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五味子合剂干预糖尿病肾病小鼠肾小球纤维化进展的实验研究

作　者: 袁沙沙
导　师: 张勉之
学　校: 天津医科大学
专　业: 中西医结合临床
关键词: 五味子合剂糖尿病肾病纤维化 EndMT α-SMA
分类号: R285
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

目的：观察五味子合剂对糖尿病肾肾病小鼠肾小球纤维化进展的影响,探讨五味子合剂治疗肾小球纤维化的可能机制。方法：雄性C57BL/6小鼠24只,6-7周龄,体重20-25g,随机分为对照组6只、DN模型组9只、五味子合剂治疗组9只,链脲菌素(Streptozotocin, STZ) 125mg/kg两次腹腔注射诱导DN小鼠模型。诱导成功后五味子合剂治疗组给予五味子合剂灌胃。对照组和模型组给予等量自来水灌胃。分别于0、3、6、9周剪尾取血用氧化酶法检测血糖、用电子天平称体重；实验结束前留尿用高效液相色谱法测尿蛋白、尿肌酐；动物处死时留右肾肾称重。计算尿蛋白肌酐比(Urinary Albumin Creatinine Ratio, ACR),’肾脏肥大指数即肾体重比(Kidney to Body Weight Ratio, KBWR)。肾组织,行PASM、Masson染色,光镜下观察肾组织形态改变,计算肾肾小球损伤指数(Glomerulosclerotic Injury, GSI)。免疫组化检查各组肾组织的纤粘蛋白(Fibronectin, FN)的表达,免疫荧光检测各组抗原异簇31(Cluster of Differentiation 31, CD31)和α-平滑肌肌动蛋白(α-Smooth Muscle Actin,α-SMA)的表达,western blot检测各组α-SMA的表达。结果：与对照组相比模型组不同时期血糖明显升高,体重下降,ACR、KBWR以及GSI明显升高,且随着病程的进展,ACR持续增加；模型组9W时PASM染色可见肾小球毛细血管面积增大、系膜区扩张、系膜基质增生及肾小球基底膜增厚、纤维性新月体形成；Masson染色及FN免疫组化可见肾小球系膜区及小管间质区可见大量ECM沉积；Western blot结果显示：随着病程进展,a-SMA表达持续上调。免疫荧光结果CD31的表达持续下调,a-SMA表达持续上调。与模型组相比,五味子合剂治疗组在血糖和体重虽有一定程度的改善,但除三周外其余各期差异无统计学意义。ACR、KBWR及GSI明显下降,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。CD31表达上调,α-SMA的表达下调(P<0.05)；小球系膜区FN的表达减少；系膜区细胞外基质堆积减轻。结论：五味子合剂可以抑制系膜细胞增殖和MFB活化以及EndMT从而减少ECM的生成,促进ECM的降解,阻止和延缓肾小球的纤维化进展。

全文目录

中文摘要  4-5
Abstract  5-8
缩略语  8-10
前言  10-14
  研究现状、成果  10-13
  研究目的、方法  13-14
材料和方法  14-23
结果  23-31
讨论  31-35
结论  35-36
参考文献  36-40
发表论文和参加科研情况说明  40-41
附录  41-46
综述糖尿病肾病动物模型研究进展  46-63
  综述参考文献  59-63
致谢  63

五味子合剂干预糖尿病肾病小鼠肾小球纤维化进展的实验研究

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