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紫花松果菊挥发油成分分析及抗炎抑菌、抗氧化作用研究

作　者: 袁彩红
导　师: 袁艺
学　校: 安徽农业大学
专　业: 植物学
关键词: 紫花松果菊 GC-MS 自由基抗氧化抑菌抗炎
分类号: S567.239
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

紫花松果菊(Echinacea purpurea L.)又名紫锥菊,为菊科松果菊属多年生草本植物,原产于北美和加拿大地区。由于其突出的免疫功能和抗菌消炎、抗病毒等作用而成为一种流行于欧美的免疫促进剂。紫花松果菊有着重要的药用价值。本文以紫花松果菊花序为原料,优化了水蒸气蒸馏法提取紫花松果菊挥发油的提取工艺,运用GC-MS技术对紫花松果菊挥发油化学组分进行分析,并对紫花松果菊挥发油的体外抑菌、体内抗炎及自由基的清除能力进行了研究,旨为紫花松果菊的种植、开发与利用提供理论依据和技术支撑。研究成果如下:1、采用水蒸气蒸馏法提取挥发油,以可能影响紫花松果菊挥发油提取的四个主要因子加水量、提取时间、浸泡时间和颗粒度进行单因素试验,并以提取时间、浸泡时间和颗粒度进行正交试验,筛选紫花松果菊挥发油提取的最佳工艺。结果表明:在研究范围内,花序粒度60目、浸泡2h、提取8h条件下,松果菊挥发油得率最高,为0.17%。主要工艺条件对紫花松果菊得率的影响程度为:颗粒度>提取时间=浸泡时间。2、利用气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)分析了松果菊挥发油的化学组分。结果表明:分离得到36种化合物。其中萜类化合物21种,占挥发油总量的68.29%。芳香族化合物1种,占挥发油总量的6.13%,脂肪族化合物11种,占挥发油总量的22.83%。主要化学成分为反式石竹烯(9.21%),大香叶烯-D(8.78%),δ-杜松烯(8.16%),石竹烯氧化物(7.49%),1-(1,5-二甲基-4-己烯基)-4-甲基苯(6.13%)。3、研究了紫花松果菊挥发油体外抑菌作用。以薰衣草挥发油和山梨酸钾做对照,通过杯碟法研究了紫花松果菊挥发油对常见的霉菌和细菌的抑制作用,并测定了最小抑菌浓度。结果表明:紫花松果菊挥发油对几种细菌均有抑制作用,且对几种细菌抑制能力为紫花松果菊挥发油>山梨酸钾>熏衣草。紫花松果菊挥发油对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度(MIC)分别为:0.63 mg/mL、1.25 mg/mL和2.5mg/mL。紫花松果菊对霉菌抑制作用不明显。4、以薰衣草挥发油和Vc做对照,通过测定对DPPH、过氧化脂质和羟自由基的清除能力,研究了紫花松果菊挥发油的抗氧化作用。结果表明:紫花松果菊挥发油有较强的抗氧化活性,对DPPH的清除能力为:紫花松果菊挥发油>薰衣草精油>Vc;对羟自由基的清除能力为:Vc>薰衣草精油>紫花松果菊挥发油;对脂质过氧化抑制能力为:紫花松果菊挥发油>薰衣草挥发油>Vc。5、通过紫花松果菊挥发油对棉球植入法致大鼠肉芽增生抑制作用及对炎症渗出液中TNF-α以及IL-2和IL-6含量的影响的研究、通过对蛋清致大鼠足肿胀、二甲苯致小鼠耳肿胀等的抑制作用的研究,研究了紫花松果菊挥发油的体内抗炎作用。结果表明:紫花松果菊具有显著的抗炎作用。挥发油各剂量组对二甲苯致小鼠耳肿胀均有不同程度的抑制作用,其中中、高剂量组左耳重及肿胀度在4h时较模型对照组比较有显著性差异(P<0.05)。挥发油各剂量组对蛋清致大鼠足肿胀均有不同程度的抑制作用,能够明显降低足肿胀度,其中低剂量组在注射蛋清2h、3h后较模型对照组有显著性差异(P<0.05);中剂量组在注射蛋清1.5h、3h后较模型对照组有显著性差异(P<0.05);高剂量组在1h较模型对照组有显著性差异,在1.5h、2h、3h后较模型对照组有极显著差异(P<0.01)。表明紫花松果菊挥发油对急性炎症引起的肿胀、渗出有一定的抑制作用。

全文目录

摘要  3-5
ABSTRACT  5-10
文献综述  10-18
  1 紫花松果菊生物学特性及栽培研究  10-12
    1.1 紫花松果菊的生物学特性  10
    1.2 紫花松果菊栽培管理研究  10-11
    1.3 紫花松果菊组织培养研究  11-12
  2 紫花松果菊化学成分研究  12-13
    2.1 紫花松果菊多糖及糖蛋白研究  12
    2.2 紫花松果菊咖啡酸及其衍生物研究  12-13
    2.3 紫花松果菊烷基酰胺类化合物研究  13
    2.4 紫花松果菊挥发油成分研究研究  13
    2.5 紫花松果菊无机元素及氨基酸研究  13
  3 紫花松果菊药理学研究  13-15
    3.1 紫花松果菊免疫作用研究  13-14
    3.2 紫花松果菊抗菌作用研究  14
    3.3 紫花松果菊抗氧化活性研究  14-15
    3.4 紫花松果菊抗炎活性研究  15
  4 植物挥发油提取方法及成分分析方法  15-16
  5 植物挥发油药理作用研究进展  16-17
    5.1 植物挥发油抑菌作用研究  16
    5.2 植物挥发油抗氧化作用研究  16-17
    5.3 植物挥发油抗炎作用研究  17
  6 本研究的目的和意义  17-18
引言  18
材料与方法  18-25
  1 实验材料  18
  2 仪器和试剂  18-19
    2.1 主要仪器  18-19
    2.2 主要试剂和药品  19
  3 试验方法  19-25
    3.1 紫花松果菊挥发油的提取  19-20
      3.1.1 紫花松果菊挥发油提取的单因素试验  19
      3.1.2 紫花松果菊挥发油提取的正交试验  19-20
    3.2 松果菊挥发油成分分析  20
      3.2.1 紫花松果菊挥发油的前期处理  20
      3.2.2 紫花松果菊挥发油的气相色谱-质谱联用分析  20
    3.3 紫花松果菊挥发油体外抑菌实验  20-21
      3.3.1 培养基的制备  20
      3.3.2 菌液的制备  20-21
      3.3.3 紫花松果菊挥发油最低抑菌浓度（MIC）的测定  21
      3.3.4 紫花松果菊挥发油抑菌活力的测定  21
    3.4 紫花松果菊挥发油抗氧化作用的研究  21-22
      3.4.1 紫花松果菊挥发油对 DPPH·清除能力的测定  21
      3.4.2 紫花松果菊挥发油对·OH 清除能力的测定  21
      3.4.3 紫花松果菊挥发油对脂质过氧化抑制能力的测定  21-22
    3.5 紫花松果菊挥发油抗炎作用研究  22-25
      3.5.1 紫花松果菊挥发油对二甲苯致小鼠耳肿胀的抑制作用研究  22-23
      3.5.2 紫花松果菊挥发油对蛋清致大鼠足肿胀的抑制作用研究  23-24
      3.5.3 紫花松果菊挥发油对棉球植入法致大鼠肉芽增生的抑制作用研究及对慢性炎症渗出液中 IL-2、IL-6 及TNF-α的含量的测定  24-25
结果与分析  25-38
  1 紫花松果菊挥发油提取工艺的研究  25-26
    1.1 提取时间对挥发油得率的影响  25
    1.2 加水量对挥发油得率的影响  25
    1.3 浸泡时间对挥发油得率的影响  25
    1.4 颗粒度对挥发油得率的影响  25-26
    1.5 正交试验提取挥发油结果  26
  2 紫花松果菊挥发油成分分析  26-29
  3 紫花松果菊挥发油体外抑菌试验  29-32
    3.1 紫花松果菊挥发油最低抑菌浓度的测定  29-31
      3.1.1 紫花松果菊挥发油对细菌的最低抑菌浓度  29-30
      3.1.2 紫花松果菊挥发油对霉菌的最低抑菌浓度  30-31
    3.2 紫花松果菊挥发油抑菌活性的测定  31-32
      3.2.1 紫花松果菊挥发油对细菌的抑制活性测定  31
      3.2.2 紫花松果菊挥发油对霉菌的抑制活性测定  31-32
  4 紫花松果菊抗氧化作用研究  32-33
    4.1 紫花松果菊挥发油对 DPPH·清除作用  32
    4.2 紫花松果菊挥发油对·OH 清除作用  32
    4.3 紫花松果菊挥发油对脂质过氧化抑制用  32-33
  5 紫花松果菊挥发油抗炎作用研究  33-38
    5.1 紫花松果菊挥发油对二甲苯致小鼠耳肿胀的抑制作用  33-34
    5.2 紫花松果菊挥发油对蛋清致大鼠足肿胀的抑制作用  34-36
    5.3 紫花松果菊挥发油对棉球植入法致大鼠肉芽增生的抑制作用及对慢性炎症渗出液中 IL-2、IL-6 及TNF-α的含量的测定  36-38
讨论  38-40
  1 紫花松果菊挥发油的提取  38
  2 紫花松果菊挥发油成分分析  38
  3 紫花松果菊挥发油体外抑菌作用研究  38-39
  4 紫花松果菊挥发油抗氧化作用研究  39
  5 紫花松果菊挥发油抗炎作用研究  39-40
结论  40-42
参考文献  42-48
致谢  48-49
作者简介  49
发表论文  49

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