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茶藨子叶状层菌的深层发酵及其菌丝质量标准研究

作　者: 秦国培
导　师: 徐凌川
学　校: 山东中医药大学
专　业: 生药学
关键词: 茶藨子叶状层菌深层发酵菌丝质量标准
分类号: R284
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
下　载: 50次
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内容摘要

目的:对茶藨子叶状层菌的液体深层发酵工艺及其发酵菌丝的质量控制进行了系统研究,为茶藨子叶状层菌液体发酵的工业化生产和后续开发利用及质量标准的制定提供实验资料和科学依据。方法:1.采用组织分离方法获得茶藨子叶状层菌的纯菌株,通过单因素实验确定该菌的最佳培养基组成和深层发酵培养的最适条件,通过发酵罐生产实验确定了工业生产的发酵周期和生产出了供以后实验研究用菌丝。2.在药材质量控制方面,对菌丝和粉末进行了显微鉴别,对菌丝进行了理化和薄层色谱鉴别;依据《中国药典》(2010版)关于中药材质量标准的有关规定,对茶藨子叶状层菌菌丝的水分、总灰分和酸不溶性灰分进行检查,测定了水溶性和醇溶性浸出物的含量;用氨基酸分析仪测定氨基酸的含量,RP-HPLC测定菌丝中游离麦角甾醇的含量,硫酸-苯酚法测定菌丝多糖的含量。结果:1.分离获得了茶藨子叶状层菌的纯菌株,确定了摇瓶发酵最佳培养基组成为:麸皮4%,蛋白胨0.2%,葡萄糖2.5%,磷酸二氢钾0.05%,硫酸镁0.025%;摇瓶发酵最适发酵条件为:温度29℃,装液量80ml?250ml三角瓶,摇瓶转速150rpm,初始pH自然,培养7d;5吨发酵罐发酵条件:装量3000L,接种量10%,温度29±1℃,搅拌转速160rpm,通气量80m3/h,初始pH6.0~6.5,培养4d。2.根据质量控制实验结果,初步制定了茶藨子叶状层菌菌丝的质量标准草案,其中水分含量不得过12.0%,总灰分含量不得过6.0%,酸不溶性灰分含量不得过0.50 %;水溶性浸出物含量(热浸法)不得少于25.0%,醇溶性浸出物含量不得少于15.0%;氨基酸总量不得少于30.0 %。麦角甾醇含量不得少于0.10 %,多糖含量不得少于5.0%。

茶藨子叶状层菌的深层发酵及其菌丝质量标准研究

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