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sp600125对乙醛刺激的大鼠肝星状细胞增殖与凋亡以及bcl-2、c-myc和caspase-3蛋白表达的影响

作 者: 唐文
导 师: 蒋明德
学 校: 第三军医大学
专 业: 内科学
关键词: 肝纤维化 肝星状细胞 sp600125 bcl-2 c-myc caspase-3
分类号: R575.2
类 型: 硕士论文
年 份: 2006年
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内容摘要


背景和目的:目前认为肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)的活化与增殖是肝纤维化发生的关键环节。乙醛刺激HSC活化与增殖,是导致酒精性肝纤维化发生的关键因素。近年来研究表明,MAPK(mitogen-activated protein kinase,包括ERk、JNK、P38)是HSC活化与增殖导致肝纤维化发生的主要信号传导通路之一。在过去的研究中,我们用Western blot法检测到,乙醛刺激的肝星状细胞中JNK(c-Jun N-terminalkinase,JNK)磷酸化水平随sp600125(JNK信号传导通路特异性阻断剂)浓度增加而减少。本实验用sp600125处理乙醛刺激的HSC,观察sp600125对HSC增殖与凋亡以及bcl-2c-myccaspase-3蛋白表达的影响,进一步探讨酒精性肝纤维化的发生机理。方法:不同浓度sp600125对乙醛刺激的大鼠HSC-T6进行处理后,MTT比色法检测细胞增殖,用Hoechst 33258染色来观察凋亡细胞的形态变化,FCM检测细胞周期分布比例及细胞凋亡率,SABC法检测bcl-2、c-myc、caspase-3蛋白表达。结果:不同浓度的sp600125能抑制乙醛刺激的HSC-T6增殖(F=102.526,P<0.01),并且呈剂量依赖关系(r=-0.928,p<0.01);随着sp600125浓度增加,G0/G1期细胞比例逐渐增高(F=6.335,P<0.01),S期细胞比例逐渐降低(F=39.202,P<0.01),细胞增殖指数逐渐降低(F=7.043,P<0.01);同时,HSC-T6凋亡细胞增加,凋亡率逐渐增高(F=54.834,P<0.01);HSC-T6细胞内bcl-2、c-myc阳性表达率逐渐降低(F值分别为227.084和418.931,P值均<0.01),caspase-3蛋白阳性表达率逐渐增高(F=38.259,P<0.01)。结论:不同浓度sp600125能抑制HSC-T6的增殖,诱导HSC-T6凋亡,其分子机制可能与抑制细胞从G0/G1期向S期转化,下调bcl-2和c-myc蛋白表达,上调caspase-3蛋白表达有关。

全文目录


英文缩写一览表  4-5
英文摘要  5-7
中文摘要  7-8
论文正文 sp600125对乙醛刺激的大鼠肝星状细胞增殖与凋亡以及bcl-2c-myccaspase-3蛋白表达的影响  8-37
  前言  8-10
  材料与方法  10-14
  结果  14-23
  讨论  23-26
  结论  26-27
  致谢  27-28
  照片  28-33
  参考文献  33-37
文献综述  37-44
  参考文献  41-44
研究生期间发表论文  44

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中图分类: > 医药、卫生 > 内科学 > 消化系及腹部疾病 > 肝及胆疾病 > 肝硬变
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