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维生素A和孟鲁司特对哮喘大鼠气道炎症细胞及Th1/Th2平衡的影响

作 者: 罗明鑫
导 师: 李晓红
学 校: 安徽医科大学
专 业: 儿科学
关键词: 维生素A 孟鲁司特 支气管哮喘 炎症细胞 肿瘤坏死因子 γ-干扰素
分类号: R725.6
类 型: 硕士论文
年 份: 2011年
下 载: 5次
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内容摘要


目的:通过建立哮喘大鼠模型,以口服维生素A孟鲁司特作为干预因素,比较不同时间大鼠肺泡灌洗液(BALF)中白细胞总数及各类细胞数,同时检测大鼠血清及肺组织中的肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素4(IL-4)和γ-干扰素(IFN-γ),从而为维生素A对支气管哮喘的防治提供理论根据。方法:将40只成年雌性SD级大鼠随机分为A、B、C、D四组,A组为正常对照组,B组为哮喘模型组,C组为口服孟鲁司特(Mo)组,D组为口服维生素A(Vit A)组,每组各10只。在实验第1天和第8天,将致敏液0.1%的鸡卵白蛋白(OVA)分别注射入B、C、D三组大鼠的腹腔中,剂量均为1.0ml/只/次。实验第15天,对以上三组大鼠均予1%OVA溶液雾化吸入进行激发,30分钟/次/日,持续两周,对照组则用生理盐水替代,注射和雾化部位及量均与以上三组相同。从实验第29天开始,B、C、D三组大鼠每天上午照常给予1%OVA雾化吸入,下午对C组大鼠予孟鲁司特(1.6mg/只)灌胃,D组大鼠予Vit A 10 U /只口服进行干预,干预过程持续1周。分别在实验第36天及实验第43天将四组大鼠分两批处死,每组5只/批/次。过程如下:先以颈椎脱臼法处死大鼠后,立即用手术剪打开大鼠胸腔,抽取心脏血2.5ml~5ml,并离心,取出血清置于-20℃冰箱中冷藏。随后行气管插管,以1ml磷酸盐缓冲液(PBS)灌洗3次,回收率达50%以上。先取0.1ml BALF加入0.9 ml白细胞计数液中,在显微镜下行白细胞计数,再将余下的肺泡灌洗液5000转离心5min,把BALF离心后的沉淀溶于PBS中,混匀,制备3张涂片,以吉姆萨染色液染色。每个标本计数200个细胞,按巨噬细胞、嗜酸性粒细胞进行分类。然后分离未灌洗侧肺脏制备成匀浆,测定各组大鼠肺组织及血清中的TNF-a、IFN-γ和IL-4。结果:(1)实验第36天:哮喘组大鼠BALF中细胞总数、嗜酸性粒细胞和巨噬细胞的数目及血清、肺组织中的TNF-a和IL-4的浓度均高于孟鲁司特组和正常组,而IFN-γ的浓度低于孟鲁司特组和正常组,且差异均有统计学意义(P<0.05),哮喘组BALF中细胞数、血清、肺组织中IL-4、TNF-a和IFN-γ的浓度与维生素A组相比,差异均无统计学意义(P>0.05);正常组大鼠中细胞总数、嗜酸性粒细胞和巨噬细胞数及TNF-a和IL-4的浓度均低于维生素A组与孟鲁司特组大鼠,IFN-γ的浓度高于维生素A组与孟鲁司特组,差异均有统计学意义(P<0.05);维生素A组和孟鲁司特组间比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。(2)实验第43天:哮喘组大鼠BALF中细胞总数、嗜酸性粒细胞和巨噬细胞数及血清、肺组织中的TNF-a和IL-4的浓度均高于其他三组,而IFN-γ的浓度低于其他三组,且差异均有统计学意义(P<0.05);正常组大鼠中细胞总数、嗜酸性粒细胞和巨噬细胞数及TNF-a和IL-4的浓度均低于维生素A组和孟鲁司特组,IFN-γ值高于维生素A组和孟鲁司特组,差异均有统计学意义(P<0.05);维生素A组和孟鲁司特组间比较,除血清中IL-4和IFN-γ外差异均有统计学意义(P<0.05)。(3)实验第43天时,维生素A组大鼠BALF中细胞总数、嗜酸性粒细胞和巨噬细胞数及血清、肺组织中的TNF-a和IL-4的浓度均低于实验第36天时,差异均有统计学意义(P<0.05);IFN-γ值较前升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:(1)哮喘大鼠血清、肺组织中TNF-a和IL-4浓度增高,IFN-γ浓度降低,表明Th1/ Th2失衡在哮喘的发病中起着重要作用。(2)实验第36天,维生素A组大鼠肺组织及血清中TNF-a、IL-4和IFN-γ浓度较哮喘组无明显差异,提示在哮喘急性期,维生素A治疗效果不佳。实验第43天时,维生素A组、孟鲁司特组中哮喘大鼠的TNF-a和IL-4浓度较哮喘组大鼠降低,IFN-γ浓度升高,提示维生素A和孟鲁司特都有一定的调节Th1/ Th2失衡作用。(3)维生素A对哮喘大鼠有一定治疗作用,但效果较孟鲁司特弱。

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英文缩略词表  5-6中文摘要  6-8英文摘要  8-10前言  10-12材料与方法  12-17结果  17-22讨论  22-28结论  28-29参考文献  29-33附录  33-34致谢  34-35综述  35-43  参考文献  41-43

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中图分类: > 医药、卫生 > 儿科学 > 小儿内科学 > 小儿呼吸系及胸部疾病
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