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久效磷对金鱼（Carassius auratus）的遗传毒性研究

作　者: 程晓洁
导　师: 汝少国
学　校: 中国海洋大学
专　业: 海洋生物学
关键词: 久效磷 金鱼 遗传毒性 DNA损伤
分类号: X174
类　型: 硕士论文
年　份: 2008年
下　载: 103次
引　用: 4次
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内容摘要


久效磷能够诱导雄性金鱼卵黄原蛋白的产生,具有环境雌激素效应和生殖毒性,但关于久效磷遗传毒性的研究报道还很少。本文以金鱼(Carassius Auratus)为试验对象,研究了久效磷对金鱼DNA的损伤,从久效磷导致DNA损伤的类型、导致DNA氧化损伤的量、对抗氧化酶的影响以及对端粒DNA的损伤四个方面探讨了久效磷对金鱼的DNA损伤的机理,为筛选农药的遗传毒性提供理论依据。0.01、0.10和1.00 mg/L久效磷暴露金鱼24 h,金鱼的外周血细胞和肝细胞DNA的损伤与对照相比显著升高;暴露48 h时损伤达到峰值;暴露96 h,损伤有所减轻;1周后损伤降到最低,但与对照相比仍存在极显著差异。在相同的暴露时间下,金鱼外周血细胞DNA损伤随着久效磷暴露浓度的升高而加重,具有剂量-效应关系。通过不同pH条件下的单细胞凝胶电泳和在电泳中添加EndoⅢ和FPG酶处理发现:久效磷暴露48 h,导致了金鱼外周血细胞和肝细胞DNA单链断裂、双链断裂,产生碱不稳定位点,而碱不稳定位点的大量产生是DNA损伤的主要类型;久效磷可以导致金鱼外周血细胞和肝细胞DNA中氧化嘧啶和嘌呤的量显著升高。久效磷暴露可以造成金鱼外周血和肝脏氧化压力的升高。金鱼外周血GPH-Px随着暴露时间延长先降低再升高,96 h达到峰值;肝脏的GPH-Px活性变化趋势也是先降低再升高,在1周达到峰值。金鱼外周血SOD活性无显著变化;肝脏的SOD活性先降低再升高,1周达到峰值。外周血MDA含量24 h降低,48 h升高达到峰值,随后逐渐降低;而肝脏MDA含量24 h显著升高并达到峰值,随后逐渐升高。久效磷暴露48 h可以导致金鱼外周血红细胞端粒DNA的损伤,并且随着暴露浓度的增加,端粒DNA损伤加重,而端粒对氧化损伤比较敏感,又进一步佐证了久效磷导致DNA损伤主要为氧化损伤。综上所述,久效磷对金鱼具有遗传毒性作用,造成了金鱼外周血细胞和肝细胞DNA的损伤,DNA的损伤类型为单链断裂、双链断裂和碱不稳定位点,且碱不稳定位点为久效磷导致DNA损伤的主要形式;久效磷导致了金鱼氧化嘌呤和嘧啶量的显著增加,说明其造成金鱼DNA的氧化损伤;久效磷可以导致金鱼外周血和肝脏氧化压力的升高;同时,久效磷暴露48 h能够导致金鱼外周血端粒的损伤,而端粒对氧化损伤比较敏感,因此,本文研究结果表明久效磷对金鱼DNA的损伤主要为氧化损伤。

全文目录


摘要  4-6
Abstract  6-11
前言  11-12
1 有机磷农药的遗传毒性研究进展  12-26
  1.1 有机磷农药污染现状  12-15
    1.1.1 有机磷农药概况及使用现状  12-14
    1.1.2 有机磷农药对水体的污染  14-15
  1.2 有机磷农药遗传损伤的类型  15-17
    1.2.1 基因突变  15
    1.2.2 染色体损伤  15-16
    1.2.3 DNA 损伤  16-17
  1.3 有机磷农药遗传毒性检测方法进展  17-18
    1.3.1 DNA 链断裂检测方法  17
    1.3.2 荧光原位杂交技术  17-18
    1.3.3 RAPD 技术  18
  1.4 主要有机磷农药遗传毒性研究进展  18-20
    1.4.1 甲基对硫磷  18-19
    1.4.2 甲胺磷  19
    1.4.3 久效磷  19-20
  1.5 有机磷农药遗传毒性机制的研究  20-21
    1.5.1 氧化损伤  20-21
    1.5.2 烷基化  21
  1.6 已检测具有遗传毒性作用的有机磷农药  21-23
  1.7 研究展望  23-24
    1.7.1 有机磷农药遗传毒性机制的研究  23
    1.7.2 模式动物的开发  23
    1.7.3 开展现场监测  23
    1.7.4 发展遗传毒物的筛选标准化方法  23-24
  1.8 本课题研究内容设计  24-26
2 久效磷对金鱼DNA 的损伤  26-35
  2.1 材料与方法  26-28
    2.1.1 试验动物  26
    2.1.2 试验药品和仪器  26-27
    2.1.3 试验方法  27-28
    2.1.4 数据处理  28
  2.2 结果与分析  28-32
    2.2.1 久效磷对金鱼外周血DNA 的损伤  28-29
    2.2.2 久效磷对金鱼肝脏DNA 的损伤  29-32
  2.3 讨论  32-33
  2.4 小结  33-35
3 久效磷对金鱼DNA 损伤机理的初步研究  35-51
  3.1 材料与方法  36-39
    3.1.1 试验动物  36
    3.1.2 试验药品和仪器  36
    3.1.3 试验方法  36-39
    3.1.4 数据处理  39
  3.2 结果与分析  39-47
    3.2.1 不同pH 条件下久效磷对外周血和肝脏DNA 的损伤  39-41
    3.2.2 Endo Ⅲ和FPG 处理条件下，久效磷对外周血和肝脏DNA的损伤  41-42
    3.3.3 久效磷对金鱼外周血和肝脏GSH-Px、SOD 活性和MDA 含量的影响  42-47
  3.3 讨论  47-49
  3.4 小结  49-51
4 久效磷对金鱼端粒DNA 的损伤  51-58
  4.1 材料与方法  51-53
    4.1.1 试验动物  51
    4.1.2 试验药品和仪器  51-52
    4.1.3 试验方法  52-53
  4.2 结果与分析  53-56
  4.3 讨论  56-57
  4.4 小结  57-58
参考文献  58-65
致谢  65

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中图分类: > 环境科学、安全科学 > 环境科学基础理论 > 环境生物学 > 环境动物学
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