学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

黄连麦冬提取物对体外培养大鼠结膜杯状细胞增殖作用及有效成分配伍筛选的实验研究

作　者: 朱培庆
导　师: 段俊国
学　校: 成都中医药大学
专　业: 中西医结合临床
关键词: 大鼠结膜杯状细胞(RCj-GCs) 黄连 麦冬 提取物 干预 配伍 增殖 细胞周期 粘蛋白
分类号: R285.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
下　载: 60次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载
 

内容摘要


目的：(1)建立SD大鼠结膜杯状细胞(Rat Conjunctival Goblet Cells,RCj-GCs)体外常规培养模型；(2)观察黄连麦冬五种提取物干预RCj-GCs 48h的增殖活性；(3)观察有效成分配伍对RCj-GCs分别干预24h和48h的增殖活性；(4)观察有效成分配伍对RCj-GCs干预48h细胞周期的影响；(5)观察有效成分配伍对RCj-GCs干预48h细胞粘蛋白分泌的影响。方法：(1)组织块原代培养法培养细胞并用组化和免疫组化鉴定细胞；(2)将五种实验药：黄连多糖(CP)、黄连生物碱(CA)、麦冬多糖(DLP)、麦冬高异黄酮(DLI)、麦冬皂苷(DLS),分别溶解并稀释为8个实验组,终浓度分别为10g/ml、5 mg/ml、1mg/ml、0.2 mg/ml、0.04 mg/ml、0.008 mg/ml、0.0016 mg/ml、0.00032 mg/ml,通过MTT法检测8个组对RCj-GCs干预48h的增殖活性；(3)MTT法检测有效成分配伍对RCj-GCs干预24h和48h的增殖活性；(4)流式细胞仪检测配伍干预RCj-GCs48h细胞周期的变化；(5)以考马斯亮蓝G-250(CBBG)染色法检测配伍干预RCj-GCs48h细胞粘蛋白分泌量的变化。结果：(1)原代培养7-10天能够培养出RCj-GCs,经AB/PAS双染和免疫组化鉴定为RCj-GC5。(2)CP1mg/ml、DLI1mg/ml和DLP0.00032mg/ml对RCj-GCs增殖活性明显高于对照组(P<0.01)。(3)配伍各组对RCj-GCs干预24h增殖活性明显高于阴性对照组和阳性对照组(P<0.01)；组Ⅰ、Ⅲ和Ⅳ对RCj-GCs干预48h的增殖活性明显高于阴性对照组(P<0.01)；组Ⅰ对RCj-GCs干预48h的增殖活性明显高于阳性对照组(P<0.01)；组Ⅲ对RCj-GCs干预48h的增殖活性明显高于阳性对照组(P<0.05)。(4)各个配伍组均未明显促RCj-GCs凋亡；组ⅠG2/M期和组ⅢS期的细胞比例高于阴性对照组(P<0.05)；组ⅠS期细胞比例高于阴性对照组(P<0.01)；组ⅠG2/M期细胞比例高于阳性对照组(P<0.05)。(5)各配伍组干预RCj-GCs48h细胞粘蛋白分泌量与对照组比较无明显差异(P>0.05)。结论：(1)体外成功建立RCj-GCs常规培养模型,并鉴定为RCj-GCs; (2) CP1mg/ml、DLI1mg/ml和DLP0.00032mg/ml对RCj-GCs有良好的促增殖作用；(3)配伍组Ⅰ和Ⅲ有良好的促RCj-GCs增殖的作用；(4)配伍组Ⅰ和Ⅲ能够促进细胞有丝分裂和增殖；(5)配伍各组对细胞粘蛋白的分泌无明显抑制作用。

全文目录


中文摘要  5-6
Abstract  6-8
缩略语对照表  8-9
1. 前言  9-14
  1.1 研究背景  9-13
    1.1.1 干眼的流行病学研究概况  9
    1.1.2 结膜杯状细胞的研究概况  9-10
    1.1.3 黄连的功效及药理作用研究概况  10-11
    1.1.4 黄连对眼前节疾病的治疗研究概况  11-12
    1.1.5 麦冬的功效及药理作用研究概况  12
    1.1.6 麦冬治疗干眼的研究概况  12-13
  1.2 研究目的及意义  13-14
2 黄连麦冬提取物有效成分的计算、溶解与稀释  14-16
  2.1 黄连麦冬提取物有效成分的计算、溶解与稀释  14-16
    2.1.1 实验材料  14
    2.1.2 实验方法  14-15
    2.1.3 实验结果  15-16
3. RCJ-GCS体外常规培养模型的建立  16-22
  3.1 RCJ-GCS体外常规培养模型的建立  16-22
    3.1.1 实验材料  16-18
    3.1.2 实验方法  18-19
    3.1.3 实验结果与分析  19-22
4 MTT法检测不同浓度黄连麦冬提取物干预RCJ-GCS48H细胞的增殖活性  22-29
  4.1 MTT法检测不同浓度黄连麦冬提取物干预RCJ-GCS48H细胞的增殖活性  22-29
    4.1.1 实验材料  22-23
    4.1.2 实验方法  23
    4.1.3 实验数据统计分析方法  23-24
    4.1.4 实验结果与分析  24-29
5 MTT法检测黄连麦冬提取物有效成分配伍分别干预RCJ-GCS24H和48H细胞的增殖活性  29-34
  5.1 MTT法检测黄连麦冬提取物有效成分配伍分别干预RCJ-GCS24H和48H细胞的增殖活性  29-34
    5.1.1 实验材料  29-30
    5.1.2 实验设计  30
    5.1.3 实验方法  30-31
    5.1.4 实验结果与分析  31-34
6. 流式细胞仪检测黄连麦冬提取物有效成分配伍干预RCJ-GCS48H细胞周期的变化  34-38
  6.1 流式细胞仪检测黄连麦冬提取物有效成分配伍干预RCJ-GCS48H细胞周期的变化  34-38
    6.1.1 实验材料  34-35
    6.1.2 实验方法  35
    6.1.3 实验结果与分析  35-38
7. BRADFORD蛋白质定量法检黄连麦冬有效成分测配伍干预RCJ-GCS48H细胞粘蛋白分泌量的变化  38-41
  7.1 BRADFORD蛋白质定量法检测黄连麦冬有效成分配伍干预RCJ-GCS48H细胞粘蛋白分泌量的变化  38-41
    7.1.1 实验材料  38
    7.1.2 实验原理与方法  38-39
    7.1.3 实验结果与分析  39-41
8. 讨论  41-48
  8.1 中医对干眼病因病机的认识与探讨  41-43
  8.2 西医对干眼病因及发病机制的认识与探讨  43-44
  8.3 中医和西医对干眼治疗现状的认识与探讨  44
  8.4 RCJ-GCS体外常规培养模型建立的评价与探讨  44-45
  8.5 黄连麦冬提取物对RCJ-GCS增殖作用机制的初步探讨  45-46
  8.6 黄连麦冬有限成分不同配伍对RCJ-GCS增殖作用机制的初步探讨  46
  8.7 黄连麦冬有限成分不同配伍对RCJ-GCS细胞周期作用机制的初步探讨  46-47
  8.8 黄连麦冬有限成分不同配伍对RCJ-GCS细胞粘蛋白分泌功能影响的探讨  47-48
9. 结论  48-49
10. 问题与展望  49-50
11. 参考文献  50-53
附: 1. 综述  53-71
  1.1 黄连和麦冬提取物的药理作用研究进展  53-59
    1.1.1 黄连提取物的药理作用研究进展  53-56
    1.1.2 麦冬提取物的药理作用研究进展  56-59
  1.2 干眼治疗的研究进展  59-63
    1.2.1 干眼的西医治疗研究进展  59-62
    1.2.2 干眼的中医治疗研究进展  62-63
  1.3 结膜杯状细胞培养的研究进展  63-64
  参考文献  64-71
附录  71-72
致谢  72-73

相似论文

  1. Bt毒素寡聚体形成与脂筏的关系以及钙粘蛋白的免疫检测技术探索,S476.1
  2. 棉铃虫Cry1Ac抗性相关钙粘蛋白基因缺失突变的适合度代价,S435.622.3
  3. 上皮钙粘蛋白启动子-160 C/A位点多态性与鼻咽癌危险性分析,R739.63
  4. 乳腺癌前哨淋巴结活检及其微转移的研究,R737.9
  5. 异粘蛋白(metadherin)在非小细胞肺癌中的表达及相关性研究,R734.2
  6. 家兔胚胎分割的研究,S829.1
  7. 鼠层粘蛋白α5链G结构域基因的克隆和表达的研究,Q78
  8. 抵当汤合小陷胸汤化裁方对实验性肺间质纤维化大鼠血清层粘蛋白与血清Ⅲ型胶原影响的实验研究,R285
  9. 糖尿病视网膜病变细胞外间质成分和细胞粘附分子的相关性探讨,R587.2
  10. 半肝交替照射对杂种犬肝脏损伤与修复的实验研究及中药对此的干预效应,R657.3
  11. E-钙粘蛋白在口腔粘膜癌前病变、鳞癌中的表达,R739.8
  12. 丙烯醛诱导的气道粘蛋白分泌中寡糖表达及福多斯坦治疗作用的研究,R56
  13. 肝脏纤维化血清学检测与肝脐病理的对照研究,R575.2
  14. 胸膜纤维化的发生机制与其防治的研究,R561
  15. 增损甘露消毒丹对肝纤维化大鼠血清HA、LN影响的实验研究,R285.5
  16. 脂联素对高糖环境下HCM增殖及Caspase-3、T-钙粘蛋白表达的影响,R587.1
  17. 脂联素和T-钙粘蛋白与实验性糖尿病大鼠肾脏病变的关系,R587.2
  18. 宫颈鳞癌中E-钙粘蛋白和α、γ-连环素的表达及研究,R737.33
  19. E-钙粘蛋白在肝细胞肝癌血管生成拟态中的表达,R735.7
  20. MUC2、MUC5AC和绒毛蛋白在胃癌及癌前病变中的表达,R735.2
  21. S100A4基因、蛋白和钙粘蛋白-E在膀胱移行细胞癌中的转录表达及意义,R737.14

中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中药学 > 中药药理学 > 中药实验药理
© 2012 www.xueweilunwen.com