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椒目油对支气管哮喘大鼠气道黏液高分泌的影响

作　者: 王雪芹
导　师: 宋康
学　校: 浙江中医药大学
专　业: 中西医结合临床
关键词: 支气管哮喘 椒目油 黏液高分泌 杯状细胞 EGFR IL-13 IL-4
分类号: R285.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
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内容摘要


目的通过建立支气管哮喘大鼠模型,观察椒目油对哮喘大鼠气道黏液高分泌过程中杯状细胞(goblet cell,GC)数量、表皮生长因子受体(epidermal growth factorreceptor,EGFR)表达及血清中IL-13、IL-4水平的影响,从而探讨其对哮喘大鼠气道黏液高分泌作用的机制。方法①选取清洁级雄性SD大鼠32只,体重200±20g,随机分成4组:空白对照组、模型对照组(简称模型组)、强的松阳性对照组(简称强的松组)、椒目油治疗组(简称椒目油组),每组各8只。②于实验第1天、第8天取0.1%卵白蛋白氢氧化铝凝胶混悬液1mL致敏大鼠,采取多点注射方式:腹腔0.4ml,两后足跖皮下各0.05ml,双腹股沟皮下各0.05ml,双侧胸部,颈部及背部皮下各0.1ml。空白对照组以生理盐水代替OVA注射。③第13天起开始灌胃,一日一次,连续5天,空白对照组和模型组予生理盐水10ml/kg/d;强的松组予强的松10mg/kg/d;椒目油组予椒目油751.9mg/kg/d。④于第15、16、17天给药一小时后,将各组大鼠分别置于30×40×40cm~3大小的玻璃容器中,以1%OVA生理盐水溶液雾化攻击20分钟,诱发哮喘,空白对照组以生理盐水代替OVA雾化,各组大鼠于雾化攻击48小时后处死。⑤血清离心处理后取上清液酶联免疫吸附法(ELISA)测定IL-13、IL-4水平。⑥右肺组织行苏木素-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色观察一般病理表现、阿尔辛蓝-过碘酸雪夫氏(alcian blue-periodic acid-schiff,AB-PAS)染色观察杯状细胞及免疫组化检测EGFR表达。⑦采用SPSS15.0统计软件对实验数据进行统计处理。结果椒目油组和强的松组血清IL-13、IL-4水平和杯状细胞比值与模型组相比均有不同程度降低(P＜0.01或P＜0.05);两组大鼠气道上皮细胞胞浆EGFR表达平均光密度与模型组比较其差异均无统计学意义(P均＞0.05);肺组织病理图片显示椒目油组和强的松组大鼠气道炎症及杯状细胞增生和(或)化生较模型组均明显减轻,杯状细胞增生和(或)化生仅存在于大气道,未见黏液潴留。结论椒目油对哮喘大鼠气道黏液高分泌具有一定的干预作用,其可能机制为:椒目油通过降低哮喘大鼠血清IL-13、IL-4水平,减轻气道炎症,抑制杯状细胞增生和(或)化生,减少杯状细胞数量,从而减少黏蛋白存储量,减少黏液分泌。但是椒目油无明显抑制哮喘大鼠气道上皮细胞胞浆EGFR表达的作用。

全文目录


中文摘要  5-7
ABSTRACT  7-9
前言  9-11
一、材料和方法  11-16
  (一) 实验材料  11-12
    1.实验室  11
    2.主要仪器  11
    3.主要试剂  11-12
    4.实验药物  12
    5.实验动物  12
  (二) 实验方法  12-16
    1.哮喘大鼠模型的建立  12
    2.实验分组及给药处理  12
    3.标本收集和制备  12-13
    4.病理组织学观察  13-16
  (三) 统计学分析方法  16
二、结果  16-18
  (一) 病理形态学变化  16-17
    1.一般病理观察  16
    2.AB-PAS染色杯状细胞观察  16-17
  (二) 各组大鼠EGFR表达水平及图像分析结果  17
  (三) 各组大鼠血清IL-13、IL4水平的变化  17-18
三、分析与讨论  18-25
  (一) 中医对哮喘痰饮伏肺及其治疗的认识  18-19
  (二) 现代医学对哮喘气道粘液高分泌的认识  19-20
  (三) 哮喘动物模型的评价  20-21
  (四) 椒目及椒目油成分研究  21-22
    1.椒目及椒目油成分及药理  21
    2.CO_2超临界流体萃取器提取椒目芳香油提取工艺研究  21-22
  (五) 椒目油对哮喘大鼠肺组织、气道杯状细胞、EGFR及IL-13和IL-4的影响  22-25
    1.椒目油对支气管肺组织形态变化的影响  22
    2.椒目油对杯状细胞的影响  22-23
    3.椒目油对EGFR表达的影响  23-24
    4.椒目油对血清IL-13水平的影响  24
    5.椒目油对血清IL-4水平的影响  24-25
  (六) 小结  25
四、结论  25-26
参考文献  26-29
附图  29-31
致谢  31-32
文献综述  32-38

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中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中药学 > 中药药理学 > 中药实验药理
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