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分子印迹聚合物及膜分离技术在异丙酚生物样品前处理中的应用研究

作　者: 李魏嶙
导　师: 李莉
学　校: 新疆医科大学
专　业: 药学
关键词: 异丙酚 分子印迹 膜分离 光纤 荧光
分类号: R96
类　型: 硕士论文
年　份: 2008年
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内容摘要


目的:制备异丙酚分子印迹固相萃取柱和适合前处理异丙酚血样的膜分离装置,建立快速、连续、实用的异丙酚血样前处理方法,并把膜分离装置和异丙酚分子印迹固相萃取柱结合起来,对之前课题组研制的异丙酚光纤荧光检测系统系统进行改进。方法:分别用热聚合法和紫外光照射法合成异丙酚分子印迹聚合物,用相转化法和紫外光引发原位聚合法制备异丙酚分子印迹膜,考察聚合物的性能、膜的形态、聚合反应机理及印迹聚合物对血浆中异丙酚的吸附;用所得聚合物制备分子印迹固相萃取柱,优化萃取柱的活化、淋洗和洗脱条件,比较了C18柱和分子印迹柱对异丙酚血浆样品的前处理效果;利用膜分离的方法来分离全血中的异丙酚,筛选出合适的膜、萃取液和泵速;把膜分离、分子印迹固相萃取和课题组之前研究的异丙酚光纤荧光检测系统结合起来,分析异丙酚的血药浓度。结果:(1)印迹聚合物选择性的结合异丙酚;紫外光照射法制得的印迹聚合物对异丙酚的结合量高于热聚合法制得的印迹聚合物;聚合温度越高,聚合反应进行的越完全,相应的聚合物的溶胀越差,表现为识别能力的降低;异丙酚和功能单体甲基丙烯酸以1:1的比例、氢键的方式缔合;当紫外灯离印迹膜5cm时,预聚溶液快速、完整的成膜;印迹聚合物从血浆中吸附出了的部分异丙酚。(2)以正己烷为活化剂,正己烷:甲苯(9:1)为淋洗剂,甲醇为洗脱剂后,分子印迹柱处理异丙酚样品的累计回收率高达99.94%;相比于C18固相萃取柱来说,MIP作为SPE的萃取材料前处理系列浓度的异丙酚血样,其线性和准确性都较好。(3)利用膜分离的方法来萃取全血中异丙酚的过程中,异丙酚血样浓度在1～20μg.ml-1范围内,选用聚醚砜超滤膜,血浆为透析液,5rpm的泵速和2min的透析时间,透析的平均回收率为25.50%,SD为0.54%。(4)选择100mg的聚合物量和5bar的进样压力在改进的异丙酚光纤荧光检测系统上分析全血中异丙酚的浓度,每分析一份样品仅需4.8分钟。结论:膜分离装置结合分子印迹固相萃取柱可以在线、快速的前处理异丙酚的全血样品,对血液无“损伤”,这对异丙酚光纤荧光检测系统来说是一个巨大的改进。

全文目录


摘要  8-9
Abstract  9-11
前言  11-13
一 异丙酚分子印迹聚合物及分子印迹膜的制备  13-26
  1 试剂与仪器  13
  2 实验方法  13-16
    2.1 分子印迹聚合物的合成  13-14
    2.2 分子印迹膜的制备  14-15
    2.3 结合性实验  15
    2.4 印迹聚合物对底物的选择性  15
    2.5 聚合物溶胀实验  15
    2.6 聚合反应机理的探究  15
    2.7 分子印迹膜的表征  15-16
    2.8 紫外光的强度对成膜效果的影响  16
    2.9 印迹聚合物对人血浆中异丙酚吸附的考察  16
  3 结果与讨论  16-26
二 异丙酚分子印迹固相萃取柱的制备及其萃取条件的优化  26-32
  1 试剂及仪器  26
  2 实验方法  26-28
    2.1 制备分子印迹固相萃取柱  26
    2.2 固相萃取操作  26
    2.3 标准曲线的制备  26-27
    2.4 分子印迹固相萃取条件的选择  27-28
    2.5 MISPE与C18柱的固相萃取效果比较  28
    2.6 直接上样实验  28
  3 结果与讨论  28-32
三 利用膜分离技术来前处理异丙酚全血样品  32-40
  1 试剂和仪器  32-33
  2 实验方法  33-35
    2.1 自制膜分离装置  33
    2.2 不同浓度异丙酚甲醇溶液的配制  33
    2.3 不同浓度异丙酚血样的制备  33
    2.4 萃取过程及样品测定  33
    2.5 膜的选择  33-34
    2.6 萃取剂的选择  34
    2.7 萃取时间和泵速的选择  34
    2.8 对不同浓度血样的萃取  34
    2.9 液液萃取－高效液相色谱法测萃取回收率  34-35
  3 结果与讨论  35-40
四 异丙酚光纤荧光检测系统的改进  40-44
  1 材料和仪器  40
  2 实验方法  40-41
    2.1 样品的测定  40-41
    2.2 分子印迹聚合物量和真空泵压力的选择  41
    2.3 标准曲线的制备  41
    2.4 回收率实验  41
    2.5 精密度实验  41
  3 结果  41-42
  4 讨论  42-44
小结  44-45
致谢  45-46
参考文献  46-50
综述  50-69
攻读硕士学位期间发表的学术论文  69-70
导师评阅表  70

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中图分类: > 医药、卫生 > 药学 > 药理学
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