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两种链球菌生物学特性及其与猪血清白蛋白黏附的研究

作　者: 郭会田
导　师: 郭定宗
学　校: 华中农业大学
专　业: 临床兽医学
关键词: 猪链球菌2型马链球菌兽疫亚种血清白蛋白黏附
分类号: S852.61
类　型: 硕士论文
年　份: 2008年
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内容摘要

猪链球菌(Streptococcus suis)是一种引起猪败血症、脑膜炎症、心内膜炎和关节炎的主要病原,也是一种重要的人畜共患病病原。以前我国发现的病原主要是马链球菌兽疫亚种。20世纪90年代以来,其他种类的猪链球菌病被不断报道,其中尤以猪链球菌2型感染的发生较多,曾在局部地区引起流行。细菌对宿主组织的黏附是细菌定殖和发展成感染性疾病的第一步,可最终导致宿主菌血症、败血症甚至脑膜炎。研究证明,猪链球菌能黏附很多种宿主细胞,如上皮细胞、吞噬细胞、脑微血管内皮细胞。血清白蛋白可与人的C群和G群链球菌黏附,并可以增强细菌毒力、增加细菌的生长速度。有研究表明血清白蛋白与细菌黏附后可以为其提供营养。本试验中,我们研究了马链球菌兽疫亚种和猪链球菌2型基本生物学特性的差异;制备了两种链球菌的多克隆抗体,并检测其抗体滴度皆为1:512;采用ELISA的方法研究了两种链球菌与血清白蛋白的黏附差异。结果表明:两种链球菌生物学特性存在很大差异;两种链球菌与血清白蛋白的黏附力受各种因素的影响;不同动物的血清白蛋白与细菌的黏附力不同;两种链球菌黏附血清白蛋白的配基很可能都是蛋白质性质的;马链球菌兽疫亚种与猪链球菌2型相比,前者同血清白蛋白的黏附力更强。为以后进一步研究两种链球菌的致病机理奠定基础,并提供理论依据。本试验对两种链球菌进行了多方面的比较分析,为以后鉴别两种链球菌提供了理论和技术支持;用间接ELISA法检测两种链球菌与血清白蛋白的黏附,是本试验的主要创新点,可为以后类似研究提供简便、快捷的试验技术。

全文目录

摘要  6-7
Abstract  7-9
缩略词表(Abbreviation)  9-10
1 文献综述  10-32
  1.1 马链球菌兽疫亚种的研究进展  10-17
    1.1.1 流行病学  10-11
    1.1.2 毒力因子  11-15
    1.1.3 逃避宿主免疫的可能机制  15-17
  1.2 猪链球菌2型的研究进展  17-24
    1.2.1 流行病学  17-18
    1.2.2 毒力因子  18-22
    1.2.3 致病机理  22-24
  1.3 血清白蛋白的研究进展  24-32
    1.3.1 血清白蛋白的起源及进化  25
    1.3.2 血清白蛋白的结构  25-27
    1.3.3 血清白蛋白的生理功能  27-32
2 两种链球菌生物学特性的比较  32-42
  2.1 材料与方法  32-35
    2.1.1 菌株  32
    2.1.2 试验动物  32
    2.1.3 主要试剂  32
    2.1.4 主要仪器  32-33
    2.1.5 主要培养基的制备  33
    2.1.6 马链球菌兽疫亚种和猪链球菌2型的培养  33
    2.1.7 革兰氏染色  33
    2.1.8 生化鉴定  33-34
    2.1.9 生长曲线的测定  34
    2.1.10 溶血活性的测定  34
    2.1.11 疏水性的测定  34-35
    2.1.12 多克隆抗体的制备  35
  2.2 结果与分析  35-40
    2.2.1 马链球菌兽疫亚种和猪链球菌2型的培养特性  35-36
    2.2.2 革兰氏染色特性  36-37
    2.2.3 生化反应的特性  37-38
    2.2.4 生长曲线的特性  38-39
    2.2.5 溶血活性测定的结果  39
    2.2.6 疏水性鉴定结果  39
    2.2.7 多克隆抗体效价的测定结果  39-40
  2.3 讨论  40-42
3 马链球菌兽疫亚种与猪血清白蛋白的黏附  42-50
  3.1 材料与方法  42-45
    3.1.1 菌种来源  42
    3.1.2 主要试剂  42
    3.1.3 主要仪器  42-43
    3.1.4 菌体的制备  43
    3.1.5 用ELISA检测马链球菌兽疫亚种与猪血清白蛋白黏附的方法  43
    3.1.6 不同浓度马链球菌兽疫亚种与猪血清白蛋白的黏附  43-44
    3.1.7 马链球菌兽疫亚种与不同浓度猪血清白蛋白的黏附  44
    3.1.8 不同温度时马链球菌兽疫亚种与猪血清白蛋白的黏附  44
    3.1.9 不同时间内马链球菌兽疫亚种与猪血清白蛋白的黏附  44
    3.1.10 抑制性试验  44
    3.1.11 不同动物血清白蛋白与马链球菌兽疫亚种的黏附  44
    3.1.12 数据处理  44-45
  3.2 结果与分析  45-48
    3.2.1 马链球菌兽疫亚种浓度变化对OD_(450)的影响  45
    3.2.2 猪血清白蛋白浓度变化对OD_(450)的影响  45-46
    3.2.3 孵育温度对OD_(450)的影响  46
    3.2.4 孵育时间对OD_(450)的影响  46-47
    3.2.5 不同抑制剂对OD_(450)的影响  47-48
    3.2.6 不同动物血清白蛋白与马链球菌兽疫亚种黏附的差异  48
  3.3 讨论  48-50
4 猪链球菌2型与血清白蛋白的黏附  50-60
  4.1 材料与方法  50-52
    4.1.1 菌种来源  50
    4.1.2 主要试剂  50-51
    4.1.3 主要仪器  51
    4.1.4 菌体的制备  51
    4.1.5 用ELISA法检测猪链球菌2型与猪血清白蛋白黏附的方法  51
    4.1.6 不同浓度猪链球菌2型与猪血清白蛋白的黏附  51
    4.1.7 猪链球菌2型与不同浓度猪血清白蛋白的黏附  51
    4.1.8 不同温度时猪链球菌2型与猪血清白蛋白的黏附  51-52
    4.1.9 不同时间内猪链球菌2型与猪血清白蛋白的黏附  52
    4.1.10 抑制性试验  52
    4.1.11 不同动物血清白蛋白与猪链球菌2型的黏附  52
    4.1.12 数据处理  52
  4.2 结果与分析  52-56
    4.2.1 猪链球菌2型浓度变化对OD_(450)的影响  52-53
    4.2.2 猪血清白蛋白浓度变化对OD_(450)的影响  53-54
    4.2.3 孵育温度对OD_(450)的影响  54
    4.2.4 孵育时间对OD_(450)的影响  54-55
    4.2.5 不同抑制剂对OD_(450)值的影响  55-56
    4.2.6 不同动物血清白蛋白与猪链球菌2型黏附的差异  56
  4.3 讨论  56-60
5 结论  60-62
参考文献  62-74
致谢  74-76
附录  76

两种链球菌生物学特性及其与猪血清白蛋白黏附的研究

内容摘要

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