/ml。2.Real Time PCR方法得出各实验组细胞中ERCC1mRNA的相对表达量分别为:①1.00;②0.88;③2.00;④1.90;⑤0.77。据此得出:(1)加药组均高于对照组(2)联合Endostar组均高于单用DDP组。结论:1.Endostar增加了DDP对人肺腺癌A549细胞的细胞毒作用。2.DDP和Endostar联合应用使A549细胞中ERCC1mRNA表达明显增加。

全文目录


摘要  6-8
Abstract  8-10
引言  10-11
材料与方法  11-15
结果  15-22
讨论  22-26
结论  26-27
参考文献  27-29
综述  29-36
  参考文献  33-36
致谢  36

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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 呼吸系肿瘤 > 肺肿瘤
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