学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示
NF-κB信号通路在应力介导的人牙周膜成纤维细胞增殖中的作用及其机制
作 者: 邵扬
导 师: 张广耘
学 校: 大连医科大学
专 业: 口腔临床医学
关键词: NF-κappaB 周期性张应力 增殖 咬合创伤 人牙周膜成纤维细胞
分类号: R781.4
类 型: 硕士论文
年 份: 2011年
下 载: 46次
引 用: 0次
阅 读: 论文下载
内容摘要
牙周炎是一种病因复杂,受全身防御机制调控和各种局部因素影响,由多种因素共同作用的牙周组织破坏性疾病,咬合创伤是其局部促进因素之一。人牙周膜成纤维细胞( human periodontal ligament fibroblasts,hPDLF)是牙周膜中主要的感受性细胞和效应性细胞,其增殖活性直接反映了牙周组织的健康状态,目前有关力学刺激细胞增殖及其复杂调控机制的研究尚不深入。核因子-κB(unclear factorκB,NF-κB)是真核细胞内一类重要的转录因子,周期性张应力能否通过NF-κB信号通路,将细胞外信号传递到细胞核内引起hPDLF增殖,对其机制具有指导意义。目的:本实验采用多通道细胞牵张应力加载系统对体外培养的hPDLF施加不同时间的周期性张应力,观察其对hPDLF增殖的影响;阐明NF-κB在应力介导的hPDLF增殖中的作用及其机制,明确周期性张应力、hPDLF增殖、NF-κB三者之间的关系;为诠释咬合创伤的致病机理以及探寻咬合创伤所致牙周炎干预治疗的关键靶点提供理论依据和新的思路。方法:1.采用多通道细胞牵张应力加载系统,以hPDLF为对象构建细胞体外培养-力学刺激模型。2.加力组分别加载周期性张应力1、2、4、6、12、24h,幅度为10% (每一个循环包括3s-stretch/3s-relaxation),频率为0.1Hz(6cycles/分),并以不加力组为实验对照组。应用细胞计数试剂-8 (Cell Counting Kit-8,CCK-8)检测hPDLF增殖的情况;流式细胞技术检测hPDLF细胞周期的变化;应用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测增殖细胞核抗原(Proliferating cell nuclear antigen,PCNA)和NF-κB mRNA的表达以及应用NF-κB的特异性抑制剂吡咯烷二硫代氨甲酸盐(pyrrolidine dithiocarbamate,PDTC)预处理的细胞作为对照组,检测hPDLF增殖的情况。3.应用蛋白印迹法(Western-blot)检测各组hPDLF中的NF-κB抑制蛋白I-κBα(Inhibitor kappa B,I-κBα)蛋白的表达情况;应用PDTC预处理的细胞作为对照组,检测I-κBα蛋白的表达。结果:1.体外培养获得了典型且具有稳定增殖特征性的hPDLF,适于对细胞进行力学加载实验。2.相对于静态组:1、2 h,加力组hPDLF增殖下降,差异无统计学意义(P>0.05);6 h开始增殖,12 h增殖达高峰,24 h增殖受到明显的抑制;PDTC抑制细胞增殖以及PCNA和NF-κB mRNA的表达,差异有统计学意义(P<0.05)。3.静态组胞浆IκBα蛋白有较强的表达,加载12h后,胞浆I-κBα蛋白表达明显减少;加入PDTC后,胞浆I-κBα蛋白表达增加,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:1.成功构建hPDLF体外培养-力学刺激模型。2.加载幅度10%、频率0.1Hz的周期性张应力,在一定时间范围内能促进体外培养的hPDLF增殖;当超过一定时间时,细胞增殖受到明显抑制;NF-κB信号通路参与调控细胞的增殖状态,并在其中发挥重要作用。3.周期性张应力可使胞浆I-κBα蛋白表达水平的降低,胞浆I-κBα降解是NF-κB信号通路活化的机制之一。
|
全文目录
一、摘要 6-10 (一) 中文摘要 6-8 (二) 英文摘要 8-10 二、前言 10-12 三、正文 12-44 (一) 实验一构建人牙周膜成纤维细胞体外培养-力学刺激模型 12-21 (二) 实验二NF-κB 信号通路在周期性张应力对人牙周膜成纤维细胞增殖中的作用 21-37 (三) 实验三 I-κBα降解在周期性张应力介导的人牙周膜成纤维细胞增殖中的作用机制 37-44 四、全文结论 44-45 五、文献综述 45-54 (一) 正文 45-51 (二) 参考文献 51-54 六、附录 54-56 七、致谢 56
|
相似论文
- Pin1在骨肉瘤细胞中的表达及对细胞周期的影响,R738.1
- 塞来昔布与β-榄香烯联合给药的抗肿瘤作用及其机制研究,R96
- 冷却分割猪肉中腐败微生物分离鉴定与生长特性的研究,R446.5
- 茉莉离体快繁体系的建立,S567.239
- PCV2分离株增殖特性研究及板蓝根多糖、黄芪多糖对PCV2体外复制的影响,S858.28
- Toll样受体4信号通路在脂多糖促进肺癌细胞增殖中的机制探讨,R734.2
- hnRNP A2/B1及p21WAF1蛋白在非小细胞肺癌中表达及意义,R734.2
- 半胱胺制剂对新生犊牛早期断奶成功率和免疫功能的影响,S823.5
- 榄香烯体内外抑制小鼠肝癌H22细胞增殖与诱导凋亡作用的研究,R735.7
- SHH-N信号通路及其靶基因N-myc对神经干细胞增殖的影响,R329
- 兔脂肪来源干细胞分离培养及富血小板血浆对其增殖的影响,R329
- 人皮肤成纤维细胞搅拌培养和保存的初步研究,R329
- 常规化疗联合节拍化疗对乳腺癌裸鼠移植瘤的实验研究,R737.9
- 约氏疟原虫CSP抑制肿瘤细胞增殖和存活及其机制研究,R730.5
- 半导体激光和5-氟尿嘧啶缓释植入剂对口腔肿瘤细胞抑制作用实验研究,R739.8
- 大鼠再生肝脏细胞周期的研究,Q253
- 不同免疫方式对雏鸡免疫器官发育、细胞增殖及凋亡相关基因表达的影响,S858.31
- 蟾蜍灵对血管内皮细胞EAhy926增殖和诱导凋亡的研究,R285
- 商陆皂苷甲对BXSB小鼠肾组织PCNA、Caspase-3、Fas和FasL表达的影响,R285.5
- 人参皂苷Rg1对优化培养的人脐血MSCs增殖、分泌功能与ERK、p38信号分子的影响,R285.5
- ROCK表达下调对PDGF介导的血管平滑肌细胞迁移、增殖的调控,R363
中图分类: > 医药、卫生 > 口腔科学 > 口腔内科学 > 牙周病
© 2012 www.xueweilunwen.com
|