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sp600125对乙醛刺激的大鼠肝星状细胞增殖与凋亡以及bcl-2、c-myc和caspase-3蛋白表达的影响
作 者: 唐文
导 师: 蒋明德
学 校: 第三军医大学
专 业: 内科学
关键词: 肝纤维化 肝星状细胞 sp600125 bcl-2 c-myc caspase-3
分类号: R575.2
类 型: 硕士论文
年 份: 2006年
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内容摘要
背景和目的:目前认为肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)的活化与增殖是肝纤维化发生的关键环节。乙醛刺激HSC活化与增殖,是导致酒精性肝纤维化发生的关键因素。近年来研究表明,MAPK(mitogen-activated protein kinase,包括ERk、JNK、P38)是HSC活化与增殖导致肝纤维化发生的主要信号传导通路之一。在过去的研究中,我们用Western blot法检测到,乙醛刺激的肝星状细胞中JNK(c-Jun N-terminalkinase,JNK)磷酸化水平随sp600125(JNK信号传导通路特异性阻断剂)浓度增加而减少。本实验用sp600125处理乙醛刺激的HSC,观察sp600125对HSC增殖与凋亡以及bcl-2、c-myc和caspase-3蛋白表达的影响,进一步探讨酒精性肝纤维化的发生机理。方法:不同浓度sp600125对乙醛刺激的大鼠HSC-T6进行处理后,MTT比色法检测细胞增殖,用Hoechst 33258染色来观察凋亡细胞的形态变化,FCM检测细胞周期分布比例及细胞凋亡率,SABC法检测bcl-2、c-myc、caspase-3蛋白表达。结果:不同浓度的sp600125能抑制乙醛刺激的HSC-T6增殖(F=102.526,P<0.01),并且呈剂量依赖关系(r=-0.928,p<0.01);随着sp600125浓度增加,G0/G1期细胞比例逐渐增高(F=6.335,P<0.01),S期细胞比例逐渐降低(F=39.202,P<0.01),细胞增殖指数逐渐降低(F=7.043,P<0.01);同时,HSC-T6凋亡细胞增加,凋亡率逐渐增高(F=54.834,P<0.01);HSC-T6细胞内bcl-2、c-myc阳性表达率逐渐降低(F值分别为227.084和418.931,P值均<0.01),caspase-3蛋白阳性表达率逐渐增高(F=38.259,P<0.01)。结论:不同浓度sp600125能抑制HSC-T6的增殖,诱导HSC-T6凋亡,其分子机制可能与抑制细胞从G0/G1期向S期转化,下调bcl-2和c-myc蛋白表达,上调caspase-3蛋白表达有关。
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全文目录
英文缩写一览表 4-5 英文摘要 5-7 中文摘要 7-8 论文正文 sp600125对乙醛刺激的大鼠肝星状细胞增殖与凋亡以及bcl-2、c-myc和caspase-3蛋白表达的影响 8-37 前言 8-10 材料与方法 10-14 结果 14-23 讨论 23-26 结论 26-27 致谢 27-28 照片 28-33 参考文献 33-37 文献综述 37-44 参考文献 41-44 研究生期间发表论文 44
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中图分类: > 医药、卫生 > 内科学 > 消化系及腹部疾病 > 肝及胆疾病 > 肝硬变
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